| 目录 | 第4-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-35页 |
| 1 昆虫体内生物活性物质的研究现状 | 第16-30页 |
| 1.1 昆虫抗菌肽 | 第16-19页 |
| 1.1.1 昆虫抗菌肽的类型 | 第17-18页 |
| 1.1.1.1 天蚕素类抗菌肽族 | 第17页 |
| 1.1.1.2 昆虫防御素 | 第17-18页 |
| 1.1.1.3 富含脯氨酸的抗菌肽族 | 第18页 |
| 1.1.1.4 富含甘氨酸的抗菌肽族 | 第18页 |
| 1.1.2 昆虫抗菌肽的应用 | 第18-19页 |
| 1.2 昆虫抗病毒蛋白/多肽 | 第19-24页 |
| 1.2.1 病毒简介及其危害 | 第19-20页 |
| 1.2.2 抗病毒蛋白的研究现状 | 第20-23页 |
| 1.2.3 昆虫抗病毒蛋白/多肽的研究现状 | 第23-24页 |
| 1.3 昆虫凝集素 | 第24-25页 |
| 1.4 昆虫溶菌酶和多酚氧化酶 | 第25-26页 |
| 1.5 昆虫金属硫蛋白 | 第26-27页 |
| 1.6 昆虫抗冻蛋白 | 第27页 |
| 1.7 昆虫几丁糖 | 第27-29页 |
| 1.8 昆虫体内其他活性物质的应用 | 第29-30页 |
| 2 蛋白质分离纯化常用技术手段 | 第30-32页 |
| 2.1 离子交换色谱 | 第30-31页 |
| 2.2 凝胶过滤色谱 | 第31页 |
| 2.3 亲和色谱 | 第31页 |
| 2.4 共价色谱 | 第31-32页 |
| 3 家蝇的利用研究现状 | 第32-33页 |
| 4 本课题的选题思想及研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 家蝇幼虫清蛋白的抗病毒和抗氧化活性研究 | 第35-49页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-40页 |
| 2.1 材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 试虫及其饲养方法 | 第36页 |
| 2.1.2 病毒来源 | 第36页 |
| 2.1.3 细胞和实验动物 | 第36-37页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第37页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 2.2.1 脱脂蝇蛆粉的制备 | 第38页 |
| 2.2.2 家蝇幼虫清蛋白的分离提取工艺 | 第38页 |
| 2.2.3 家蝇幼虫清蛋白的抗病毒活性测定 | 第38-39页 |
| 2.2.3.1 对sf9细胞生长的影响 | 第38页 |
| 2.2.3.2 抗AcMNFV活性测定 | 第38-39页 |
| 2.2.3.3 抗家蚕病毒BmNPV感染试验 | 第39页 |
| 2.2.4 家蝇幼虫清蛋白的抗氧化活性测定 | 第39-40页 |
| 2.2.4.1DPPH自由基清除活性测定 | 第39页 |
| 2.2.4.2 对H_2O_2诱导的红细胞氧化溶血的影响 | 第39页 |
| 2.2.4.3 对大鼠肝匀浆脂质过氧化的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.4.4 对小鼠肝线粒体脂质过氧化的影响 | 第40页 |
| 2.2.4.5 对老龄小鼠脂质过氧化水平和抗氧化酶活性的影响 | 第40页 |
| 2.2.5 数据统计 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-46页 |
| 3.1 家蝇幼虫清蛋白(PEF)的抗病毒活性测定 | 第40-43页 |
| 3.1.1 对sf9细胞生长的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.2 抗AcMNPV活性测定 | 第41页 |
| 3.1.3 抗AcMNPV的活性观察 | 第41-42页 |
| 3.1.4 对BmNPV感染家蚕的抑制作用 | 第42-43页 |
| 3.1.5 抗BmNPV感染家蚕试验的活性观察 | 第43页 |
| 3.2 家蝇幼虫清蛋白的抗氧化活性测定 | 第43-46页 |
| 3.2.1 DPPH自由基清除活性测定 | 第43-44页 |
| 3.2.2 对H_2O_2诱导的红细胞氧化溶血的影响 | 第44页 |
| 3.2.3 对大鼠肝匀浆脂质过氧化的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.4 对小鼠肝线粒体脂质过氧化的影响 | 第45页 |
| 3.2.5 对老龄小鼠脂质过氧化水平和抗氧化酶活性的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 家蝇幼虫清蛋白的免疫药理活性研究 | 第49-60页 |
| 1 引言 | 第49-50页 |
| 2 材料和方法 | 第50-54页 |
| 2.1 材料 | 第50-51页 |
| 2.1.1 供试样品 | 第50页 |
| 2.1.2 细胞和实验动物 | 第50页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 2.2.1 对小鼠体重及免疫器官的影响 | 第51-52页 |
| 2.2.2 对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第52页 |
| 2.2.3 对小鼠迟发型超敏反应的影响 | 第52页 |
| 2.2.4 对半数溶血值的影响 | 第52页 |
| 2.2.5 对T、B淋巴细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.6 对NK细胞杀伤活性的影响 | 第53页 |
| 2.2.7 对IL-2活性的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.8 急性毒性试验 | 第54页 |
| 2.2.9 数据统计 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-58页 |
| 3.1 对小鼠体重及免疫器官的影响 | 第54页 |
| 3.2 对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 对小鼠迟发型超敏反应的影响 | 第55-56页 |
| 3.4 对半数溶血值的影响 | 第56-57页 |
| 3.5 对T、B淋巴细胞增殖的影响 | 第57页 |
| 3.6 对NK细胞杀伤活性的影响 | 第57-58页 |
| 3.7 对IL-2活性的影响 | 第58页 |
| 3.8 小鼠的急性毒性试验 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 家蝇幼虫抗病毒蛋白的分离纯化研究 | 第60-73页 |
| 1 引言 | 第60-61页 |
| 2 材料和方法 | 第61-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第61页 |
| 2.2 实验试剂 | 第61-62页 |
| 2.3 实验设备和仪器 | 第62页 |
| 2.4 实验方法 | 第62-66页 |
| 2.4.1 离子交换色谱DEAE-52柱层析 | 第62-63页 |
| 2.4.1.1 DEAE-52柱层析材料溶胀 | 第62页 |
| 2.4.1.2 漂洗 | 第62页 |
| 2.4.1.3 活化 | 第62页 |
| 2.4.1.4 装柱 | 第62-63页 |
| 2.4.1.5 柱平衡 | 第63页 |
| 2.4.1.6 样品预处理 | 第63页 |
| 2.4.1.7 上样与洗脱 | 第63页 |
| 2.4.1.8 样品浓缩 | 第63页 |
| 2.4.1.9 抗AcMNPV活性测定 | 第63页 |
| 2.4.2 凝胶过滤色谱Sephadex G-100柱层析 | 第63-65页 |
| 2.4.2.1 Seplmdex G-100柱材料的预处理 | 第63-64页 |
| 2.4.2.2 样品制备收集 | 第64页 |
| 2.4.2.3 上样及洗脱 | 第64页 |
| 2.4.2.4 样品收集与浓缩 | 第64页 |
| 2.4.2.5 各分离级分的抗病毒活性测定 | 第64-65页 |
| 2.4.3 凝胶过滤色谱Sephadex G-75柱层析 | 第65页 |
| 2.4.3.1 Sephadex G-75柱材料的处理 | 第65页 |
| 2.4.3.2 样品制备收集 | 第65页 |
| 2.4.3.3 上样及洗脱 | 第65页 |
| 2.4.3.4 样品收集与浓缩 | 第65页 |
| 2.4.3.5 各分离组分抗病毒活性测定 | 第65页 |
| 2.4.4 SDS-PAGE电泳分析 | 第65-66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-71页 |
| 3.1 家蝇幼虫清蛋白的DEAE-52柱层析分离 | 第66-67页 |
| 3.1.1 DEAE-52分离纯化图谱 | 第66-67页 |
| 3.1.2 抗病毒活性测定 | 第67页 |
| 3.2 级分A_2的Sephadex G-100柱层析分离 | 第67-69页 |
| 3.2.1 Sephadex G-100分离纯化图谱 | 第67-68页 |
| 3.2.2 抗病毒活性测定 | 第68-69页 |
| 3.2.2.1 抗AcMNPV活性测定 | 第68页 |
| 3.2.2.2 抗家蚕核型多角体病毒BmNPV感染试验 | 第68-69页 |
| 3.3 级分B_2的Sephadex G-75柱层析 | 第69-71页 |
| 3.3.1 Sephadex G-75分离纯化图谱 | 第69页 |
| 3.3.2 抗病毒活性测定 | 第69-70页 |
| 3.3.2.1 抗AcMNPV活性测定 | 第69-70页 |
| 3.3.2.2 抗家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的活性测定 | 第70页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE电泳分析 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 家蝇幼虫抗病毒蛋白的纯度鉴定、分子构象及其生物活性研究 | 第73-87页 |
| 1 引言 | 第73-74页 |
| 2 材料和方法 | 第74-77页 |
| 2.1 实验材料 | 第74页 |
| 2.2 实验试剂 | 第74页 |
| 2.3 实验设备和仪器 | 第74-75页 |
| 2.4 实验方法 | 第75-77页 |
| 2.4.1 凝胶过滤色谱鉴定抗病毒蛋白的纯度 | 第75页 |
| 2.4.2 RP-FIPLC分析 | 第75页 |
| 2.4.3 紫外光谱分析 | 第75页 |
| 2.4.4 傅立叶变换红外光谱分析 | 第75-76页 |
| 2.4.5 圆二色谱(CD)分析 | 第76页 |
| 2.4.6 荧光光谱分析 | 第76页 |
| 2.4.7 清除羟基自由基活性测定 | 第76-77页 |
| 2.4.8 清除超氧阴离子自由基活性测定 | 第77页 |
| 2.4.9 对淋巴细胞增殖活性的影响 | 第77页 |
| 3 结果与分析 | 第77-84页 |
| 3.1 凝胶过滤色谱鉴定蛋白的纯度 | 第77-78页 |
| 3.2 RP-HPLC分析 | 第78-79页 |
| 3.3 紫外光谱分析 | 第79页 |
| 3.4 傅立叶变换红外光谱分析 | 第79-80页 |
| 3.5 圆二色谱分析 | 第80-81页 |
| 3.6 荧光光谱分析 | 第81-82页 |
| 3.7 羟基自由基清除活性测定 | 第82-83页 |
| 3.8 超氧阴离子自由基清除活性测定 | 第83-84页 |
| 3.9 淋巴细胞增殖活性测定 | 第84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| 第六章 副产物几丁糖的制备及其生物活性研究 | 第87-101页 |
| 1 引言 | 第87-88页 |
| 2 材料和方法 | 第88-92页 |
| 2.1 材料 | 第88-89页 |
| 2.1.1 虫源 | 第88页 |
| 2.1.3 细胞和真菌 | 第88页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第88-89页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第89页 |
| 2.2 实验方法 | 第89-92页 |
| 2.2.1 副产物几丁糖的制备工艺 | 第89页 |
| 2.2.2 红外光谱分析 | 第89页 |
| 2.2.3 家蝇幼虫几丁糖的抗肿瘤活性测定 | 第89-90页 |
| 2.2.4 家蝇幼虫几丁糖的抗氧化活性测定 | 第90-91页 |
| 2.2.4.1 DPPH自由基清除活性测定 | 第90页 |
| 2.2.4.2 还原力测定 | 第90页 |
| 2.2.4.3 金属离子鏊合能力测定 | 第90-91页 |
| 2.2.4.4 羟基自由基活性测定 | 第91页 |
| 2.2.4.5 超氧阴离子自由基活性测定 | 第91页 |
| 2.2.5 家蝇幼虫几丁糖的抗真菌活性测定 | 第91-92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-99页 |
| 3.1 家蝇幼虫几丁糖的红外光谱分析 | 第92页 |
| 3.2 家蝇幼虫几丁糖的抗肿瘤活性测定 | 第92-93页 |
| 3.3 家蝇幼虫几丁糖的抗氧化活性测定 | 第93-96页 |
| 3.3.1 DPPH自由基清除活性测定 | 第93-94页 |
| 3.3.2 羟基自由基活性测定 | 第94页 |
| 3.3.3 超氧阴离子自由基活性测定 | 第94-95页 |
| 3.3.4 还原力测定 | 第95-96页 |
| 3.3.5 金属离子鏊合能力测定 | 第96页 |
| 3.4 家蝇幼虫几丁糖的抗真菌活性测定 | 第96-97页 |
| 3.5 家蝇幼虫几丁糖的抗真菌活性观察 | 第97-99页 |
| 4 讨论 | 第99-101页 |
| 4.1 家蝇幼虫几丁糖的抗肿瘤活性 | 第99-100页 |
| 4.2 家蝇幼虫几丁糖的抗氧化活性 | 第100页 |
| 4.3 家蝇幼虫几丁糖的抗真菌活性 | 第100-101页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第101-104页 |
| 1 全文总结 | 第101-102页 |
| 2 本研究的创新点 | 第102页 |
| 3 研究展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-123页 |
| 附录 攻读博士学位期间发表论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
