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山黧豆β-腈基丙氨酸合成酶基因cDNA全长的克隆及功能的初步研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第11-23页
    1.1 山黧豆概述第11-12页
        1.1.1 家山黧豆的生物学特性第11页
        1.1.2 家山黧豆的利用价值第11-12页
        1.1.3 家山黧豆抗逆性研究第12页
    1.2 山黧豆毒素 β-ODAP第12-15页
        1.2.1 β-ODAP的结构特性第12-13页
        1.2.2 β-ODAP的生物合成第13-14页
        1.2.3 β-ODAP的定性定量方法第14页
        1.2.4 β-ODAP含量的影响因素第14-15页
    1.3 山黧豆中毒机制研究第15-17页
    1.4 山黧豆去毒和低毒选育第17-19页
        1.4.1 山黧豆种子的低毒加工第17-18页
        1.4.2 山黧豆低毒品种选育进展第18-19页
    1.5 RNA干扰第19-21页
        1.5.1 RNAi原理第19-20页
        1.5.2 RNAi作用特点第20-21页
        1.5.3 RNAi应用第21页
    1.6 山黧豆离体再生体系的构建及遗传转化第21-22页
    1.7 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 山黧豆LsCASase基因的克隆、生物信息学分析及表达谱分析第23-34页
    2.1 材料与方法第23-26页
        2.1.1 植物材料第23-24页
        2.1.2 主要试剂第24页
        2.1.3 LsCASase基因保守片段的同源克隆第24-25页
        2.1.4 LsCASase基因3'端扩增第25页
        2.1.5 LsCASase基因5'端扩增第25页
        2.1.6 LsCASase基因的生物信息学分析第25页
        2.1.7 组织特异性表达的总RNA提取及反转录第25-26页
        2.1.8 实时定量第26页
        2.1.9 数据处理第26页
    2.2 结果与分析第26-32页
        2.2.1 LsCASase基因的克隆第26-27页
        2.2.2 LsCASase基因的生物信息学分析第27-32页
    2.3 讨论第32-34页
第三章 LsCASase基因RNAi载体的构建第34-40页
    3.1 材料与方法第34-36页
        3.1.1 菌株与质粒第34页
        3.1.2 试剂与仪器第34页
        3.1.3 总RNA提取和cDNA第一链的合成第34-35页
        3.1.4 LsCASase正反义片段的克隆第35页
        3.1.5 入门克隆载体的构建第35-36页
        3.1.6 表达克隆载体的构建第36页
        3.1.7 酶切鉴定第36页
        3.1.8 转化农杆菌第36页
    3.2 结果与分析第36-38页
        3.2.1 LsCASase正反义片段的克隆第36-37页
        3.2.2 入门克隆载体的构建第37页
        3.2.3 表达克隆载体的构建第37-38页
        3.2.4 转化农杆菌第38页
    3.3 讨论第38-40页
第四章 山黧豆离体再生体系的构建及遗传转化第40-45页
    4.1 材料和方法第40-41页
        4.1.1 植物材料和培养条件第40页
        4.1.2 愈伤组织诱导和不定芽的获得第40页
        4.1.3 生根和驯化第40-41页
        4.1.4 农杆菌介导的遗传转化第41页
    4.2 结果与分析第41-43页
        4.2.1 可分化型愈伤组织的形态特征第41-42页
        4.2.2 外植体类型和预处理对绿色瘤状愈伤组织和不定芽形成的影响第42-43页
    4.3 讨论第43-45页
第六章 结论与展望第45-46页
参考文献第46-54页
致谢第54-55页
作者介绍第55页

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