| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1 序言 | 第14-32页 |
| ·打破免疫耐受制备疫苗的方法和技术 | 第15-18页 |
| ·利用细菌病毒抗原、异种抗原和T细胞表位诱导打破免疫耐受 | 第15-16页 |
| ·利用异种同源分子打破自身分子免疫耐受 | 第16-17页 |
| ·利用树突状细胞(DC)诱导打破自身分子免疫耐受 | 第17-18页 |
| ·细菌表面抗原43(Antigen 43,Ag43)的主要特性 | 第18-20页 |
| ·Ag43的特点及制备疫苗的设想 | 第18-20页 |
| ·Ag43用于打破免疫耐受制备疫苗的研究 | 第20页 |
| ·TargeTron Gene Knockout System敲除细菌基因的原理 | 第20-22页 |
| ·Endoglin与肿瘤血管生成的关系 | 第22-28页 |
| ·Endoglin的分子结构特征、主要功能和作用 | 第23-27页 |
| ·Endoglin与肿瘤血管生成 | 第27页 |
| ·以endoglin为靶标的抗肿瘤血管生成治疗研究 | 第27-28页 |
| ·本课题研究的基本思路 | 第28-30页 |
| ·本课题研究的技术路线 | 第30-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-65页 |
| ·材料 | 第32-40页 |
| ·质粒载体、原核细菌菌种和真核细胞株 | 第32-34页 |
| ·细菌和细胞培养基 | 第34页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第34-36页 |
| ·常用溶液的配制 | 第36-38页 |
| ·实验使用的仪器设备 | 第38-39页 |
| ·实验动物 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-65页 |
| ·Ag43细菌表面展示系统的构建与鉴定 | 第40-50页 |
| ·利用绿色荧蛋白检测验证Ag43表达系统是否有效表达外源基因 | 第50-51页 |
| ·构建endoglin的细菌表面展示质粒,诱导表达和提取 | 第51-54页 |
| ·Ag43/endoglin作为模式疫苗抗肿瘤作用及相关机理研究 | 第54-64页 |
| ·统计处理 | 第64页 |
| ·基因及分析软 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-88页 |
| ·Ag43表面展示系统的构建和鉴定 | 第65-72页 |
| ·基因敲除大肠杆菌Ag43基因获得目标菌 | 第65-69页 |
| ·Ag43表达质粒pETAg43的构建和鉴定 | 第69-72页 |
| ·Ag43展示系统细菌表面展示外源基因分子的有效性验证 | 第72-76页 |
| ·Ag43和绿色荧光嵌合蛋白Ag43/GFP表达载体的构建及鉴定 | 第72-73页 |
| ·Ag43介导GFP在Ag43敲除菌Tan109中表达并展示于细菌表面 | 第73-74页 |
| ·Ag43/GFP嵌合表面展示蛋白加热提取的最佳条件 | 第74-76页 |
| ·Ag43细菌表面展示系统展示表达endoglin作为肿瘤疫苗 | 第76-79页 |
| ·Endoglin展示载体pETAg43-END的构建和鉴定 | 第76-78页 |
| ·Ag43/END嵌合蛋白的细菌表面展示表达、加热提取及纯化 | 第78-79页 |
| ·Ag43细菌表面展示系统展示的嵌合Ag43/END作为疫苗抗肿瘤作用 | 第79-88页 |
| ·Ag43/END疫苗诱导抗肿瘤作用 | 第79-83页 |
| ·Ag43/END疫苗抗肿瘤作用的机理 | 第83-88页 |
| 4 讨论 | 第88-99页 |
| ·Ag43表面展示系统的正确构建 | 第90-92页 |
| ·Ag43细菌表面展示系统展示外源基因分子的有效性 | 第92-93页 |
| ·Ag43/END疫苗载体的构建、表达和提取 | 第93-96页 |
| ·Ag43/END疫苗的抗肿瘤作用 | 第96页 |
| ·Ag43/END疫苗抗肿瘤作用机理 | 第96-98页 |
| ·研究结果的应用前景 | 第98-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者在读期间科研成果 | 第117-120页 |
