| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 符号说明 | 第8-10页 |
| 第一章 猪流行性腹泻病毒研究进展 | 第10-20页 |
| 1 PEDV概述 | 第10-13页 |
| 1.1 PEDV的形态结构 | 第10-11页 |
| 1.2 PEDV的理化与培养特性 | 第11页 |
| 1.3 PEDV生物学分类 | 第11-13页 |
| 2 PEDV基因组结构及主要编码的蛋白 | 第13-15页 |
| 2.1 PEDV的基因组结构 | 第13-14页 |
| 2.2 主要编码的蛋白及其功能 | 第14-15页 |
| 2.2.1 S(spike)蛋白及其功能 | 第14-15页 |
| 2.2.2 N(nucleocpsid)蛋白及其功能 | 第15页 |
| 2.2.3 M(membrane)蛋白及其功能 | 第15页 |
| 2.2.4 E(envelope)蛋白及其功能 | 第15页 |
| 2.2.5 ORF3蛋白及其功能 | 第15页 |
| 3 PED流行病学、临诊症状和发病机理 | 第15-17页 |
| 3.1 PED在亚洲的流行 | 第15-16页 |
| 3.2 流行特点 | 第16页 |
| 3.3 临诊症状 | 第16页 |
| 3.4 发病机理 | 第16-17页 |
| 4 PEDV诊断技术 | 第17-18页 |
| 4.1 免疫电镜法(IEM) | 第17页 |
| 4.2 免疫荧光法(IFA) | 第17页 |
| 4.3 微量血清中和试验 | 第17页 |
| 4.4 RT-PCR法 | 第17-18页 |
| 4.5 ELISA法 | 第18页 |
| 5 PEDV疫苗研究进展 | 第18-20页 |
| 5.1 组织灭活苗 | 第18页 |
| 5.2 细胞灭活苗 | 第18页 |
| 5.3 细胞弱毒苗 | 第18-19页 |
| 5.4 核酸疫苗 | 第19页 |
| 5.5 亚单位疫苗 | 第19-20页 |
| 第二章 基因2b亚型猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及基因序列分析 | 第20-30页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1.1 材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 病料与细胞 | 第20页 |
| 1.1.2 试剂 | 第20页 |
| 1.1.3 引物合成 | 第20-22页 |
| 1.2 方法 | 第22-23页 |
| 1.2.1 病料的处理 | 第22页 |
| 1.2.2 病毒的分离培养 | 第22页 |
| 1.2.3 病毒的鉴定 | 第22-23页 |
| 1.2.4 病毒总RNA提取 | 第23页 |
| 1.2.5 PEDV全基因的扩增 | 第23页 |
| 1.2.6 PEDV基因序列分析 | 第23页 |
| 2 结果 | 第23-28页 |
| 2.1 病毒的分离 | 第23-24页 |
| 2.2 病毒纯净性检测 | 第24页 |
| 2.3 TCID50滴定 | 第24-25页 |
| 2.4 间接免疫荧光(IFA)检测 | 第25-26页 |
| 2.5 PEDV基因组序列分析 | 第26-28页 |
| 2.5.1 全基因组核苷酸序列序列的同源性分析 | 第26页 |
| 2.5.2 基于全基因组的系统发育进化分析 | 第26-27页 |
| 2.5.3 S基因的同源性分析 | 第27-28页 |
| 2.5.4 S基因的系统发育进化分析 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 JSX2014株细胞灭活苗的制备 | 第30-40页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| 1.1 材料 | 第30页 |
| 1.1.1 细胞与毒株 | 第30页 |
| 1.1.2 试剂 | 第30页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第30页 |
| 1.2 方法 | 第30-33页 |
| 1.2.1 荧光定量PCR技术的应用 | 第30-31页 |
| 1.2.2 间接ELISA抗体检测方法的建立 | 第31-32页 |
| 1.2.3 JSX2014株细胞灭活疫苗的制备 | 第32页 |
| 1.2.4 JSX2014灭活苗免疫保护水平评估 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-38页 |
| 2.1 JSX2014株在Vero细胞上增殖不同时间的比较 | 第33-34页 |
| 2.2 JSX2014株接毒量对病毒在Vero细胞中增殖的影响 | 第34页 |
| 2.3 间接ELISA检测方法的建立 | 第34-37页 |
| 2.3.1 PEDV N蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| 2.3.2 抗原最佳包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第35页 |
| 2.3.3 最佳封闭液及封闭时间的优化结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 酶标抗体作用浓度的确定 | 第36页 |
| 2.3.5 阴阳性临界值的确定 | 第36-37页 |
| 2.3.6 间接ELISA抗体检测方法符合率试验结果 | 第37页 |
| 2.4 JSX2014株细胞灭活苗抗体效价评估 | 第37-38页 |
| 2.4.1 间接ELISA检测结果 | 第37页 |
| 2.4.2 微量血清中和试验检测结果 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 全文总结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录 | 第45-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
