摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-24页 |
1.1 猪肉质性状概述 | 第13-14页 |
1.1.1 研究猪肉质性状的意义 | 第13页 |
1.1.2 研究猪种的优势 | 第13页 |
1.1.3 肉质性状的判定标准 | 第13-14页 |
1.1.4 影响猪肉质性状的因素 | 第14页 |
1.2 Fsp27简介 | 第14-19页 |
1.2.1 cidec/Fsp27的发现及同源性分析 | 第14-16页 |
1.2.2 cidec/Fsp27参与脂滴的形成与发展 | 第16-17页 |
1.2.3 cidec/Fsp27家族蛋白在脂肪代谢中的功能 | 第17-18页 |
1.2.4 cidec/Fsp27在肝脏中的功能 | 第18-19页 |
1.3 免疫共沉淀 | 第19-20页 |
1.4 质谱介绍与数据分析 | 第20-21页 |
1.4.1 质谱介绍 | 第20页 |
1.4.2 基因注释分析 | 第20-21页 |
1.4.3 基因集功能富集分析 | 第21页 |
1.5 酵母双杂交载体的构建 | 第21-22页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-45页 |
2.1 实验材料 | 第24页 |
2.1.1 实验动物饲喂及采样 | 第24页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第24页 |
2.2 主要仪器、试剂和溶液的配制方法 | 第24-28页 |
2.2.1 主要仪器及厂家 | 第24-26页 |
2.2.2 主要试剂 | 第26页 |
2.2.3 主要溶液的配制方法 | 第26-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-45页 |
2.3.1 实时定量PCR | 第28-30页 |
2.3.2 试剂盒使用 | 第30-31页 |
2.3.3 免疫共沉淀 | 第31-32页 |
2.3.4 聚丙烯凝胶电泳 | 第32-33页 |
2.3.5 银染 | 第33-34页 |
2.3.6 质谱分析 | 第34页 |
2.3.7 载体构建的引物设计 | 第34-35页 |
2.3.8 PCR扩增体系 | 第35-36页 |
2.3.9 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36-37页 |
2.3.10 PCR目的产物的回收与纯化 | 第37页 |
2.3.11 平末端PCR产物3’端加“A”尾 | 第37-38页 |
2.3.12 目的片段与T载体的连接 | 第38页 |
2.3.13 大肠杆菌DH5α感受态的制备与转化 | 第38-39页 |
2.3.14 重组质粒的筛选与鉴定 | 第39页 |
2.3.15 重组质粒的抽提 | 第39-40页 |
2.3.16 重组质粒的双酶切 | 第40-43页 |
2.3.17 目的片段与表达载体连接 | 第43-44页 |
2.3.18 生物分析相关软件或网站 | 第44-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-66页 |
3.1 小鼠的饲喂情况 | 第45页 |
3.2 禁食与高脂情况对肝脏和脂肪组织cidec表达量的影响 | 第45-46页 |
3.3 禁食与高脂情况下对肝脏TG(Triglyceride)含量的影响 | 第46-47页 |
3.4 免疫共沉淀获取CIDEC互作蛋白 | 第47-49页 |
3.5 质谱结果分析 | 第49-63页 |
3.5.1 同一组织不同营养状态下CIDEC互作蛋白的分析 | 第49-59页 |
3.5.2 不同组织在同一营养状态下CIDEC互作蛋白分析 | 第59-63页 |
3.6 载体的构建 | 第63-66页 |
第四章 讨论与展望 | 第66-69页 |
4.1 讨论 | 第66-68页 |
4.2 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第75页 |