| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩写词表 | 第11-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1.1 拟南芥中的光受体 | 第17页 |
| 1.2 隐花素的发现和分类 | 第17-19页 |
| 1.3 拟南芥隐花素的结构 | 第19-22页 |
| 1.3.1 拟南芥隐花素的PHR结构域 | 第20-22页 |
| 1.3.2 拟南芥隐花素的CCE结构域 | 第22页 |
| 1.4 拟南芥隐花素的主要生理功能 | 第22-27页 |
| 1.4.1 拟南芥隐花素介导蓝光抑制下胚轴的伸长 | 第23-24页 |
| 1.4.2 拟南芥隐花素介导蓝光促进花青素的积累 | 第24-25页 |
| 1.4.3 拟南芥隐花素影响光周期控制的开花时间 | 第25-27页 |
| 1.4.4 拟南芥隐花素介导蓝光影响生物钟 | 第27页 |
| 1.5 拟南芥隐花素的光生化特性 | 第27-28页 |
| 1.5.1 拟南芥隐花素蓝光依赖的磷酸化反应 | 第27-28页 |
| 1.5.2 拟南芥隐花素CRY2蓝光依赖的降解反应 | 第28页 |
| 1.6 拟南芥隐花素的光激活机制 | 第28-37页 |
| 1.6.1 黄素蛋白的光还原反应 | 第29-30页 |
| 1.6.2 光裂解酶的光化学反应 | 第30-33页 |
| 1.6.3 拟南芥隐花素在体内的光激活机制 | 第33-37页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 第2章 拟南芥隐花素CRY1及CRY1色氨酸突变体在体外的光还原反应 | 第39-62页 |
| 2.1 引言 | 第39-40页 |
| 2.2 材料与方法 | 第40-52页 |
| 2.2.1 主要载体 | 第40-41页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第41页 |
| 2.2.3 药品及培养基配制 | 第41-42页 |
| 2.2.4 昆虫细胞培养 | 第42-43页 |
| 2.2.5 载体构建 | 第43-47页 |
| 2.2.6 重组杆状病毒的获得与蛋白表达 | 第47-50页 |
| 2.2.7 蛋白质的纯化 | 第50-51页 |
| 2.2.8 蛋白的光谱分析 | 第51-52页 |
| 2.3 结果与分析 | 第52-60页 |
| 2.3.1 拟南芥CRY1结构与序列的分析 | 第52-53页 |
| 2.3.2 野生型CRY1和突变体CRY1蛋白的体外表达与纯化 | 第53-54页 |
| 2.3.3 CRY1色氨酸三联体突变体的体外光还原反应 | 第54-58页 |
| 2.3.4 CRY1其它色氨酸突变体的体外光还原反应 | 第58-60页 |
| 2.4 讨论 | 第60-61页 |
| 2.5 小结 | 第61-62页 |
| 第3章 拟南芥隐花素CRY1和CRY1色氨酸突变体转基因植物的获得 | 第62-76页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 材料与方法 | 第62-69页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第62页 |
| 3.2.2 载体 | 第62-63页 |
| 3.2.3 试剂 | 第63页 |
| 3.2.4 药品及培养基配制 | 第63-64页 |
| 3.2.5 引物 | 第64-65页 |
| 3.2.6 定点突变 | 第65页 |
| 3.2.7 植物表达载体的构建 | 第65页 |
| 3.2.8 重组质粒转化农杆菌 | 第65-66页 |
| 3.2.9 农杆菌蘸花法侵染拟南芥 | 第66-67页 |
| 3.2.10 免疫印迹实验 | 第67-68页 |
| 3.2.11 CTAB法提取基因组DNA | 第68页 |
| 3.2.12 亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 3.3 结果与分析 | 第69-74页 |
| 3.3.1 转基因植物的蛋白表达 | 第69-72页 |
| 3.3.2 转基因植物的DNA验证 | 第72页 |
| 3.3.3 突变体蛋白的亚细胞定位 | 第72-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74-75页 |
| 3.5 小结 | 第75-76页 |
| 第4章 拟南芥隐花素CRY1及CRY1色氨酸突变体在体内的生理活性 | 第76-96页 |
| 4.1 引言 | 第76-77页 |
| 4.2 材料与方法 | 第77-81页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第77页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第77页 |
| 4.2.3 药品及培养基配制 | 第77页 |
| 4.2.4 拟南芥幼苗的培养 | 第77-78页 |
| 4.2.5 下胚轴的测量 | 第78页 |
| 4.2.6 花青素含量的测定 | 第78页 |
| 4.2.7 植物总RNA的提取 | 第78-79页 |
| 4.2.8 cDNA第一链的合成 | 第79-80页 |
| 4.2.9 实时荧光定量PCR（qPCR） | 第80-81页 |
| 4.2.10 qPCR引物 | 第81页 |
| 4.3 结果与分析 | 第81-93页 |
| 4.3.1 CRY1色氨酸突变体介导蓝光抑制下胚轴的伸长 | 第81-90页 |
| 4.3.2 CRY1色氨酸突变体介导蓝光促进花青素的积累 | 第90-92页 |
| 4.3.3 CRY1色氨酸突变体介导蓝光诱导相关基因mRNA的表达 | 第92-93页 |
| 4.4 讨论 | 第93-95页 |
| 4.5 小结 | 第95-96页 |
| 第5章 拟南芥隐花素CRY1及CRY1色氨酸突变体在体内的光生化活性 | 第96-115页 |
| 5.1 引言 | 第96-97页 |
| 5.2 材料与方法 | 第97-105页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第97页 |
| 5.2.2 细胞株 | 第97页 |
| 5.2.3 载体 | 第97-98页 |
| 5.2.4 主要试剂 | 第98-99页 |
| 5.2.5 药品及培养基配制 | 第99页 |
| 5.2.6 引物 | 第99-100页 |
| 5.2.7 HEK293表达系统载体的构建 | 第100页 |
| 5.2.8 BiFC实验载体构建 | 第100-101页 |
| 5.2.9 磷酸化检测 | 第101-102页 |
| 5.2.10 去磷酸化实验 | 第102页 |
| 5.2.11人胚肾细胞（HEK293T）表达植物蛋白及Co-IP实验 | 第102-104页 |
| 5.2.12 双分子荧光互补实验（BiFC） | 第104-105页 |
| 5.3 结果与分析 | 第105-113页 |
| 5.3.1 CRY1色氨酸突变体具有磷酸化的光生化特性 | 第105-106页 |
| 5.3.2 W400A突变体与CRY1信号蛋白SPA1的组成型互作 | 第106-108页 |
| 5.3.3 CRY1色氨酸突变体与CRY1信号蛋白SPA1CT509的相互作用 | 第108-113页 |
| 5.4 讨论 | 第113-114页 |
| 5.5 小结 | 第114-115页 |
| 第6章 研究总结与展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-130页 |
| 作者简介 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 研究生期间主要研究成果 | 第132页 |
