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番茄MPK1/2和H2O2在BR信号转导、诱导抗逆性中的作用和拟南芥H2A.Z参与DNA去甲基化的研究

致谢第5-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-11页
缩略词表第12-18页
1 引言第18-32页
    1.1 植物逆境响应概述第18-19页
        1.1.1 植物逆境及其危害第18-19页
        1.1.2 植物对逆境的信号感知第19页
    1.2 植物逆境响应中的关键因子第19-22页
        1.2.1 活性氧的产生和功能第19-20页
        1.2.2 植物MAPK级联的组成与分类第20-21页
        1.2.3 MAPK级联反应在逆境信号转导中的功能第21-22页
    1.3 油菜素内酯的简述第22-23页
        1.3.1 油菜素内酯的发现第22页
        1.3.2 油菜素内酯的生物学功能第22-23页
        1.3.3 油菜素内酯与逆境胁迫的研究进展第23页
    1.4 BR的信号转导途径第23-26页
        1.4.1 BR信号转导的工作模型第24页
        1.4.2 BR合成基因的反馈调控第24-25页
        1.4.3 BR的运输第25-26页
    1.5 DNA的甲基化和组蛋白修饰对基因表达的影响第26-29页
        1.5.1 DNA甲基化第26-27页
        1.5.2 组蛋白修饰第27-29页
        1.5.3 植物体内非生物胁迫响应的表观遗传调控第29页
    1.6 研究的目的和意义第29-32页
2 EBR提高番茄抗逆性、诱导H_2O_2的爆发及激活MPK1/2第32-41页
    摘要第32-33页
    2.1 材料与方法第33-35页
        2.1.1 植物材料和处理第33页
        2.1.2 光合气体交换与叶绿素荧光测定第33-34页
        2.1.3 叶片中H_2O_2含量的测定第34页
        2.1.4 MPK1/2活性的测定第34页
        2.1.5 总RNA提取和基因表达分析第34-35页
        2.1.6 方差分析第35页
    2.2 结果第35-39页
        2.2.1 BR对提高番茄抗逆性存在着浓度效应第35-37页
        2.2.2 不同浓度的BR对番筋RBOm、MPK1和MPK2基因表达,H2O2的产生及MPK1/2活性的影响第37-38页
        2.2.3 BR对番茄RBOH1、MPK1和MPK2基因表达,H_2O_2的产生及MPK1/2活性的时间动态变化曲线第38-39页
    2.3 讨论第39-41页
        2.3.1 BR可以激活番茄的MPK1/2的磷酸化第39页
        2.3.2 植物内在平衡对于植物抵抗逆境至关重要第39-41页
3 番茄RBOH1,MPK1和MPK2基因在EBR诱导的抗逆境胁迫过程中的作用第41-55页
    摘要第41-42页
    3.1 材料与方法第42-44页
        3.1.1 实验材料准备第42-43页
        3.1.2 实验方案第43页
        3.1.3 Pn, Fv/Fm测定第43-44页
        3.1.4 H_2O_2测定和DAB染色第44页
        3.1.5 MAK活性检测第44页
        3.1.6 qPCR第44页
    3.2 结果第44-51页
        3.2.1 RBOH1和MPK 1/2基因在EBR诱导的番茄抗氧化胁迫和高温胁迫中的作用第44-46页
        3.2.2 MPK1/2磷酸化在EBR诱导抗性中的作用第46页
        3.2.3 RBOH1 MPK1 MPK2基因沉默对番茄RBOH1基因和H_2O_2含量的影响第46-48页
        3.2.4 抗氧化酶相关基因及其活性的检测第48-51页
    3.3 讨论第51-55页
        3.3.1 RBOH1和MPK 1/2基因对番茄的非生物胁迫至关重要第51-52页
        3.3.2 MPK1和MPK2在EBR诱导的抗性中的不同作用第52-53页
        3.3.3 RBOH1与MPKs的正向反馈调节存在于BR诱导的H2O2产生,MPK1/2激活和抗性反应过程第53-55页
4 BRI1、BAK1及BZR1基因在调控逆境响应过程中的作用第55-72页
    摘要第55-56页
    4.1 材料与方法第56-58页
        4.1.1 实验材料准备第56页
        4.1.2 实验方案第56-57页
        4.1.3 Pn,Fv/Fm测定第57页
        4.1.4 H_2O_2测定和DAB染色第57页
        4.1.5 MAK1/2活性,BZR1蛋白检测第57页
        4.1.6 qPCR检测第57页
        4.1.7 抗氧化物酶测定第57-58页
    4.2 结果第58-66页
        4.2.1 番茄中的BRI1,BAK1和BZR1基因序列的比对及沉默效率的检测第58-59页
        4.2.2 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对高温胁迫和氧化胁迫的影响第59-60页
        4.2.3 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对RBOH1和H_2O_2的影响第60-61页
        4.2.4 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对番茄抗氧化系统的影响第61-63页
        4.2.5 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对BZR1转录水平和蛋白含量的影响第63-64页
        4.2.6 沉默番茄BRI1,BAK1和BZR1对MPK1/2激酶的影响第64-65页
        4.2.7 沉默MPK1/2和RBOH1后,对BR的合成基因DWARF和CPD的影响第65-66页
    4.3 讨论第66-72页
        4.3.1 番茄BRI1,BAK1和BZR1参与对高温和氧化胁迫的逆境响应第66-68页
        4.3.2 番茄BRI1,BAK1和BZR1对H2O2和MPK1/2的影响第68-72页
5 拟南芥抗基因沉默因子ARP4、ARP6和PIE1的筛选第72-82页
    摘要第72-74页
    5.1 材料与方法第74-76页
        5.1.1 35S-SUC2转基因材料准备第74页
        5.1.2 突变体库的建立第74页
        5.1.3 F2杂交材料的准备第74页
        5.1.4 图位克隆(mapping)第74-75页
        5.1.5 根长互补实验第75-76页
    5.2 结果第76-81页
        5.2.1 Actin-related Protein4(ARP4)的克隆及互补第76-77页
        5.2.2 Actin-related Protein6的克隆及互补第77-79页
        5.2.3 PIE1的克隆及互补第79-81页
    5.3 讨论第81-82页
6 拟南芥组蛋白H2A的变异体H2A.Z参与去甲基化的调控机制的研究第82-93页
    摘要第82-83页
    6.1 实验材料与方法第83页
        6.1.1 材料准备和Real time PCR第83页
        6.1.2 材料和CHIP第83页
        6.1.3 烟草瞬时表达(Split Luc Assay)第83页
        6.1.4 全基因组甲基化测序及分析第83页
    6.2 结果第83-91页
        6.2.1 arp4,arp6-1和pie1-1突变体里转基因的沉默表型第83-84页
        6.2.2 35S启动子甲基化的情况第84-85页
        6.2.3 全基因组甲基化情况第85-88页
        6.2.4 拟南芥ARP4蛋白功能分析第88-90页
        6.2.5 H2A.Z在35S启动子聚集的检测第90-91页
    6.3 讨论第91-93页
7 结论与创新点第93-97页
参考文献第97-115页
附表第115-120页
作者简历第120页

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