| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 7-氨基头孢烷酸和去乙酰基7-氨基头孢烷酸的性质和用途 | 第12-15页 |
| 1.1.1 头孢菌素类抗生素简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 7-氨基头孢烷酸和去乙酰基7-氨基头孢烷酸的性质和用途 | 第13-15页 |
| 1.2 去乙酰基7-氨基头孢烷酸的制备方法 | 第15-17页 |
| 1.2.1 化学法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 两步酶法 | 第16页 |
| 1.2.3 头孢菌素去乙酰基酶法 | 第16-17页 |
| 1.3 头孢菌素去乙酰酶 | 第17-20页 |
| 1.3.1 酶的来源 | 第17页 |
| 1.3.2 关于枯草芽孢杆菌中头孢菌素乙酰水解酶的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.3 关于红酵母中头孢菌素乙酰水解酶的研究 | 第18-19页 |
| 1.3.4 CAH酶活检测的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 酶和细胞的固定化 | 第20-22页 |
| 1.4.1 固定化的意义 | 第20页 |
| 1.4.2 酶的固定化 | 第20-21页 |
| 1.4.3 细胞的固定化 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题的意义和研究主要内容 | 第22-24页 |
| 1.5.1 本课题的意义 | 第22页 |
| 1.5.2 本课题主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第2章 产CAH菌种的筛选 | 第24-32页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.1 土壤样品和菌种 | 第25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.3 实验主要试剂 | 第26页 |
| 2.2.4 培养基 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.1 富集培养筛菌 | 第26-27页 |
| 2.3.2 实验室保存菌种及购买菌种筛菌 | 第27页 |
| 2.3.3 CAH酶活测定方法 | 第27-28页 |
| 2.3.4 菌体浓度的测定 | 第28页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第28-31页 |
| 2.4.1 富集筛菌结果 | 第28-29页 |
| 2.4.2 实验室保存菌种及购买菌种筛菌结果 | 第29页 |
| 2.4.3 LHS3702菌株鉴定 | 第29-30页 |
| 2.4.4 Rhodotorula glutinis LHS3072中的CAH位置 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 Rhodotorula glutinis LHS3072静息细胞催化7-ACA脱乙酰基 | 第32-42页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.1 菌种 | 第32页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第32页 |
| 3.2.4 培养基 | 第32-33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.3.1 pH测定方法 | 第33页 |
| 3.3.2 Rhodotorula glutinis LHS3072培养方法 | 第33页 |
| 3.3.3 CAH酶活测定 | 第33-35页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第35-40页 |
| 3.4.1 温度对静息细胞CAH酶活力的影响 | 第35页 |
| 3.4.2 pH对静息细胞CAH酶活力的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.3 静息细胞CAH的热稳定性 | 第36页 |
| 3.4.4 静息细胞CAH的pH稳定性 | 第36-37页 |
| 3.4.5 缓冲体系的优化 | 第37-38页 |
| 3.4.6 底物浓度的优化 | 第38页 |
| 3.4.7 静息细胞重复利用次数 | 第38-39页 |
| 3.4.8 静息细胞催化D-7-ACA的乙酰化反应研究 | 第39-40页 |
| 3.5 小结 | 第40-42页 |
| 第4章 Rhodotorula glutinis LHS3072细胞的固定化研究 | 第42-50页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第42页 |
| 4.2.1 菌种 | 第42页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第42页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2.4 培养基 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 4.3.1 聚丙烯酰胺固定化方法中凝胶总浓度(T%)和交联度(C%)的确定 | 第42-43页 |
| 4.3.2 固定化细胞最佳细胞浓度的确定 | 第43页 |
| 4.3.3 酶活测定 | 第43-44页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第44-49页 |
| 4.4.1 最佳固定化凝胶总浓度和交联度的确定 | 第44-45页 |
| 4.4.2 最佳固定化细胞浓度的确定 | 第45-46页 |
| 4.4.3 固定化细胞催化反应的最优pH | 第46-47页 |
| 4.4.4 固定化细胞催化反应的最优T | 第47-48页 |
| 4.4.5 固定化细胞的pH稳定性 | 第48页 |
| 4.4.6 固定化细胞的热稳定性 | 第48-49页 |
| 4.4.7 固定化细胞的循环使用 | 第49页 |
| 4.5 小结 | 第49-50页 |
| 第5章 Rhodotorula glutinis LHS3072培养基组分及培养条件的优化 | 第50-59页 |
| 5.1 引言 | 第50页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 5.2.1 菌种 | 第50页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第50页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 5.2.4 培养基 | 第51页 |
| 5.3 实验方法 | 第51-52页 |
| 5.3.1 pH测定方法 | 第51页 |
| 5.3.2 菌体浓度的测定 | 第51页 |
| 5.3.3 葡萄糖测定方法 | 第51页 |
| 5.3.4 蔗糖测定方法 | 第51-52页 |
| 5.3.5 甘油测定方法 | 第52页 |
| 5.3.6 绘制粘红酵母的生长曲线 | 第52页 |
| 5.3.7 绘制OD对应干重的标准曲线 | 第52页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 5.4.1 菌体OD-干重标准曲线的确定 | 第52页 |
| 5.4.2 菌体生长曲线的确定 | 第52-53页 |
| 5.4.3 不同生长时刻菌体的酶活情况 | 第53-54页 |
| 5.4.4 不同碳源对产酶的影响 | 第54页 |
| 5.4.5 葡萄糖效应 | 第54-55页 |
| 5.4.6 不同氮源对产酶的影响 | 第55-57页 |
| 5.4.7 培养pH的优化 | 第57-58页 |
| 5.5 小结 | 第58-59页 |
| 第6章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 6.1 结论 | 第59页 |
| 6.2 展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
