| 英文缩略词 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 支架蛋白GIT2 募集去泛素化酶CYLD 抑制TRAF6 的泛素化负调控NF-κB 信号通路 | 第11-39页 |
| 第一节 引言 | 第11-12页 |
| 第二节 材料和方法 | 第12-17页 |
| ·质粒与抗体 | 第12页 |
| ·细胞培养和转染 | 第12-13页 |
| ·实验动物 | 第13页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第13页 |
| ·报告基因实验 | 第13页 |
| ·体内泛素化实验 | 第13-14页 |
| ·RNAi 实验 | 第14页 |
| ·小鼠基因分型 | 第14-15页 |
| ·小鼠骨髓巨噬细胞分离 | 第15页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第15-16页 |
| ·ELISA 实验 | 第16-17页 |
| ·小鼠体内LPS 刺激实验 | 第17页 |
| ·统计学分析 | 第17页 |
| 第三节 实验结果 | 第17-36页 |
| ·GIT2 与TRAF1 相互作用 | 第17-20页 |
| ·GIT2 与TRAF1、2、3、5、6 均有相互作用 | 第20-21页 |
| ·IL-1 促进GIT2 与TRAF6 的结合 | 第21页 |
| ·过表达GIT2 抑制NF-κB 信号通路活化 | 第21-24页 |
| ·敲低GIT2 促进NF-кB 通路的激活 | 第24-25页 |
| ·GIT2 敲除小鼠基因杂合子和纯合子的基因型鉴定 | 第25页 |
| ·细菌脂多糖LPS 刺激下，GIT2 敲除小鼠的骨髓巨噬细胞活IкBα的磷酸化和降解显著增加 | 第25-27页 |
| ·过表达GIT2 抑制TRAF6 的泛素化 | 第27-28页 |
| ·GIT2 促进CYLD 对TRAF6 的去泛素化 | 第28-30页 |
| ·GIT2 的SHD 结构域和PBS 结构域介导与TRAF6 的相互作用 | 第30-31页 |
| ·GIT2 的SHD 结构域介导与CYLD 的相互作用 | 第31-32页 |
| ·GIT2 的SHD 结构域和ARF-GAP 结构域能够抑制NF-кB 信号通路 | 第32页 |
| ·GIT2 敲除小鼠的骨髓巨噬细胞分泌的炎症因子显著增多 | 第32-35页 |
| ·GIT2 敲除小鼠腹腔注射LPS 后分泌的炎症因子显著多于野生型 | 第35-36页 |
| 第四节 讨论 | 第36-39页 |
| 第二部分 TRAF6 通过泛素化转录因子STAT3 激活JAK-STAT 通路 | 第39-48页 |
| 第一节 引言 | 第39页 |
| 第二节 材料和方法 | 第39-40页 |
| ·质粒和抗体 | 第39-40页 |
| ·细胞培养和转染 | 第40页 |
| ·免疫共沉淀 | 第40页 |
| ·报告基因实验 | 第40页 |
| ·实时定量 PCR | 第40页 |
| 第三节 实验结果 | 第40-45页 |
| ·TRAF6 与STAT3 发生相互作用，并介导STAT3 的泛素化 | 第40-42页 |
| ·TRAF6 促进STAT3 的转录活性 | 第42-43页 |
| ·RING 锌指结构域和 TRAF 型锌指结构域在激活 STAT3 的转录中起关键作用 | 第43-44页 |
| ·TRAF6 上调STAT3 靶基因的表达 | 第44-45页 |
| 第四节 讨论 | 第45-48页 |
| 总结与展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 附录 | 第58-73页 |
| 附录A 综述 | 第58-68页 |
| 附录B 培养基及常用溶液 | 第68-69页 |
| 附录C 引物序列及酶切位点 | 第69-71页 |
| 附录D 本文用到的载体名称及图谱 | 第71-73页 |
| 在读期间发表或投稿论文 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
