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T-DNA插入导致苗期短根的水稻突变体研究

第一章 文献综述第10-26页
    引言第10页
    第一部分 离子通道型谷氨酸受体第10-15页
        1.1 谷氨酸第10-11页
        1.2 动物的离子通道型谷氨酸受体第11-12页
        1.3 植物的离子通道型谷氨酸受体第12-14页
        1.4 原核生物的离子通道型谷氨酸受体第14-15页
        1.5 离子通道型谷氨酸受体的进化第15页
    第二部分 植物离子通道型谷氨酸受体的功能第15-19页
        2.1 光信号传导第15-16页
        2.2 钙离子通道第16-17页
        2.3 与碳氮代谢的调节和ABA关系第17-18页
        2.4 铝毒害第18-19页
        2.5 甘氨酸作为配体的门控作用第19页
    第三部分 植物短根突变体及其分子机理第19-26页
        3.1 水稻根的结构和生长发育第19-20页
            3.1.1 水稻根系的发生和分类第19页
            3.1.2 水稻根的形态和结构第19-20页
        3.2 水稻短根突变体第20-22页
        3.3 其他植物的短根突变体及其分子机理第22-23页
        3.4 植物细胞的Ca~(2+)转运通道和Ca~(2+)对根伸长的作用第23-26页
第二章 T-DNA插入引起的苗期水稻短根突变体sr1第26-40页
    1 材料和方法第26-31页
        1.1 材料第26页
        1.2 主要试剂第26页
        1.3 引物序列第26-27页
        1.4 方法第27-31页
            1.4.1 突变体的筛选的表型第27-28页
            1.4.2 根尖的组织切片第28页
            1.4.3 遗传分析第28页
            1.4.4 水稻总DNA提取第28-29页
            1.4.5 T-DNA旁邻序列的克隆与测序第29页
            1.4.6 PCR反应、产物回收和克隆第29-30页
            1.4.7 Southern印迹和杂交第30-31页
    2 结果和分析第31-38页
        2.1 突变体的表型第31-33页
            2.1.1 突变体根的形态第31-33页
            2.1.2 突变体根尖的组织切片第33页
        2.2 遗传分析第33-35页
        2.3 协同分离分析第35-37页
        2.4 基因的拷贝数和定位第37-38页
    3 讨论第38-40页
第三章 OsGL1基因的克隆和功能第40-59页
    1 材料和方法第40-49页
        1.1 材料第40页
        1.2 主要试剂第40页
        1.3 引物序列第40-41页
        1.4 方法第41-49页
            1.4.1 OsGLR1基因的克隆第41页
            1.4.2 基因组OsGLR1基因的PCR第41页
            1.4.3 转基因实验第41-44页
                1.4.3.1 转基因质粒的构建第41-43页
                1.4.3.2 农杆菌感受态的制备和转化第43页
                1.4.3.3 农杆菌介导的水稻愈伤转化第43页
                1.4.3.4 基因枪介导的水稻愈伤转化第43-44页
            1.4.4 GUS染色第44页
            1.4.5 OsGLR1原核蛋白表达第44-46页
                1.4.5.1 原核表达载体的构建第44页
                1.4.5.2 原核蛋白表达、提取和纯化第44-46页
            1.4.6 水稻的整合膜蛋白提取第46页
            1.4.7 Western Blotting第46-48页
            1.4.8 RNA提取第48页
            1.4.9 RT-PCR第48页
            1.4.10 基因结构和同源性分析第48-49页
    2 结果和分析第49-55页
        2.1 OsGLR1基因的克隆和基因结构分析第49页
        2.2 与动物和拟南芥iGluRs的同源性分析第49-52页
        2.3 转基因互补回复第52-54页
        2.4 基因表达分析第54-55页
    3 讨论第55-59页
第四章 整体根尖细胞的Ca~(2+)测定和环境对短根突变体sr1的调控影响第59-66页
    1 材料和方法第59-60页
        1.1 材料第59页
        1.2 方法第59-60页
            1.2.1 浸种第59-60页
            1.2.2 外源氨基酸和植物激素的处理第60页
            1.2.3 温度处理第60页
            1.2.4 整体根尖细胞内钙离子浓度的测定第60页
    2 结果和分析第60-64页
        2.1 外源氨基酸的效应第60-61页
        2.2 外源激素的效应第61-62页
        2.3 温度效应第62-64页
        2.4 整体根尖细胞内钙离子的浓度第64页
    3 讨论第64-66页
小结第66-67页
参考文献第67-74页
Abstract第74页

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