| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 术语及符号说明 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 邻苯二甲酸酯类的生物降解 | 第10-14页 |
| 1.1.1 邻苯二甲酸酯类概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 邻苯二甲酸酯类生物降解的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.3 邻苯二甲酸酯类生物降解的代谢途径 | 第12-14页 |
| 1.2 嗜热酶 | 第14-15页 |
| 1.3 酯酶 | 第15-22页 |
| 1.3.1 酯酶概述 | 第15-16页 |
| 1.3.2 细菌酯酶的分类 | 第16-17页 |
| 1.3.3 酯酶的结构特征 | 第17-19页 |
| 1.3.4 酯酶的催化机制 | 第19-20页 |
| 1.3.5 酯酶的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.6 酯酶降解邻苯二甲酸酯类的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 研究内容 | 第22页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第2章 重组酯酶基因Est Z1、EstZ14和Est Z22的表达、纯化及酶学性质测定 | 第24-69页 |
| 2.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 实验菌株和载体 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.4 常用培养基 | 第25页 |
| 2.1.5 常用溶液及配制方法 | 第25-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 EstZ1、EstZ14和Est Z22的序列分析 | 第27页 |
| 2.2.2 感受态细胞(Escherichia coli BL21 (DE3))的制备 | 第27页 |
| 2.2.3 Bacillus sp. HJ14和Bacillus sp. SD01、Bacillus sp. SD02基因组提取 | 第27-29页 |
| 2.2.4 16S rDNA的PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.5 重组质粒的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.6 重组质粒的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.7 重组酯酶Est Z1、EstZ14和Est Z22在大肠杆菌中的诱导表达 | 第33页 |
| 2.2.8 重组酶的纯化、鉴定及蛋白含量的测定 | 第33-35页 |
| 2.2.9 重组酶活力的测定 | 第35页 |
| 2.2.10 重组酶酶学性质的研究 | 第35-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-62页 |
| 2.3.1 16S rDNA菌株鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3.2 EstZ1的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第39-47页 |
| 2.3.3 EstZ14的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第47-54页 |
| 2.3.4 EstZ22的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第54-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-66页 |
| 2.5 本章小结 | 第66-69页 |
| 第3章 重组酯酶对邻苯二甲酸酯类的降解研究 | 第69-83页 |
| 3.1 材料 | 第69-70页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第69页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第69-70页 |
| 3.2 方法 | 第70-71页 |
| 3.2.1 重组酯酶对邻苯二甲酸酯类的降解 | 第70页 |
| 3.2.2 降解产物检测 | 第70-71页 |
| 3.3 结果与分析 | 第71-79页 |
| 3.3.1 重组酯酶Est Z1对DEP和DiBP的降解分析 | 第71-75页 |
| 3.3.2 重组酯酶Est Z22对4种邻苯二甲酸酯的降解初步分析 | 第75-79页 |
| 3.4 讨论 | 第79-82页 |
| 3.5 本章小结 | 第82-83页 |
| 第4章 总结、创新与展望 | 第83-87页 |
| 4.1 总结 | 第83-85页 |
| 4.1.1 序列分析 | 第83页 |
| 4.1.2 酶学性质测定 | 第83-85页 |
| 4.1.3 EstZ1和EstZ22对邻苯二甲酸酯类的降解研究 | 第85页 |
| 4.2 创新 | 第85页 |
| 4.3 展望 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 | 第94-97页 |
| 附录A 本文使用缓冲液配方 | 第94-95页 |
| A1 不同pH值的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制 | 第94页 |
| A2 Tris-HCl缓冲液的配制 | 第94-95页 |
| A3 硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05硼酸根） | 第95页 |
| 附录B 本文酯酶氨基酸序列 | 第95-96页 |
| B1 酯酶EstZ1氨基酸序列 | 第95页 |
| B2 酯酶EstZ14氨基酸序列 | 第95-96页 |
| B3 酯酶EstZ22氨基酸序列 | 第96页 |
| 附录C 氨基酸中英文对照及缩写表 | 第96-97页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文和研究成果 | 第97页 |
