| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第7-10页 |
| 第1章 材料和方法 | 第10-22页 |
| 1.1 材料 | 第10-13页 |
| 1.1.1 细胞及组织来源 | 第10-11页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第11页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第11-12页 |
| 1.1.4 主溶液的置方法 | 第12-13页 |
| 1.2 方法 | 第13-21页 |
| 1.2.1 神经母细胞瘤组织中总R N A的提取 | 第13页 |
| 1.2.2 神经母细胞瘤细胞的培养 | 第13-15页 |
| 1.2.2.1 神经母细胞瘤冻存细胞的复苏 | 第13-14页 |
| 1.2.2.2 神经母细胞瘤细胞的传代培养 | 第14页 |
| 1.2.2.3 神经母细胞瘤细胞的冻存 | 第14-15页 |
| 1.2.3 神经母细胞瘤mi R4833P相关基因的转染 | 第15页 |
| 1.2.4 神经母细胞瘤细胞总R N A的提取 | 第15-16页 |
| 1.2.4.1 神经母细胞瘤细胞中总RNA的提取（Trizol法） | 第15-16页 |
| 1.2.4.2 提取的RN A纯度检测 | 第16页 |
| 1.2.5 miR-483-3P的实时荧光定量聚合酶链式反应 | 第16-18页 |
| 1.2.5.1 mi RNA的Poly(A)加尾反应以及逆转录反应 | 第16-17页 |
| 1.2.5.2 实时定量P C R | 第17-18页 |
| 1.2.6 细胞增殖实验 | 第18页 |
| 1.2.7 肿瘤细胞迁移实验 | 第18-19页 |
| 1.2.8 神经母细胞瘤mi R4833P靶基因的预测 | 第19页 |
| 1.2.9 荧光素酶报告基因检测实验验证mi R4833P的靶基因 | 第19-20页 |
| 1.2.10 Western blot检测mi R4833P对细胞RIOK3表达的影响 | 第20-21页 |
| 1.2.10.1 miR-483-3P相关基因转染细胞后总蛋白的提取 | 第20页 |
| 1.2.10.2 Westernblot | 第20-21页 |
| 1.3 统计学处理 | 第21-22页 |
| 第2章 结果 | 第22-26页 |
| 2.1 miR-483-3P在神经母细胞瘤组织和癌旁正常组织中的表达有差异 | 第22页 |
| 2.2 基因转染后mi R4833P表达的变化 | 第22-23页 |
| 2.3 miR-483-3P对神经母细胞瘤细胞增殖能力的影响 | 第23-24页 |
| 2.4 miR-483-3P对神经母细胞瘤细胞侵袭迁移能力的影响 | 第24页 |
| 2.5 miR-483-3P靶基因的预测 | 第24页 |
| 2.6 miR-483-3P靶向调控RIOK3的表达 | 第24-25页 |
| 2.7 miR-483-3P对蛋白表达的影响 | 第25-26页 |
| 第3章 讨论 | 第26-29页 |
| 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 综述 | 第33-41页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
