摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英文缩写对照表 | 第9-15页 |
第一章 绪论 | 第15-33页 |
1.1 炎症 | 第15-20页 |
1.1.1 炎症的概述 | 第15-18页 |
1.1.2 炎症的危害 | 第18-20页 |
1.2 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) | 第20-23页 |
1.2.1 茶叶的历史和功效 | 第20-21页 |
1.2.2 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) | 第21-22页 |
1.2.3 EGCG的受体研究背景 | 第22-23页 |
1.3 炎症的相关信号 | 第23-29页 |
1.3.1 NF-κB信号通路 | 第23-24页 |
1.3.2 MAPK信号通路 | 第24-25页 |
1.3.3 Notch信号通路 | 第25-29页 |
1.4 研究的背景及意义 | 第29-33页 |
第二章 EGCG调节早期炎症反应 | 第33-49页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第33-35页 |
2.1.1 实验材料及试剂 | 第33-34页 |
2.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
2.1.3 溶液配制 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-42页 |
2.2.1 细胞的冻存 | 第35-36页 |
2.2.2 细胞的复苏 | 第36页 |
2.2.3 细胞的换液与传代 | 第36页 |
2.2.4 THP-1 巨噬细胞的制备 | 第36-37页 |
2.2.5 Elisa操作步骤 | 第37-38页 |
2.2.6 蛋白芯片操作步骤 | 第38-40页 |
2.2.7 RNA提取 | 第40页 |
2.2.8 反转录 | 第40-41页 |
2.2.9 Real-Time PCR | 第41-42页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第42-47页 |
2.3.1 THP-1 来源的巨噬细胞分化 | 第42-43页 |
2.3.2 EGCG对LPS诱导的TNF alpha和IL-1 beta分泌的影响 | 第43-44页 |
2.3.3 EGCG对LPS激发的早期炎症的效应 | 第44-46页 |
2.3.4 EGCG对LPS诱导的早期炎症因子mRNA的影响 | 第46-47页 |
2.4 实验小结 | 第47-49页 |
第三章 EGCG调节早期炎症并非通过经典的炎症通路 | 第49-59页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第49-52页 |
3.1.1 实验材料及试剂 | 第49-50页 |
3.1.2 实验仪器 | 第50页 |
3.1.3 溶液配制 | 第50-52页 |
3.2 实验方法 | 第52-55页 |
3.2.1 巨噬细胞全蛋白提取 | 第52-53页 |
3.2.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第53页 |
3.2.3 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第53-55页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第55-56页 |
3.3.1 EGCG对经典炎症信号通路NF-kB的作用 | 第55-56页 |
3.3.2 EGCG对经典炎症信号通路MAPK的作用 | 第56页 |
3.4 实验小结 | 第56-59页 |
第四章 EGCG调节Notch信号通路 | 第59-73页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第59-60页 |
4.1.1 实验材料及试剂 | 第59-60页 |
4.1.2 实验仪器 | 第60页 |
4.2 实验方法 | 第60-61页 |
4.2.1 Western Blot及IP(免疫沉淀) | 第60页 |
4.2.2 MLuC5抗体封闭 67LR | 第60-61页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第61-71页 |
4.3.1 EGCG对Notch信号通路的作用 | 第61-62页 |
4.3.2 EGCG对Notch的效应存在浓度依赖性 | 第62-63页 |
4.3.3 EGCG对Notch信号通路的抑制效应具有瞬时性 | 第63-64页 |
4.3.4 EGCG通过泛素化降解Notch蛋白 | 第64-65页 |
4.3.5 EGCG抑制LPS诱导的早期炎症不依赖于 67LR | 第65-68页 |
4.3.6 EGCG抑制早期炎症因子mRNA表达不依赖 67LR | 第68-69页 |
4.3.7 EGCG抑制Notch蛋白的表达不依赖于 67LR | 第69页 |
4.3.8 EGCG抑制Notch靶基因的转录 | 第69-71页 |
4.4 实验小结 | 第71-73页 |
第五章 EGCG通过Notch信号通路抑制早期炎症 | 第73-81页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第73-74页 |
5.1.1 实验材料及试剂 | 第73页 |
5.1.2 实验仪器 | 第73-74页 |
5.2 实验方法 | 第74-75页 |
5.2.1 THP-1 Notch1/2 RNAi | 第74页 |
5.2.2 THP-1 Notch1/2 RNAi巨噬细胞的制备 | 第74页 |
5.2.3 THP-1 转染NICD-GFP及筛选 | 第74-75页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第75-79页 |
5.3.1 THP-1 Notch1/Notch2 RNAi干扰成功 | 第75页 |
5.3.2 EGCG通过Notch信号通路抑制巨噬细胞炎症因子分泌 | 第75-78页 |
5.3.3 过表达NICD-GFP不能修复EGCG抑制LPS诱导的早期炎症645.4 实验小结 | 第78-79页 |
5.4 实验小结 | 第79-81页 |
第六章 EGCG通过Notch抑制炎症适用于健康巨噬细胞 | 第81-87页 |
6.1 实验材料与仪器 | 第81-82页 |
6.1.1 实验试剂与材料 | 第81-82页 |
6.1.2 实验仪器 | 第82页 |
6.1.3 溶液配制 | 第82页 |
6.2 实验方法 | 第82-83页 |
6.2.1 PBMC细胞分离方法 | 第82-83页 |
6.2.2 PBMC来源的巨噬细胞制备 | 第83页 |
6.3 实验结果与讨论 | 第83-85页 |
6.3.1 EGCG对PBMC巨噬细胞TNF alpha分泌影响 | 第83-84页 |
6.3.2 EGCG能够抑制Notch蛋白及其靶基因的表达 | 第84-85页 |
6.4 实验小结 | 第85-87页 |
讨论 | 第87-91页 |
结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-101页 |
附录 | 第101-110页 |
作者简介 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |