| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 布鲁氏菌实时定量PCR检测方法的建立 | 第13-25页 |
| 1. 材料 | 第13页 |
| 1.1 质粒和菌株 | 第13页 |
| 1.2 仪器 | 第13页 |
| 1.3 溶液 | 第13页 |
| 2. 试验方法 | 第13-18页 |
| 2.1 阳性质粒的构建 | 第13-14页 |
| 2.2 引物的设计与合成 | 第14页 |
| 2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第14-15页 |
| 2.4 质粒Puc57-Simple的转化 | 第15页 |
| 2.5 质粒的提取 | 第15-16页 |
| 2.6 PCR反应体系的建立及优化 | 第16-17页 |
| 2.7 制作标准曲线 | 第17-18页 |
| 2.8 PCR重复性试验 | 第18页 |
| 2.9 PCR敏感性试验 | 第18页 |
| 2.10 PCR特异性试验 | 第18页 |
| 3. PCR方法的建立及性能验证结果 | 第18-23页 |
| 3.1 Puc57-Simple阳性质粒 | 第18-20页 |
| 3.2 实时荧光定量PCR反应体系的建立和优化 | 第20-21页 |
| 3.3 实时荧光定量PCR的重复性 | 第21-22页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR的敏感性 | 第22页 |
| 3.5 实时荧光定量PCR的特异性 | 第22-23页 |
| 4. 讨论 | 第23-25页 |
| 第二部分 布鲁氏菌实时定量PCR检测方法的初步评价 | 第25-36页 |
| 1. 材料与方法 | 第25-26页 |
| 1.1 病人血液样本基因的提取 | 第25页 |
| 1.2. 血分离培养 | 第25页 |
| 1.3 虎红平板试验(RBPT)及试管凝集试验(SAT) | 第25页 |
| 1.4 实时定量PCR | 第25页 |
| 1.5 统计分析方法 | 第25-26页 |
| 2. 结果 | 第26-33页 |
| 2.1 实时荧光定量PCR Ct值的确定 | 第26-28页 |
| 2.2 真实性评价 | 第28-29页 |
| 2.3 预测性评价 | 第29页 |
| 2.4 可靠性评价 | 第29页 |
| 2.5 RBPT检测结果与金标准血培养结果 | 第29-30页 |
| 2.6 SAT检测结果与金标准血培养结果的比较 | 第30-31页 |
| 2.7 PCR与RBPT、SAT真实性、综合性评价指标的比较 | 第31-32页 |
| 2.8 PCR与RBPT、SAT的可靠性与预测值的比较 | 第32-33页 |
| 3. 讨论 | 第33-36页 |
| 全文小结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 文献综述: 布鲁氏菌流行现状及检测方法研究进展 | 第39-54页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
