| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 大肠杆菌的危害、致病机理及检测意义 | 第12-14页 |
| 1.2 常见的大肠杆菌检测方法的研究现状及进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 传统方法 | 第14-15页 |
| 1.2.2 分子生物学方法 | 第15-16页 |
| 1.2.3 免疫学方法 | 第16-17页 |
| 1.2.4 以生物传感器为基础的方法 | 第17页 |
| 1.3 核酸适配体 | 第17-22页 |
| 1.3.1 适配体筛选原理及流程 | 第17-20页 |
| 1.3.2 适配体与靶标分子的结合原理 | 第20页 |
| 1.3.3 适配体的特点 | 第20-21页 |
| 1.3.4 适配体的应用及进展 | 第21-22页 |
| 1.4 纳米材料石墨烯 | 第22-23页 |
| 1.4.1 石墨烯结构及性质 | 第22页 |
| 1.4.2 石墨烯应用 | 第22-23页 |
| 1.5 本论文的工作思路 | 第23-25页 |
| 第2章 筛选ETEC K88细胞适配体 | 第25-39页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验仪器试剂与材料 | 第25-28页 |
| 2.2.1 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.2 菌株培养与预处理 | 第26页 |
| 2.2.3 序列合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4 试剂和溶液 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.3.1 Cell-SELEX过程 | 第28-30页 |
| 2.3.2 次级文库结合率测定 | 第30页 |
| 2.3.3 克隆和测序 | 第30页 |
| 2.3.4 序列比对和分析 | 第30页 |
| 2.3.5 适配体亲和力的测定 | 第30-31页 |
| 2.3.6 灵敏性实验 | 第31页 |
| 2.3.7 特异性实验 | 第31页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第31-38页 |
| 2.4.1 SELEX筛选条件的优化 | 第31-32页 |
| 2.4.2 次级文库与ETEC K88结合率测定 | 第32-33页 |
| 2.4.3 序列比对和分析 | 第33-35页 |
| 2.4.4 亲和力分析 | 第35-37页 |
| 2.4.5 灵敏性测定 | 第37页 |
| 2.4.6 特异性分析 | 第37-38页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第38-39页 |
| 第3章 基于氧化石墨烯纳米淬灭剂和Klenow fragment引发靶标循环放大的纳米生物传感器在ETEC K88检测中的应用 | 第39-53页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 纳米生物传感器的工作原理 | 第39-40页 |
| 3.3 实验仪器及试剂 | 第40-42页 |
| 3.3.1 实验仪器 | 第40-41页 |
| 3.3.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 3.4 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.4.1 氧化石墨烯的预处理 | 第42页 |
| 3.4.2 体系可行性荧光分析 | 第42页 |
| 3.4.3 体系可行性电泳分析 | 第42-43页 |
| 3.4.4 体系工作条件优化 | 第43页 |
| 3.4.5 体系灵敏性检测 | 第43页 |
| 3.4.6 体系特异性检测 | 第43-44页 |
| 3.4.7 体系用于粪便样本中ETEC K88检测 | 第44页 |
| 3.5 实验结果与讨论 | 第44-51页 |
| 3.5.1 体系机制荧光分析 | 第44-45页 |
| 3.5.2 体系机制电泳分析 | 第45-46页 |
| 3.5.3 体系工作条件优化结果与分析 | 第46-48页 |
| 3.5.4 体系灵敏性检测结果 | 第48-49页 |
| 3.5.5 体系特异性检测结果 | 第49-50页 |
| 3.5.6 粪便样本中ETEC K88检测结果 | 第50-51页 |
| 3.6 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 结论与展望 | 第53-55页 |
| 4.1 结论 | 第53-54页 |
| 4.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读硕士学位期间撰写、发表的学术论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 附录 | 第66页 |