| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 猪流行性腹泻病毒、Delta冠状病毒和传染性胃肠炎病毒检测方法的研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1 病原概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 猪流行性腹泻病毒 | 第12页 |
| 1.1.2 猪Delta冠状病毒 | 第12-13页 |
| 1.1.3 猪传染性胃肠炎病毒 | 第13-14页 |
| 2.1 实验室主要诊断方法 | 第14-18页 |
| 2.1.1 血清中和试验 | 第14-15页 |
| 2.1.2 病毒分离培养与鉴定 | 第15页 |
| 2.1.3 免疫电镜技术 | 第15页 |
| 2.1.4 酶联免疫吸附试验 | 第15-16页 |
| 2.1.5 聚合酶链式反应 | 第16-18页 |
| 3.1 研究目的与意义 | 第18页 |
| 第2章 猪流行性腹泻病毒、Delta冠状病毒和传染性胃肠炎病毒三重RT-PCR检测方法的建立 | 第18-32页 |
| 1.1 材料 | 第19-21页 |
| 1.1.1 毒株和菌株 | 第19页 |
| 1.1.2 主要仪器、试剂和溶液配方 | 第19-21页 |
| 2.1 方法 | 第21-24页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第21页 |
| 2.1.2 毒株处理 | 第21页 |
| 2.1.3 cDNA模板的制备 | 第21-22页 |
| 2.1.4 单项RT-PCR反应条件的优化 | 第22页 |
| 2.1.5 PCR产物的回收与纯化 | 第22-23页 |
| 2.1.6 目的基因连接 | 第23页 |
| 2.1.7 转化 | 第23页 |
| 2.1.8 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.1.9 重组阳性质粒的测序与分析 | 第24页 |
| 3.1 三重RT-PCR反应条件的优化 | 第24-25页 |
| 3.1.1 特异性试验 | 第24页 |
| 3.1.2 敏感性试验 | 第24-25页 |
| 3.1.3 重复性试验 | 第25页 |
| 4.1 结果 | 第25-30页 |
| 4.1.1 单项RT-PCR扩增产物电泳结果 | 第25页 |
| 4.1.2 最适引物终浓度的确定 | 第25-26页 |
| 4.1.3 最适退火温度的确定 | 第26页 |
| 4.1.4 单项RT-PCR反应的敏感性 | 第26-27页 |
| 4.1.5 单项RT-PCR反应的特异性 | 第27页 |
| 4.1.6 三重RT-PCR引物终浓度的确定 | 第27-28页 |
| 4.1.7 三重RT-PCR退火温度的确定 | 第28页 |
| 4.1.8 特异性试验 | 第28-29页 |
| 4.1.9 敏感性试验 | 第29页 |
| 4.1.10 重复性试验 | 第29-30页 |
| 5.1 讨论 | 第30-32页 |
| 第3章 猪流行性腹泻病毒、Delta冠状病毒和传染性胃肠炎病毒三重RT-PCR检测方法的初步应用 | 第32-38页 |
| 1.1 材料与方法 | 第32-33页 |
| 1.1.1 临床待检病料 | 第32页 |
| 1.1.2 仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 1.1.3 三重RT-PCR最终反应条件 | 第33页 |
| 1.1.4 样品检测 | 第33页 |
| 2.1 样品检测结果 | 第33-35页 |
| 3.1 讨论 | 第35-38页 |
| 全文结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43页 |
