| 附件 | 第2-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 枯草芽胞杆菌生防机制 | 第14-15页 |
| 1.1.1 营养与空间位点的竞争 | 第14页 |
| 1.1.2 拮抗作用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 诱导植物抗性 | 第15页 |
| 1.2 枯草芽胞杆菌脂肽类抗生素概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 环境条件对芽胞杆菌脂肽类物质合成的影响 | 第15-16页 |
| 1.2.2 脂肽类抗生素的防病作用 | 第16-17页 |
| 1.3 表面活性素的生物合成和调控 | 第17-19页 |
| 1.3.1 Surfactin的组成与结构 | 第17-18页 |
| 1.3.2 Surfactin的生物合成 | 第18-19页 |
| 1.3.3 Surfactin合成的基因调控 | 第19页 |
| 1.4 防治黄瓜枯萎病的芽胞杆菌研究概况 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 Bacillus subtilis 168产surfactin工程菌株的构建 | 第21-44页 |
| 第一节Bacillus subtilis 168转化方法的比较 | 第21-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 供试质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 仪器设备和试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 改良的Spizizen转化方法 | 第22-24页 |
| 2.2.2 高渗电击转化方法 | 第24-25页 |
| 2.2.3 9407电击转化方法 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.3.1 pBE2质粒的验证 | 第26-27页 |
| 2.3.2 阳性转化子的验证 | 第27-28页 |
| 2.3.3 转化效率的比较 | 第28页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第28-29页 |
| 第二节Bacillus subtilis 168产surfactin工程菌株的构建 | 第29-44页 |
| 2.5 试验材料 | 第29-30页 |
| 2.5.1 供试菌株和质粒 | 第29页 |
| 2.5.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.5.3 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.6 试验方法 | 第30-35页 |
| 2.6.1 sfp开放阅读框（ORF）的获得 | 第30-32页 |
| 2.6.2 sfp基因表达框的构建 | 第32-33页 |
| 2.6.3 重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.6.4 重组质粒转化B168菌株 | 第34-35页 |
| 2.6.5 重组菌株B168S产surfactin的能力 | 第35页 |
| 2.7 结果与分析 | 第35-43页 |
| 2.7.1 sfp开放阅读框的获得 | 第35-36页 |
| 2.7.2 sfp基因表达框的构建 | 第36-39页 |
| 2.7.3 重组质粒的构建 | 第39-41页 |
| 2.7.4 重组质粒转化B168菌株的筛选 | 第41-42页 |
| 2.7.5 重组菌株B168S产surfactin的检测 | 第42-43页 |
| 2.8 小结与讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 sfp基因转化对Bacillus subtilis 168生物学特性的影响 | 第44-48页 |
| 3.1 试验材料 | 第44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-45页 |
| 3.2.1 配置黄瓜根系分泌物重组培养基（CRE） | 第44页 |
| 3.2.2 sfp基因转化对B168菌落形态影响 | 第44页 |
| 3.2.3 sfp基因转化对B168菌落扩展速度的影响 | 第44页 |
| 3.2.4 sfp基因转化对B168形成生物膜能力的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.5 B168和B168S对Foc的平板拮抗作用 | 第45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 3.3.1 sfp基因转化改变了B168菌落形态 | 第45页 |
| 3.3.2 B168和B168S的菌落扩展速度 | 第45-46页 |
| 3.3.3 B168和B168S形成生物膜的能力 | 第46-47页 |
| 3.3.4 B168和B168S对Foc的平板拮抗作用 | 第47页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 sfp基因转化对Bacillus subtilis 168定殖能力和防病作用的影响 | 第48-53页 |
| 4.1 试验材料 | 第48页 |
| 4.2 试验方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 B168和B168S在黄瓜根际定殖能力的差异 | 第48页 |
| 4.2.2 B168S菌株对枯萎病菌在黄瓜茎内的抑制作用 | 第48-49页 |
| 4.2.3 B168S菌株对黄瓜枯萎病的抑制作用的盆栽实验 | 第49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-51页 |
| 4.3.1 B168和B168S在黄瓜根际定殖能力的差异 | 第49-50页 |
| 4.3.2 B168S菌株对黄瓜茎内枯萎病菌抑制作用的盆栽实验 | 第50-51页 |
| 4.3.3 B168S菌株对黄瓜枯萎病抑制作用的盆栽实验 | 第51页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 不同组分比例的surfactin对枯草芽胞杆菌生物膜形成的影响 | 第53-58页 |
| 5.1 试验材料 | 第53页 |
| 5.2 试验方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 培养液配制 | 第53页 |
| 5.2.2 不同组分surfactin粗提物的获得 | 第53-54页 |
| 5.2.3 HPLC检测菌株B006在各培养液中产生的surfactin | 第54页 |
| 5.2.4 不同组分比例的surfactin粗提物对B168和B168S生物膜形成的影响 | 第54页 |
| 5.3 结果与分析 | 第54-57页 |
| 5.3.1 不同培养液对菌株B006产生的surfactin总量的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.2 不同培养液对菌株B006产生的surfactin组分的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.3 不同比例surfactin组分粗提物对B168和B168S形成生物膜的影响 | 第56-57页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第57-58页 |
| 第六章 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
