中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第14-24页 |
1.1 研究背景 | 第14-16页 |
1.1.1 蓝莓产业发展现状 | 第14页 |
1.1.2 蓝莓栽培中存在的问题 | 第14-16页 |
1.2 植物根际促生菌在蓝莓土壤改良中的应用前景 | 第16-21页 |
1.2.1 微生物在蓝莓中的应用研究进展 | 第16页 |
1.2.2 植物根际促生菌(PGPR) | 第16-21页 |
1.2.2.1 PGPR的发展历史 | 第16-17页 |
1.2.2.2 PGPR作用机制 | 第17-18页 |
1.2.2.3 PGPR的应用 | 第18-21页 |
1.3 土壤肥力 | 第21-22页 |
1.3.1 土壤酶 | 第21页 |
1.3.2 土壤养分 | 第21页 |
1.3.3 土壤微生物群落结构 | 第21-22页 |
1.4 本研究的立项依据、研究内容和技术路线 | 第22-24页 |
1.4.1 立项依据 | 第22页 |
1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
1.4.3 技术路线 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 主要仪器 | 第24页 |
2.2 培养基 | 第24-25页 |
2.2.1 菌株发酵、培养基本培养基 | 第24-25页 |
2.2.2 生长素产生菌筛选培养基 | 第25页 |
2.2.3 溶磷菌筛选培养基 | 第25页 |
2.2.4 蛋白酶产生菌筛选培养基 | 第25页 |
2.2.5 产酸菌筛选培养基 | 第25页 |
2.3 方法 | 第25-33页 |
2.3.1 根际促生细菌的分离、纯化 | 第25页 |
2.3.2 生长素产生菌的筛选 | 第25-26页 |
2.3.2.1 IAA产生菌初筛 | 第25-26页 |
2.3.2.2 细菌分泌IAA定量测定 | 第26页 |
2.3.3 溶磷菌的筛选 | 第26-27页 |
2.3.3.1 溶磷菌初筛 | 第26页 |
2.3.3.2 溶磷菌发酵液有效磷含量测定 | 第26-27页 |
2.3.4 蛋白酶产生菌的筛选 | 第27-28页 |
2.3.4.1 蛋白酶产生菌初筛 | 第27页 |
2.3.4.2 蛋白酶产生菌复筛 | 第27-28页 |
2.3.5 根际促生菌菌种鉴定 | 第28页 |
2.3.5.1 菌株形态特征及生理生化特征测定 | 第28页 |
2.3.5.2 细菌基因组DNA的提取 | 第28页 |
2.3.5.3 16S rDNA扩增 | 第28页 |
2.3.6 蓝莓根际促生菌促生效果验证 | 第28-30页 |
2.3.6.1 试验设计 | 第28-29页 |
2.3.6.2 植株生长指标测定 | 第29页 |
2.3.6.3 植株叶片相关指标测定 | 第29页 |
2.3.6.4 植株养分测定 | 第29页 |
2.3.6.5 根际土壤酶活及养分测定 | 第29页 |
2.3.6.6 数据统计与分析 | 第29-30页 |
2.3.7 促生菌对根际土壤微生物群落结构的影响 | 第30页 |
2.3.8 促生菌根际定殖能力研究 | 第30-31页 |
2.3.8.1 GFP标记 | 第30页 |
2.3.8.2 标记菌株质粒稳定性测定 | 第30页 |
2.3.8.3 盆栽试验探究BIA070根际定殖能力 | 第30-31页 |
2.3.9 蓝莓根际产酸菌的筛选 | 第31-33页 |
2.3.9.1 土壤样品采集 | 第31页 |
2.3.9.2 产酸菌的分离纯化 | 第31页 |
2.3.9.3 产酸能力测定 | 第31页 |
2.3.9.4 产酸菌菌种鉴定 | 第31-32页 |
2.3.9.5 高效液相色谱测定有机酸种类及含量 | 第32页 |
2.3.9.6 土壤培养试验 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-77页 |
3.1 蓝莓根际促生菌的筛选 | 第33-36页 |
3.1.1 生长素产生菌 | 第33页 |
3.1.2 溶磷菌 | 第33-35页 |
3.1.2.1 溶磷菌初筛 | 第33-34页 |
3.1.2.2 溶磷菌发酵液有效磷含量 | 第34-35页 |
3.1.3 蛋白酶产生菌 | 第35-36页 |
3.2 蓝莓根际促生菌菌种鉴定 | 第36-41页 |
3.2.1 菌体及菌落形态 | 第36-38页 |
3.2.2 促生菌生理生化特征 | 第38-39页 |
3.2.3 16SrDNA基因序列分析 | 第39-41页 |
3.3 蓝莓根际促生菌促生效果 | 第41-55页 |
3.3.1 蓝莓营养钵苗试验调查 | 第41-45页 |
3.3.1.1 生长素产生菌 | 第41-42页 |
3.3.1.2 蛋白酶产生菌 | 第42-43页 |
3.3.1.3 溶磷菌 | 第43-44页 |
3.3.1.4 营养钵苗试验 | 第44-45页 |
3.3.2 穴盘苗试验调查 | 第45-50页 |
3.3.2.1 2015 年7月 6 日调查结果 | 第45页 |
3.3.2.2 2015 年7月 30 日调查结果 | 第45-47页 |
3.3.2.3 2015 年11月 12 日调查结果 | 第47-50页 |
3.3.3 第二次营养钵苗试验结果 | 第50-55页 |
3.3.3.1 植株生长状况 | 第51-53页 |
3.3.3.2 土壤理化性质 | 第53-55页 |
3.4 促生菌对蓝莓根际土壤微生物群落结构的影响 | 第55-67页 |
3.4.1 细菌群落结构分析 | 第55-62页 |
3.4.1.1 OTU聚类 | 第55-56页 |
3.4.1.2 Alpha多样性分析 | 第56页 |
3.4.1.3 群落结构分析 | 第56-62页 |
3.4.1.4 群落功能基因预测分析 | 第62页 |
3.4.2 真菌群落结构分析 | 第62-67页 |
3.4.2.1 OTU聚类 | 第62-63页 |
3.4.2.2 Alpha多样性分析 | 第63页 |
3.4.2.3 群落结构分析 | 第63-67页 |
3.5 蓝莓根际促生菌BIA070的根际定殖能力研究 | 第67-68页 |
3.6 蓝莓根际产酸菌筛选 | 第68-77页 |
3.6.1 初筛 | 第68页 |
3.6.2 发酵液pH测定 | 第68-69页 |
3.6.3 菌种鉴定 | 第69-73页 |
3.6.3.1 菌落形态特征 | 第69-70页 |
3.6.3.2 产酸菌生理生化特征 | 第70-71页 |
3.6.3.3 产酸菌 16S rDNA序列比对 | 第71-73页 |
3.6.4 发酵液有机酸种类及含量 | 第73-75页 |
3.6.4.1 标样信息 | 第73页 |
3.6.4.2 测定结果 | 第73-75页 |
3.6.5 产酸菌土壤培养 | 第75-77页 |
4 讨论 | 第77-81页 |
5 结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第95页 |