摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 香蕉束顶病毒B4蛋白拮抗尖孢镰刀菌的分析 | 第12-47页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 香蕉束顶病毒 | 第12-19页 |
1.1.1 香蕉束顶病毒的典型致病特征 | 第12-13页 |
1.1.2 香蕉束顶病的发生、传播方式及病害流行 | 第13-14页 |
1.1.3 感病植株的细胞病理学特性及变化 | 第14页 |
1.1.4 BBTV粒体形态及其分类地位 | 第14-15页 |
1.1.5 BBTV的基因组结构及其各组分编码蛋白 | 第15-17页 |
1.1.6 植物病毒抑制寄主RNA沉默的策略及BBTV基因沉默抑制子的特征 | 第17-19页 |
1.2 香蕉枯萎病的危害及其防控策略 | 第19-25页 |
1.2.1 香蕉枯萎病的典型症状及其病原尖孢镰刀菌 | 第19-21页 |
1.2.2 香蕉枯萎病的防控策略 | 第21-22页 |
1.2.3 抗性基因的导入和寄主诱导的基因沉默(HIGS)是抗真菌的有效方式 | 第22-25页 |
2 材料与方法 | 第25-32页 |
2.1 材料与试剂 | 第25页 |
2.1.1 香蕉束顶病毒毒源和本氏烟 | 第25页 |
2.1.2 菌种与质粒 | 第25页 |
2.1.3 试剂 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-32页 |
2.2.1 序列比对 | 第25页 |
2.2.2 蛋白B4的表达和纯化 | 第25-26页 |
2.2.3 荧光抗体的交联 | 第26页 |
2.2.4 B4抗血清的制备及其抗体IgG的纯化 | 第26-27页 |
2.2.5 PVX重组载体的构建以及农杆菌浸润本氏烟 | 第27-28页 |
2.2.6 植物总蛋白提取及western blot分析 | 第28页 |
2.2.7 透射电镜观察 | 第28页 |
2.2.8 B4蛋白体外拮抗Foc的活性分析 | 第28-29页 |
2.2.9 植物表达载体的构建和番茄转化 | 第29页 |
2.2.10 DEG(差异表达基因)的文库构建及其差异聚类分析 | 第29-31页 |
2.2.11 定量PCR验证分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
3.1 感染BBTV的香蕉增强对Foc-TR4的拮抗性 | 第33页 |
3.2 B4蛋白一级序列分析及原核表达 | 第33-35页 |
3.3 B4蛋白体外拮抗尖孢镰刀菌 | 第35-36页 |
3.4 B4蛋白的体内细胞定位 | 第36-38页 |
3.5 蛋白B4赋予转基因番茄对尖孢镰刀菌Fol的抗性 | 第38页 |
3.6 B4GFP转基因番茄与野生型番茄的差异表达谱及RT-qPCR验证 | 第38-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
第二章 鲍血篮蛋白抗菌肽对细菌的抑制分析 | 第47-71页 |
1 前言 | 第47-59页 |
1.1 软体动物血蓝蛋白的结构特征及其功能 | 第47-51页 |
1.2 鲍血蓝蛋白应答病原物侵染的先天性免疫 | 第51-57页 |
1.3 三维重构技术简介 | 第57-59页 |
1.3.1 中央截面定理 | 第57-58页 |
1.3.2 cryo-EM三维重构的方法及流程 | 第58-59页 |
2 材料与方法 | 第59-61页 |
2.1 材料与试剂 | 第59页 |
2.1.1 多肽和测试菌株 | 第59页 |
2.1.2 试剂 | 第59页 |
2.2 实验方法 | 第59-61页 |
2.2.1 多肽的合成及溶解 | 第59页 |
2.2.2 血蓝蛋白功能体FU-E的生信预测及序列比对 | 第59-60页 |
2.2.3 FU-E的3D结构同源模建 | 第60页 |
2.2.4 抗菌分析 | 第60-61页 |
3 结果与分析 | 第61-68页 |
3.1 血蓝蛋白功能体FU-E候选抗菌肽的保守性分析 | 第61-62页 |
3.2 Haliotisin的抗菌活性分析 | 第62-65页 |
3.3 Haliotisin结构分析 | 第65-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
全文总结与展望 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
已发表(或接受发表)的相关论文 | 第82页 |