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黑曲霉ras基因敲除子的构建及其生物学特性

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-23页
    1.1 课题来源第10页
    1.2 课题研究的背景和目的意义第10-11页
    1.3 黑曲霉的研究现状及应用第11-15页
        1.3.1 黑曲霉的简介第11-12页
        1.3.2 黑曲霉在产酶和产酸方面的应用第12-13页
        1.3.3 黑曲霉在生物饲料方面的应用第13-14页
        1.3.4 黑曲霉在生物转化方面的应用第14-15页
    1.4 基因敲除的国内外研究现状第15-17页
        1.4.1 基因敲除的概念第15-16页
        1.4.2 基因敲除的原理及方法第16-17页
    1.5 小G蛋白家族在真菌中的研究进展第17-21页
    1.6 课题主要研究内容及技术路线第21-23页
第2章 实验材料及方法第23-38页
    2.1 实验所用材料第23-27页
        2.1.1 实验所用到的菌株和质粒第23-24页
        2.1.2 实验所用到的引物第24页
        2.1.3 实验所用到的仪器第24-25页
        2.1.4 实验所用到的药品和试剂第25-26页
        2.1.5 实验所用到的培养基第26-27页
    2.2 实验方法第27-38页
        2.2.1 黑曲霉ras基因大片段的克隆和鉴定第27-29页
        2.2.2 黑曲霉ras基因敲除质粒pPZPtk8.10:ras:hyg的构建第29-33页
        2.2.3 敲除质粒的真菌转化及敲除子的筛选鉴定第33-35页
        2.2.4 敲除子生长速度的测定第35页
        2.2.5 敲除子菌丝形态及产孢情况的观察第35页
        2.2.6 敲除子生物量的测定第35-36页
        2.2.7 敲除子生长温度的观测第36页
        2.2.8 敲除子纤维素酶酶活力的测定第36-38页
第3章 敲除质粒pPZPtk8.10:ras:hyg的构建第38-44页
    3.1 引言第38页
    3.2 黑曲霉ras基因及其上下游序列的克隆和鉴定第38-40页
        3.2.1 黑曲霉ras基因大片段的获得第38-39页
        3.2.2 黑曲霉ras基因保守区域的分析及上下游同源序列长度的确定第39-40页
    3.3 中间重组质粒pPZPtk8.10:ras的构建第40-41页
    3.4 敲除质粒pPZPtk8.10:ras:hyg的构建第41-43页
    3.5 讨论第43页
    3.6 本章小结第43-44页
第4章 黑曲霉的真菌转化及ras基因敲除子筛选鉴定第44-50页
    4.1 引言第44页
    4.2 敲除质粒pPZPtk8.10:ras:hyg转化农杆菌第44-45页
    4.3 黑曲霉ras基因敲除子对潮霉素B的最小筛选浓度的确定第45-46页
    4.4 农杆菌与黑曲霉共培养介导的真菌转化第46页
    4.5 ras基因敲除子的分子生物学鉴定及其遗传稳定性的验证第46-48页
    4.6 讨论第48-49页
    4.7 本章小结第49-50页
第5章 ras基因敲除子生物学特性的研究第50-56页
    5.1 引言第50页
    5.2 ras基因敲除子生长速度的测定第50页
    5.3 ras基因敲除子菌丝形态及产孢状况的观察第50-52页
    5.4 ras基因敲除子生物量的测定第52页
    5.5 ras基因敲除子培养温度对其影响的观察第52-53页
    5.6 ras基因敲除子纤维素酶酶活的测定第53-55页
        5.6.1 葡萄糖标准曲线的绘制第53页
        5.6.2 Cx酶酶活的测定第53-54页
        5.6.3 β-葡聚糖苷酶酶活的测定第54-55页
    5.7 讨论第55页
    5.8 本章小结第55-56页
结论第56-57页
展望第57-58页
参考文献第58-65页
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果第65-67页
致谢第67页

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