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脱氧胞苷激酶(dCK)在电离辐射诱导细胞死亡中的作用和机制研究

摘要第4-10页
Abstract第10-16页
英文缩写表第21-22页
第1章 绪论第22-56页
    1.1 细胞死亡第22-23页
    1.2 自噬第23-36页
        1.2.1 自噬概述第23页
        1.2.2 自噬的过程第23-27页
        1.2.3 自噬相关通路第27-30页
        1.2.4 自噬与肿瘤第30-33页
        1.2.5 自噬与DNA损伤第33-36页
    1.3 凋亡第36-47页
        1.3.1 凋亡概述第36-37页
        1.3.2 凋亡相关通路第37-39页
        1.3.3 凋亡与肿瘤第39-41页
        1.3.4 细胞凋亡与DNA损伤第41-46页
        1.3.5 自噬与凋亡的相互作用第46-47页
    1.4 有丝分裂灾难第47-52页
        1.4.1 有丝分裂灾难概述第47页
        1.4.2 有丝分裂灾难相关基因第47-50页
        1.4.3 有丝分裂灾难与DNA损伤第50-51页
        1.4.4 有丝分裂灾难与肿瘤第51-52页
    1.5 d CK第52-55页
        1.5.1 dCK概述第52页
        1.5.2 d CK与DNA损伤应答第52-53页
        1.5.3 dCK与电离辐射第53页
        1.5.4 dCK的临床应用第53-55页
    1.6 立题依据第55-56页
第2章 材料与方法第56-74页
    2.1 主要试剂及仪器第56-58页
        2.1.1 主要试剂第56-57页
        2.1.2 主要器材第57-58页
        2.1.3 主要仪器第58页
    2.2 主要实验材料和方法第58-74页
        2.2.1 常用缓冲液及溶液的配制第58-62页
        2.2.2 细胞株第62-63页
        2.2.3 照射条件第63页
        2.2.4 细胞模型的构建第63-66页
        2.2.5 蛋白质的提取及蛋白浓度测定第66-67页
        2.2.6 蛋白质免疫印迹法(Western blot)第67-68页
        2.2.7 免疫共沉淀(IP)第68页
        2.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡第68-69页
        2.2.9 流式细胞术检测MDC阳性细胞率第69页
        2.2.10 流式细胞术检测细胞死亡率第69-70页
        2.2.11 流式细胞术检测细胞周期第70页
        2.2.12 流式细胞术检测细胞多倍体第70-71页
        2.2.13 流式细胞术检测有丝分裂细胞第71页
        2.2.14 集落形成实验第71-72页
        2.2.15 CCK8(Cell counting Kit-8)法第72页
        2.2.16 免疫荧光激光共聚焦第72-73页
        2.2.17 统计学方法第73-74页
第3章 实验结果第74-100页
    3.1 d CK抑制电离辐射诱导的细胞死亡第74-81页
        3.1.1 电离辐射诱导dCK丝氨酸74位点发生磷酸化第74页
        3.1.2 dCK沉默质粒的构建第74-75页
        3.1.3 dCK沉默及过表达细胞模型的构建第75-76页
        3.1.4 dCK对电离辐射诱导HeLa细胞死亡的影响第76-78页
        3.1.5 dCK对电离辐射诱导SKBR3,MDA-MB-231 细胞死亡作用的影响第78-81页
    3.2 d CK抑制电离辐射诱导的细胞凋亡第81-84页
        3.2.1 HeLa细胞中d CK的凋亡抑制作用研究第81-83页
        3.2.2 SKBR3和MDA-MB-231 细胞中dCK的凋亡抑制作用研究第83-84页
    3.3 d CK促进电离辐射诱导细胞的自噬水平第84-88页
        3.3.1 HeLa细胞中d CK的自噬诱导作用研究第84-86页
        3.3.2 乳腺癌细胞中dCK的自噬诱导作用研究第86-88页
    3.4 d CK通过mTOR通路调控电离辐射诱导的细胞自噬第88-90页
        3.4.1 在HeLa细胞中dCK对Akt/mTOR/P70S6K的调控作用67第88-89页
        3.4.2 在SKBR3和MDA-MB-231 细胞中dCK对Akt/mTOR/P70S6K的调控第89-90页
    3.5 自噬与凋亡的转换第90-95页
        3.5.1 在HeLa细胞中自噬与凋亡的转换第90-93页
        3.5.2 在SKBR3,MDA-MB-231 细胞中自噬与凋亡的转换72第93-95页
    3.6 d CK通过调控G2/M期检查点保护细胞免于有丝分裂灾难743.6.1 dCK参与IR诱导G2/M期阻滞第95-100页
        3.6.1 d CK 参与 IR 诱导 G2/M 期阻滞第95页
        3.6.2 电离辐射增加dCK与Cdk1的相互作用并抑制Cdk1活性第95-96页
        3.6.3 沉默d CK促进电离辐射诱导的细胞进入有丝分裂期第96-97页
        3.6.4 沉默d CK促进电离辐射诱导的多倍体进一步增加第97页
        3.6.5 沉默d CK促进电离辐射诱导的DNA损伤第97-100页
第4章 讨论第100-108页
第5章 结论第108-110页
参考 文献第110-148页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第148-150页
致谢第150页

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