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油菜嵌合基因BnaA7.HSP70-1-like在拟南芥中的遗传转化及后代鉴定

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩写名词表第11-12页
1 文献综述第12-23页
    1.1 甘蓝型油菜细胞核雄性不育系 9012AB的研究进展第12-13页
    1.2 BnaC9.Tic40 参与 9012A育性转换的可能机理第13-14页
    1.3 拟南芥花药发育的基本过程第14-16页
    1.4 绒毡层细胞的功能第16-17页
    1.5 影响拟南芥绒毡层分化的关键基因第17-18页
    1.6 植物细胞活性氧代谢第18-20页
        1.6.1 活性氧代谢与雄性不育第19页
        1.6.2 活性氧代谢与绒毡层PCD的关系第19-20页
    1.7 酵母双杂交系统第20-22页
        1.7.1 酵母双杂交系统原理第20-21页
        1.7.2 酵母双杂交系统特点第21-22页
    1.8 本研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-34页
    2.1 实验材料第23页
    2.2 实验方法第23-34页
        2.2.1 转基因拟南芥的获得第23-25页
        2.2.2 拟南芥转基因后代的PCR检测第25页
        2.2.3 BnaA7.HSP701like在转基因单株中的表达分析第25-27页
        2.2.4 拟南芥转基因单株花药的表型鉴定第27-30页
        2.2.5 花药细胞的ROS含量测定第30-31页
        2.2.6 影响绒毡层发育相关基因的qPCR分析第31页
        2.2.7 酵母双杂交分析第31-34页
3 结果与分析第34-48页
    3.1 转基因表达载体的检测第34页
    3.2 拟南芥的遗传转化及后代鉴定第34-35页
    3.3 拟南芥转基因后代的表型鉴定第35-43页
        3.3.1 植株形态学观察第35-36页
        3.3.2 花粉育性鉴定第36-37页
        3.3.3 花药半薄切片观察第37-38页
        3.3.4 四分体胼胝质染色第38-39页
        3.3.5 绒毡层脂类积累观察第39-40页
        3.3.6 花药绒毡层PCD分析第40-41页
        3.3.7 花药细胞ROS的动态分析第41-43页
    3.4 BnaA7.HSP701like的表达分析第43页
    3.5 影响绒毡层发育相关基因的qPCR分析第43-44页
    3.6 酵母双杂交验证BnaA7.HSP701like与BnMs3 之间的互作关系第44-48页
        3.6.1 表达载体BnaA7.HSP701like-BD、BnMs3-AD的构建第44-45页
        3.6.2 诱饵载体BnaA7.HSP701like-BD的毒性检测第45页
        3.6.3 诱饵载体BnaA7.HSP701like-BD的自激活检测第45-46页
        3.6.4 BnaA7.HSP701like与BnMs3 之间的互作关系第46-48页
4 讨论第48-51页
    4.1 BnaA7.HSP701like-Col花粉败育的主要特征第48页
    4.2 BnaA7.HSP701like对绒毡层分化相关基因的遗传调控第48-49页
    4.3 BnaA7.HSP701like异位表达影响了花药ROS的动态平衡第49页
    4.4 BnaA7.HSP701like与BnMs3 的互作关系第49-51页
参考文献第51-55页
致谢第55-56页
附录 1第56-59页
附录 2第59页

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