| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 综述 | 第12-22页 |
| 1.1 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.1.1 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生物学特征 | 第12页 |
| 1.1.2 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的血清型分类 | 第12页 |
| 1.1.3 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子 | 第12-13页 |
| 1.1.4 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的流行病学研究 | 第13页 |
| 1.1.5 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的检测方法研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 副猪嗜血杆菌的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2.1 副猪嗜血杆菌的生物学特征 | 第14页 |
| 1.2.2 副猪嗜血杆菌的血清学分类 | 第14页 |
| 1.2.3 副猪嗜血杆菌的毒力因子 | 第14页 |
| 1.2.4 副猪嗜血杆菌的流行病学研究 | 第14-15页 |
| 1.2.5 副猪嗜血杆菌的检测方法研究进展 | 第15页 |
| 1.3 沙门氏菌的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.3.1 沙门氏菌的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.3.2 沙门氏菌的血清学分类 | 第16页 |
| 1.3.3 沙门氏菌的毒力因子 | 第16页 |
| 1.3.4 沙门氏菌的流行病学研究 | 第16页 |
| 1.3.5 沙门氏菌的检测方法研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 夹心DNA杂交技术(DNAH) | 第17-18页 |
| 1.4.1 DNAH技术概述 | 第17页 |
| 1.4.2 DNAH技术反应原理 | 第17-18页 |
| 1.4.3 DNAH技术特点 | 第18页 |
| 1.4.4 DNAH技术发展前景 | 第18页 |
| 1.5 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第18-22页 |
| 1.5.1 LAMP技术概述 | 第18-19页 |
| 1.5.2 LAMP技术反应原理 | 第19页 |
| 1.5.3 LAMP技术特点 | 第19-20页 |
| 1.5.4 LAMP技术发展前景 | 第20-22页 |
| 第2章 引言 | 第22-26页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第22页 |
| 2.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 2.2.1 基因序列分析及探针和引物的分析 | 第22页 |
| 2.2.2 分别建立三种病原菌的DNAH检测方法 | 第22-23页 |
| 2.2.3 分别建立三种病原菌的LAMP检测方法 | 第23页 |
| 2.2.4 方法间的比较 | 第23页 |
| 2.3 技术路线 | 第23-26页 |
| 2.3.1 分别建立三种病原菌DNAH检测方法的技术路线，见图 2-1。 | 第23-24页 |
| 2.3.2 分别建立三种病原菌LAMP检测方法的技术路线，见图 2-2。 | 第24-26页 |
| 第3章 三种病原菌DNAH检测方法的优化及建立 | 第26-48页 |
| 3.1 材料、主要试剂及仪器 | 第26-28页 |
| 3.1.1 标准菌株 | 第26页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 3.2 方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 细菌的增殖 | 第28页 |
| 3.2.2 序列分析及探针设计 | 第28-29页 |
| 3.2.3 DNAH技术操作步骤 | 第29-30页 |
| 3.2.4 DNAH检测条件的优化 | 第30页 |
| 3.2.5 DNAH特异性试验 | 第30-31页 |
| 3.2.6 DNAH敏感性试验与对比试验 | 第31-32页 |
| 3.2.7 DNAH重复性和稳定性试验 | 第32页 |
| 3.3 结果 | 第32-46页 |
| 3.3.1 探针设计 | 第32-34页 |
| 3.3.2 DNAH检测条件的优化及建立 | 第34-37页 |
| 3.3.3 DNAH特异性试验 | 第37-39页 |
| 3.3.4 DNAH敏感性试验与对比试验 | 第39-43页 |
| 3.3.5 DNAH重复性试验和稳定性试验 | 第43-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-48页 |
| 3.4.1 目的基因的选择 | 第46页 |
| 3.4.2 探针的设计及筛选 | 第46页 |
| 3.4.3 三种病原菌DNAH检测方法的评价 | 第46-47页 |
| 3.4.4 DNAH检测方法的应用评价 | 第47-48页 |
| 第4章 三种病原菌LAMP检测方法的优化及建立 | 第48-78页 |
| 4.1 材料、主要试剂及仪器 | 第48-51页 |
| 4.1.1 标准菌株、毒株 | 第48-49页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第50页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第50-51页 |
| 4.2 方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 细菌的增殖 | 第51页 |
| 4.2.2 核酸的提取 | 第51-52页 |
| 4.2.3 序列分析及引物设计 | 第52页 |
| 4.2.4 LAMP检测条件的优化 | 第52-53页 |
| 4.2.5 LAMP特异性试验 | 第53页 |
| 4.2.6 LAMP敏感性试验与对比试验 | 第53-54页 |
| 4.2.7 LAMP重复性和稳定性试验 | 第54页 |
| 4.3 结果 | 第54-73页 |
| 4.3.1 引物设计 | 第54-56页 |
| 4.3.2 引物的验证 | 第56-58页 |
| 4.3.3 LAMP检测条件的优化及建立 | 第58-64页 |
| 4.3.4 LAMP特异性试验 | 第64-66页 |
| 4.3.5 LAMP敏感性试验与对比试验 | 第66-71页 |
| 4.3.6 LAMP重复性试验和稳定性试验 | 第71-73页 |
| 4.4 临床应用 | 第73-75页 |
| 4.4.1 APP检测方法的临床应用 | 第73页 |
| 4.4.2 APP临床检测结果与分析 | 第73-74页 |
| 4.4.3 HPS检测方法的临床应用 | 第74页 |
| 4.4.4 HPS临床检测结果与分析 | 第74页 |
| 4.4.5 Sal检测方法的临床应用 | 第74页 |
| 4.4.6 Sal检测结果与分析 | 第74-75页 |
| 4.5 讨论 | 第75-78页 |
| 4.5.1 LAMP引物的设计及筛选 | 第75页 |
| 4.5.2 三种病原菌LAMP检测方法的评价 | 第75-76页 |
| 4.5.3 LAMP技术的改进与发展 | 第76页 |
| 4.5.4 两种快速检测方法的临床应用评价 | 第76-78页 |
| 第5章 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 1 | 第88-90页 |
| 声明 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 攻读硕士期间论文发表及专利、项目参与情况 | 第94页 |
