摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 山黧豆概述 | 第11-12页 |
1.1.1 家山黧豆的生物学特性 | 第11页 |
1.1.2 家山黧豆的利用价值 | 第11-12页 |
1.1.3 家山黧豆抗逆性研究 | 第12页 |
1.2 山黧豆毒素 β-ODAP | 第12-15页 |
1.2.1 β-ODAP的结构特性 | 第12-13页 |
1.2.2 β-ODAP的生物合成 | 第13-14页 |
1.2.3 β-ODAP的定性定量方法 | 第14页 |
1.2.4 β-ODAP含量的影响因素 | 第14-15页 |
1.3 山黧豆中毒机制研究 | 第15-17页 |
1.4 山黧豆去毒和低毒选育 | 第17-19页 |
1.4.1 山黧豆种子的低毒加工 | 第17-18页 |
1.4.2 山黧豆低毒品种选育进展 | 第18-19页 |
1.5 RNA干扰 | 第19-21页 |
1.5.1 RNAi原理 | 第19-20页 |
1.5.2 RNAi作用特点 | 第20-21页 |
1.5.3 RNAi应用 | 第21页 |
1.6 山黧豆离体再生体系的构建及遗传转化 | 第21-22页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 山黧豆LsCASase基因的克隆、生物信息学分析及表达谱分析 | 第23-34页 |
2.1 材料与方法 | 第23-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 LsCASase基因保守片段的同源克隆 | 第24-25页 |
2.1.4 LsCASase基因3'端扩增 | 第25页 |
2.1.5 LsCASase基因5'端扩增 | 第25页 |
2.1.6 LsCASase基因的生物信息学分析 | 第25页 |
2.1.7 组织特异性表达的总RNA提取及反转录 | 第25-26页 |
2.1.8 实时定量 | 第26页 |
2.1.9 数据处理 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-32页 |
2.2.1 LsCASase基因的克隆 | 第26-27页 |
2.2.2 LsCASase基因的生物信息学分析 | 第27-32页 |
2.3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 LsCASase基因RNAi载体的构建 | 第34-40页 |
3.1 材料与方法 | 第34-36页 |
3.1.1 菌株与质粒 | 第34页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第34页 |
3.1.3 总RNA提取和cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
3.1.4 LsCASase正反义片段的克隆 | 第35页 |
3.1.5 入门克隆载体的构建 | 第35-36页 |
3.1.6 表达克隆载体的构建 | 第36页 |
3.1.7 酶切鉴定 | 第36页 |
3.1.8 转化农杆菌 | 第36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-38页 |
3.2.1 LsCASase正反义片段的克隆 | 第36-37页 |
3.2.2 入门克隆载体的构建 | 第37页 |
3.2.3 表达克隆载体的构建 | 第37-38页 |
3.2.4 转化农杆菌 | 第38页 |
3.3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 山黧豆离体再生体系的构建及遗传转化 | 第40-45页 |
4.1 材料和方法 | 第40-41页 |
4.1.1 植物材料和培养条件 | 第40页 |
4.1.2 愈伤组织诱导和不定芽的获得 | 第40页 |
4.1.3 生根和驯化 | 第40-41页 |
4.1.4 农杆菌介导的遗传转化 | 第41页 |
4.2 结果与分析 | 第41-43页 |
4.2.1 可分化型愈伤组织的形态特征 | 第41-42页 |
4.2.2 外植体类型和预处理对绿色瘤状愈伤组织和不定芽形成的影响 | 第42-43页 |
4.3 讨论 | 第43-45页 |
第六章 结论与展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者介绍 | 第55页 |