摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语表(Abbreviations) | 第9-13页 |
1 前言 | 第13-15页 |
2 实验材料 | 第15-19页 |
2.1 细胞株 | 第15页 |
2.2 实验动物 | 第15页 |
2.3 试剂 | 第15-16页 |
2.4 仪器设备 | 第16页 |
2.5 试剂配制 | 第16-19页 |
2.5.1 DMEM细胞培养基 | 第16-17页 |
2.5.2 神经元培养基 | 第17页 |
2.5.3 MEM细胞培养液 | 第17页 |
2.5.4 0.01mol/L磷酸缓冲盐溶液(PBS) | 第17页 |
2.5.5 MTT工作液 | 第17页 |
2.5.6 胰酶储备液 | 第17页 |
2.5.7 胰酶工作液 | 第17-18页 |
2.5.8 多聚赖氨酸工作液(PLL) | 第18页 |
2.5.9 0.1mol/LPB溶液 | 第18页 |
2.5.10 4%多聚甲醛溶液 | 第18页 |
2.5.11 脑片准备液 | 第18页 |
2.5.12 脑片培养液 | 第18页 |
2.5.13 浓酸溶液 | 第18页 |
2.5.14 BSA溶液 | 第18-19页 |
3 实验方法 | 第19-25页 |
3.1 SH-SY5Y细胞培养 | 第19页 |
3.2 神经元细胞制备和培养 | 第19页 |
3.3 脑片的制备和培养 | 第19-20页 |
3.4 MTT法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞存活率 | 第20页 |
3.5 酶标法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞培养液中LDH活性 | 第20页 |
3.6 Hoechst 33342 染色观察SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡形态的变化 | 第20-21页 |
3.7 TUNEL法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡 | 第21页 |
3.8 Annexin V/PI标记染色检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡 | 第21-22页 |
3.9 全自动酶标仪检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞活性氧(ROS)含量 | 第22页 |
3.10 比色法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞MDA含量 | 第22-23页 |
3.11 酶标法检测细胞内Caspase-3 的活性 | 第23页 |
3.12 TUNEL法检测脑片神经元凋亡 | 第23页 |
3.13 统计学分析 | 第23-25页 |
4 结果 | 第25-41页 |
4.1 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞的毒性和机制研究 | 第25-32页 |
4.1.1 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞增殖的影响 | 第25页 |
4.1.2 LDH法检测替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞的损伤作用 | 第25-26页 |
4.1.3 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞核形态的影响 | 第26-27页 |
4.1.4 Tunel法观察SH-SY5Y细胞凋亡情况 | 第27-29页 |
4.1.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
4.1.6 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内ROS含量的影响 | 第30页 |
4.1.7 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内MDA含量的影响 | 第30-31页 |
4.1.8 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内Caspase-3 活性的影响 | 第31-32页 |
4.2 替诺福韦酯对神经元细胞的毒性和机制研究 | 第32-39页 |
4.2.1MTT法检测替诺福韦酯对神经元细胞增殖的影响 | 第32页 |
4.2.2 LDH法检测替诺福韦酯对神经元细胞的损伤作用 | 第32-33页 |
4.2.3 替诺福韦酯对神经元细胞核形态的影响 | 第33-34页 |
4.2.4 Tunel法观察神经元细胞凋亡情况 | 第34-36页 |
4.2.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测替诺福韦酯对神经元细胞凋亡的影响 | 第36-37页 |
4.2.6 替诺福韦酯对神经元细胞内ROS含量的影响 | 第37页 |
4.2.7 替诺福韦酯对神经元细胞内MDA含量的影响 | 第37-38页 |
4.2.8 替诺福韦酯对神经元细胞内Caspase-3 活性的影响 | 第38-39页 |
4.3 替诺福韦酯对脑片神经细胞凋亡的影响 | 第39-41页 |
5 讨论 | 第41-44页 |
6 结论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
文献综述 替诺福韦酯的药物毒性 | 第50-66页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |