目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-25页 |
1 镉的化学性质 | 第13页 |
2 镉对植物的胁迫效应 | 第13-14页 |
·镉胁迫对生理功能的破坏 | 第13-14页 |
·镉对生长发育的影响 | 第14页 |
3 植物对镉胁迫的响应机制 | 第14-16页 |
·酶系统对镉胁迫的反应 | 第14页 |
·镉胁迫响应基因的研究进展 | 第14-16页 |
4 蛋白质组学技术在植物环境胁迫响应机制中的应用 | 第16-24页 |
·蛋白质组学的概念产生背景 | 第16页 |
·蛋白质组学的方法和技术 | 第16-18页 |
·蛋白质样品的制备 | 第16-17页 |
·蛋白质组样品的分离 | 第17页 |
·蛋白质的鉴定技术 | 第17-18页 |
·生物信息学分析 | 第18页 |
·植物环境胁迫的蛋白质组学研究进展 | 第18-19页 |
·植物镉胁迫响应的蛋白质组学研究进展 | 第19-24页 |
5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第二部分 研究报告 | 第25-73页 |
第一章 适于双向电泳分析的萝卜蛋白质提取方法 #13体系建立 | 第25-35页 |
1 材料和方法 | 第26-29页 |
·材料与主要试剂 | 第26页 |
·萝卜叶片蛋白质提取方法 | 第26-27页 |
·肉质根蛋白质提取方法优化 | 第27页 |
·蛋白质的溶解与定量 | 第27-28页 |
·电泳检测与图像采集 | 第28-29页 |
·SDS-PAGE | 第28页 |
·双向电泳 | 第28-29页 |
2 结果分析 | 第29-34页 |
·萝卜叶片总蛋白质产量与SDS-PAGE | 第29-30页 |
·不同方法提取的萝卜叶片蛋白质的2-DE图谱比较 | 第30-32页 |
·肉质根蛋白的SDS-PAGE结果 | 第32-34页 |
3. 讨论 | 第34-35页 |
第二章 镉胁迫下萝卜叶片蛋白质的双向电泳分析 | 第35-45页 |
1. 材料和方法 | 第36-37页 |
·材料与主要试剂 | 第36页 |
·幼苗的培养与镉处理 | 第36页 |
·萝卜叶片蛋白质提取 | 第36页 |
·蛋白质溶解与定量 | 第36页 |
·SDS-PAGE | 第36-37页 |
·双向电泳 | 第37页 |
·考马斯亮蓝染色 | 第37页 |
·图像采集与分析 | 第37页 |
2. 结果分析 | 第37-43页 |
·镉胁迫下萝卜叶片的形态变化 | 第38-39页 |
·镉胁迫下萝卜叶片蛋白质的SDS-PAGE与双向电泳分析 | 第39-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
·镉胁迫对萝卜叶片形态影响 | 第43页 |
·镉胁迫对萝卜叶片蛋白质水平上的影响 | 第43-45页 |
第三章 镉胁迫下萝卜肉质根蛋白质双向电泳分析 #33与质谱鉴定 | 第45-59页 |
1 材料与方法 | 第46-48页 |
·幼苗的培养与处理 | 第46页 |
·蛋白质的提取 | 第46页 |
·蛋白质溶解与定量 | 第46页 |
·双向电泳 | 第46-47页 |
·考马斯亮蓝染色 | 第47页 |
·图像采集与分析 | 第47页 |
·质谱鉴定与数据库检索 | 第47-48页 |
2. 结果分析 | 第48-55页 |
·镉胁迫条件对萝卜肉质根生长发育的影响 | 第48页 |
·镉胁迫条件下萝卜肉质根蛋白表达谱的双向电泳分析 | 第48-52页 |
·部分差异蛋白质的质谱鉴定与功能分析 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-59页 |
·镉胁迫对萝卜肉质根生长发育的影响 | 第55页 |
·萝卜肉质根蛋白质组响应镉胁迫反应分析 | 第55-59页 |
·细胞防卫蛋白 | 第55-57页 |
·信号转导相关蛋白 | 第57页 |
·细胞代谢相关蛋白 | 第57页 |
·未知功能蛋白 | 第57-59页 |
第四章 镉胁迫相关基因的克隆与表达分析 | 第59-73页 |
1 材料与方法 | 第60-65页 |
·幼苗的培养与处理 | 第60页 |
·基因组DNA提取 | 第60-61页 |
·总RNA的提取 | 第61页 |
·RNA纯化与检测 | 第61-62页 |
·RNA反转录 | 第62页 |
·引物设计与合成 | 第62-63页 |
·基因克隆与序列分析 | 第63-65页 |
·镉胁迫相关基因RsPGK、RsPDI、RsSOD的基因组DNA与cDNA扩增 | 第63页 |
·目的片段的回收 | 第63页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第63页 |
·重组质粒的构建 | 第63-64页 |
·重组质粒的转化 | 第64-65页 |
·序列测定及分析 | 第65页 |
·半定量RT-PCR检测基因表达 | 第65页 |
2. 结果分析 | 第65-71页 |
·萝卜镉胁迫相关基因的基因组DNA与cDNA扩增结果 | 第65-66页 |
·RsPGK与RsPDI基因克隆的序列分析 | 第66-69页 |
·RsSOD基因克隆与序列分析 | 第69-71页 |
·萝卜RsPGK、RsPDI、RsSOD基因在转录水平的表达分析 | 第71页 |
3. 讨论 | 第71-73页 |
·RsSOD基因对Cd胁迫的响应 | 第71-72页 |
·RsPDI基因对Cd胁迫的响应 | 第72页 |
·RsPGK基因对Cd胁迫的响应 | 第72页 |
·转录水平与翻译水平的一致性 | 第72-73页 |
全文结论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
论文发表情况 | 第83-85页 |
致谢 | 第85页 |