致谢 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-18页 |
1 引言 | 第18-32页 |
1.1 植物逆境响应概述 | 第18-19页 |
1.1.1 植物逆境及其危害 | 第18-19页 |
1.1.2 植物对逆境的信号感知 | 第19页 |
1.2 植物逆境响应中的关键因子 | 第19-22页 |
1.2.1 活性氧的产生和功能 | 第19-20页 |
1.2.2 植物MAPK级联的组成与分类 | 第20-21页 |
1.2.3 MAPK级联反应在逆境信号转导中的功能 | 第21-22页 |
1.3 油菜素内酯的简述 | 第22-23页 |
1.3.1 油菜素内酯的发现 | 第22页 |
1.3.2 油菜素内酯的生物学功能 | 第22-23页 |
1.3.3 油菜素内酯与逆境胁迫的研究进展 | 第23页 |
1.4 BR的信号转导途径 | 第23-26页 |
1.4.1 BR信号转导的工作模型 | 第24页 |
1.4.2 BR合成基因的反馈调控 | 第24-25页 |
1.4.3 BR的运输 | 第25-26页 |
1.5 DNA的甲基化和组蛋白修饰对基因表达的影响 | 第26-29页 |
1.5.1 DNA甲基化 | 第26-27页 |
1.5.2 组蛋白修饰 | 第27-29页 |
1.5.3 植物体内非生物胁迫响应的表观遗传调控 | 第29页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第29-32页 |
2 EBR提高番茄抗逆性、诱导H_2O_2的爆发及激活MPK1/2 | 第32-41页 |
摘要 | 第32-33页 |
2.1 材料与方法 | 第33-35页 |
2.1.1 植物材料和处理 | 第33页 |
2.1.2 光合气体交换与叶绿素荧光测定 | 第33-34页 |
2.1.3 叶片中H_2O_2含量的测定 | 第34页 |
2.1.4 MPK1/2活性的测定 | 第34页 |
2.1.5 总RNA提取和基因表达分析 | 第34-35页 |
2.1.6 方差分析 | 第35页 |
2.2 结果 | 第35-39页 |
2.2.1 BR对提高番茄抗逆性存在着浓度效应 | 第35-37页 |
2.2.2 不同浓度的BR对番筋RBOm、MPK1和MPK2基因表达,H2O2的产生及MPK1/2活性的影响 | 第37-38页 |
2.2.3 BR对番茄RBOH1、MPK1和MPK2基因表达,H_2O_2的产生及MPK1/2活性的时间动态变化曲线 | 第38-39页 |
2.3 讨论 | 第39-41页 |
2.3.1 BR可以激活番茄的MPK1/2的磷酸化 | 第39页 |
2.3.2 植物内在平衡对于植物抵抗逆境至关重要 | 第39-41页 |
3 番茄RBOH1,MPK1和MPK2基因在EBR诱导的抗逆境胁迫过程中的作用 | 第41-55页 |
摘要 | 第41-42页 |
3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
3.1.1 实验材料准备 | 第42-43页 |
3.1.2 实验方案 | 第43页 |
3.1.3 Pn, Fv/Fm测定 | 第43-44页 |
3.1.4 H_2O_2测定和DAB染色 | 第44页 |
3.1.5 MAK活性检测 | 第44页 |
3.1.6 qPCR | 第44页 |
3.2 结果 | 第44-51页 |
3.2.1 RBOH1和MPK 1/2基因在EBR诱导的番茄抗氧化胁迫和高温胁迫中的作用 | 第44-46页 |
3.2.2 MPK1/2磷酸化在EBR诱导抗性中的作用 | 第46页 |
3.2.3 RBOH1 MPK1 MPK2基因沉默对番茄RBOH1基因和H_2O_2含量的影响 | 第46-48页 |
3.2.4 抗氧化酶相关基因及其活性的检测 | 第48-51页 |
3.3 讨论 | 第51-55页 |
3.3.1 RBOH1和MPK 1/2基因对番茄的非生物胁迫至关重要 | 第51-52页 |
3.3.2 MPK1和MPK2在EBR诱导的抗性中的不同作用 | 第52-53页 |
3.3.3 RBOH1与MPKs的正向反馈调节存在于BR诱导的H2O2产生,MPK1/2激活和抗性反应过程 | 第53-55页 |
4 BRI1、BAK1及BZR1基因在调控逆境响应过程中的作用 | 第55-72页 |
摘要 | 第55-56页 |
4.1 材料与方法 | 第56-58页 |
4.1.1 实验材料准备 | 第56页 |
4.1.2 实验方案 | 第56-57页 |
4.1.3 Pn,Fv/Fm测定 | 第57页 |
4.1.4 H_2O_2测定和DAB染色 | 第57页 |
4.1.5 MAK1/2活性,BZR1蛋白检测 | 第57页 |
4.1.6 qPCR检测 | 第57页 |
4.1.7 抗氧化物酶测定 | 第57-58页 |
4.2 结果 | 第58-66页 |
4.2.1 番茄中的BRI1,BAK1和BZR1基因序列的比对及沉默效率的检测 | 第58-59页 |
4.2.2 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对高温胁迫和氧化胁迫的影响 | 第59-60页 |
4.2.3 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对RBOH1和H_2O_2的影响 | 第60-61页 |
4.2.4 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对番茄抗氧化系统的影响 | 第61-63页 |
4.2.5 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对BZR1转录水平和蛋白含量的影响 | 第63-64页 |
4.2.6 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对MPK1/2激酶的影响 | 第64-65页 |
4.2.7 沉默MPK1/2和RBOH1后,对BR的合成基因DWARF和CPD的影响 | 第65-66页 |
4.3 讨论 | 第66-72页 |
4.3.1 番茄BRI1,BAK1和BZR1参与对高温和氧化胁迫的逆境响应 | 第66-68页 |
4.3.2 番茄BRI1,BAK1和BZR1对H2O2和MPK1/2的影响 | 第68-72页 |
5 拟南芥抗基因沉默因子ARP4、ARP6和PIE1的筛选 | 第72-82页 |
摘要 | 第72-74页 |
5.1 材料与方法 | 第74-76页 |
5.1.1 35S-SUC2转基因材料准备 | 第74页 |
5.1.2 突变体库的建立 | 第74页 |
5.1.3 F2杂交材料的准备 | 第74页 |
5.1.4 图位克隆(mapping) | 第74-75页 |
5.1.5 根长互补实验 | 第75-76页 |
5.2 结果 | 第76-81页 |
5.2.1 Actin-related Protein4(ARP4)的克隆及互补 | 第76-77页 |
5.2.2 Actin-related Protein6的克隆及互补 | 第77-79页 |
5.2.3 PIE1的克隆及互补 | 第79-81页 |
5.3 讨论 | 第81-82页 |
6 拟南芥组蛋白H2A的变异体H2A.Z参与去甲基化的调控机制的研究 | 第82-93页 |
摘要 | 第82-83页 |
6.1 实验材料与方法 | 第83页 |
6.1.1 材料准备和Real time PCR | 第83页 |
6.1.2 材料和CHIP | 第83页 |
6.1.3 烟草瞬时表达(Split Luc Assay) | 第83页 |
6.1.4 全基因组甲基化测序及分析 | 第83页 |
6.2 结果 | 第83-91页 |
6.2.1 arp4,arp6-1和pie1-1突变体里转基因的沉默表型 | 第83-84页 |
6.2.2 35S启动子甲基化的情况 | 第84-85页 |
6.2.3 全基因组甲基化情况 | 第85-88页 |
6.2.4 拟南芥ARP4蛋白功能分析 | 第88-90页 |
6.2.5 H2A.Z在35S启动子聚集的检测 | 第90-91页 |
6.3 讨论 | 第91-93页 |
7 结论与创新点 | 第93-97页 |
参考文献 | 第97-115页 |
附表 | 第115-120页 |
作者简历 | 第120页 |