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替诺福韦酯对神经的损伤与机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略语表(Abbreviations)第9-13页
1 前言第13-15页
2 实验材料第15-19页
    2.1 细胞株第15页
    2.2 实验动物第15页
    2.3 试剂第15-16页
    2.4 仪器设备第16页
    2.5 试剂配制第16-19页
        2.5.1 DMEM细胞培养基第16-17页
        2.5.2 神经元培养基第17页
        2.5.3 MEM细胞培养液第17页
        2.5.4 0.01mol/L磷酸缓冲盐溶液(PBS)第17页
        2.5.5 MTT工作液第17页
        2.5.6 胰酶储备液第17页
        2.5.7 胰酶工作液第17-18页
        2.5.8 多聚赖氨酸工作液(PLL)第18页
        2.5.9 0.1mol/LPB溶液第18页
        2.5.10 4%多聚甲醛溶液第18页
        2.5.11 脑片准备液第18页
        2.5.12 脑片培养液第18页
        2.5.13 浓酸溶液第18页
        2.5.14 BSA溶液第18-19页
3 实验方法第19-25页
    3.1 SH-SY5Y细胞培养第19页
    3.2 神经元细胞制备和培养第19页
    3.3 脑片的制备和培养第19-20页
    3.4 MTT法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞存活率第20页
    3.5 酶标法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞培养液中LDH活性第20页
    3.6 Hoechst 33342 染色观察SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡形态的变化第20-21页
    3.7 TUNEL法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡第21页
    3.8 Annexin V/PI标记染色检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞凋亡第21-22页
    3.9 全自动酶标仪检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞活性氧(ROS)含量第22页
    3.10 比色法检测SH-SY5Y细胞和神经元细胞MDA含量第22-23页
    3.11 酶标法检测细胞内Caspase-3 的活性第23页
    3.12 TUNEL法检测脑片神经元凋亡第23页
    3.13 统计学分析第23-25页
4 结果第25-41页
    4.1 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞的毒性和机制研究第25-32页
        4.1.1 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞增殖的影响第25页
        4.1.2 LDH法检测替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞的损伤作用第25-26页
        4.1.3 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞核形态的影响第26-27页
        4.1.4 Tunel法观察SH-SY5Y细胞凋亡情况第27-29页
        4.1.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞凋亡的影响第29-30页
        4.1.6 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内ROS含量的影响第30页
        4.1.7 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内MDA含量的影响第30-31页
        4.1.8 替诺福韦酯对SH-SY5Y细胞内Caspase-3 活性的影响第31-32页
    4.2 替诺福韦酯对神经元细胞的毒性和机制研究第32-39页
        4.2.1MTT法检测替诺福韦酯对神经元细胞增殖的影响第32页
        4.2.2 LDH法检测替诺福韦酯对神经元细胞的损伤作用第32-33页
        4.2.3 替诺福韦酯对神经元细胞核形态的影响第33-34页
        4.2.4 Tunel法观察神经元细胞凋亡情况第34-36页
        4.2.5 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测替诺福韦酯对神经元细胞凋亡的影响第36-37页
        4.2.6 替诺福韦酯对神经元细胞内ROS含量的影响第37页
        4.2.7 替诺福韦酯对神经元细胞内MDA含量的影响第37-38页
        4.2.8 替诺福韦酯对神经元细胞内Caspase-3 活性的影响第38-39页
    4.3 替诺福韦酯对脑片神经细胞凋亡的影响第39-41页
5 讨论第41-44页
6 结论第44-46页
参考文献第46-50页
文献综述 替诺福韦酯的药物毒性第50-66页
    参考文献第62-66页
致谢第66-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68-69页

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