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水分胁迫下丛枝菌根真菌调控宁夏枸杞抗旱以及磷代谢的机制研究

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第一章 文献综述第17-31页
    1.1 AM真菌的分类与分离第17-19页
        1.1.1 AM真菌分类地位第17-18页
        1.1.2 AM真菌分离与鉴定第18-19页
    1.2 水分胁迫下植物水分状况与AM真菌的关系第19-22页
        1.2.1 水分胁迫对植物水分代谢的影响第19-20页
        1.2.2 AM真菌对植物水分状况的影响第20-22页
    1.3 水分胁迫下植物光合能力与AM真菌的关系第22-24页
        1.3.1 水分胁迫对植物生长和光合作用的影响第22-23页
        1.3.2 AM真菌对植物光合能力的影响第23-24页
    1.4 水分胁迫下植物糖水平与AM真菌的关系第24-26页
        1.4.1 水分胁迫对植物糖水平的影响第24-25页
        1.4.2 AM真菌对植物糖水平的影响第25-26页
    1.5 植物磷吸收与AM真菌的关系第26-28页
        1.5.1 土壤磷存在状况与水分胁迫的关系第26页
        1.5.2 植物磷吸收策略第26-27页
        1.5.3 植物磷酸盐转运蛋白第27-28页
        1.5.4 AM真菌诱导的磷酸盐转运蛋白第28页
    1.6 研究目的与意义第28-31页
        1.6.1 水分胁迫和AM真菌对宁夏枸杞水分状况、光合与糖水平的影响第29-30页
        1.6.2 水分胁迫和AM真菌对宁夏枸杞磷代谢的影响第30-31页
第二章 宁夏枸杞根际AM真菌群落对菌丝室磷处理的响应第31-45页
    2.1 引言第31页
    2.2 试验设计第31-37页
        2.2.1 样品采集第31页
        2.2.2 在菌丝室不同浓度磷处理下AM真菌的富集培养第31-32页
        2.2.3 根系AM真菌定殖率的测定第32-33页
        2.2.4 AM真菌的分子鉴定与AM真菌群落的DGGE电泳第33-37页
            2.2.4.1 AM真菌的分子鉴定第33-34页
            2.2.4.2 菌丝室不同磷浓度处理下的根、土和沙中AM真菌群落的DGGE电泳第34-37页
    2.3 数据处理第37-38页
    2.4 结果与分析第38-42页
        2.4.1 菌丝室不同磷浓度处理下AM真菌的定殖率第38页
        2.4.2 AM真菌的单孢分子鉴定第38-39页
        2.4.3 菌丝室不同磷浓度处理下AM真菌群落的变化第39-42页
    2.5 讨论第42-45页
        2.5.1 AM真菌富集培养和分子鉴定第42页
        2.5.2 AM真菌群落对于菌丝室不同供磷条件的响应第42-45页
第三章 水分胁迫下丛枝菌根真菌对宁夏枸杞水分、光合和糖水平的影响第45-66页
    3.1 引言第45-46页
    3.2 材料与方法第46-52页
        3.2.1 试验材料第46页
        3.2.2 试验设计第46-47页
        3.2.3 叶片气体交换与叶绿素荧光参数测定第47页
        3.2.4 植株生长以及叶片水分状况测定第47-48页
        3.2.5 叶片光合色素测定第48页
        3.2.6 根系AM真菌定殖率第48页
        3.2.7 宁夏枸杞根系水孔蛋白基因的转录检测第48-51页
            3.2.7.1 宁夏枸杞和根内球囊霉水孔蛋白基因的筛选与序列分析第48页
            3.2.7.2 宁夏枸杞和根内球囊霉水孔蛋白基因的实时荧光定量PCR检测第48-51页
        3.2.8 植株糖水平的测定第51-52页
            3.2.8.1 宁夏枸杞根和叶中可溶性糖和淀粉的测定第51页
            3.2.8.2 宁夏枸杞根和叶中单双糖类化合物的测定第51-52页
    3.3 数据处理第52页
    3.4 结果与分析第52-61页
        3.4.1 AM真菌对水分胁迫下宁夏枸杞生长、水分状况和光合作用的影响第52-56页
        3.4.2 宁夏枸杞和AM真菌水孔蛋白基因在水分胁迫下根系中的转录水平第56-58页
        3.4.3 AM真菌对水分胁迫下宁夏枸杞糖水平的影响第58-61页
    3.5 讨论第61-66页
        3.5.1 AM真菌和水分胁迫对宁夏枸杞生长、水分状况以及光合作用的影响第61-62页
        3.5.2 AM真菌和水分胁迫对宁夏枸杞及AM真菌的水孔蛋白基因转录的影响第62-63页
        3.5.3 AM真菌和水分胁迫对宁夏枸杞糖水平的影响第63-66页
第四章 水分胁迫下丛枝菌根真菌对宁夏枸杞磷表现的影响第66-73页
    4.1 引言第66页
    4.2 材料与方法第66-68页
        4.2.1 试验材料第66页
        4.2.2 试验设计第66-67页
        4.2.3 AM真菌定殖率测定第67页
        4.2.4 植株磷含量测定第67页
        4.2.5 根系酸性磷酸酶水平测定第67-68页
        4.2.6 叶片花青素含量测定第68页
    4.3 数据处理第68页
    4.4 结果与分析第68-71页
        4.4.1 水分胁迫下的AM真菌定殖率第68-69页
        4.4.2 水分胁迫与AM真菌对宁夏枸杞生长、磷含量的影响第69页
        4.4.3 水分胁迫与AM真菌对宁夏枸杞根系酸性磷酸酶和叶片花青素的影响第69-71页
    4.5 讨论第71-73页
        4.5.1 水分胁迫下AM真菌对宁夏枸杞生长与磷表现的影响第71-73页
第五章 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因和启动子区域的克隆第73-84页
    5.1 引言第73-74页
    5.2 材料与方法第74-78页
        5.2.1 RNA的提取与cDNA的合成第74页
        5.2.2 DNA的提取第74页
            5.2.2.1 植物基因组DNA的提取第74页
            5.2.2.2 基因组DNA的浓度、纯度及完整性检测第74页
        5.2.3 基于CODE-HOP和RFLP的宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因保守片段的克隆第74-75页
        5.2.4 LbPT1~LbPT5和LbPT7的全长克隆第75-77页
            5.2.4.1 基因特异性引物的设计第75页
            5.2.4.2 3’RACE与 5’RACE用cDNA的合成第75-76页
            5.2.4.3 3’和 5’RACE扩增第76-77页
            5.2.4.4 全长cDNA的获得与验证第77页
        5.2.5 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因启动子区域扩增第77-78页
            5.2.5.1 扩增启动子用基因特异性引物的设计第77页
            5.2.5.2 LbPT1~LbPT5和LbPT7基因启动子区域扩增第77-78页
    5.3 数据处理第78-79页
    5.4 结果与分析第79-80页
        5.4.1 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因的分析第79页
        5.4.2 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因的启动子区域分析第79-80页
    5.5 讨论第80-84页
        5.5.1 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因的生物信息学分析第80页
        5.5.2 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因启动子的顺式作用元件分析第80-84页
第六章 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白的功能验证与亚细胞定位第84-96页
    6.1 引言第84-85页
    6.2 材料与方法第85-88页
        6.2.1 试验材料第85页
        6.2.2 载体构建第85页
        6.2.3 酵母遗传转化第85-86页
        6.2.4 酵母生长表现的测定第86-87页
        6.2.5 酵母酸性磷酸酶活性的检测第87页
        6.2.6 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因在烟草叶片与根系上的瞬时表达第87-88页
            6.2.6.1 农杆菌电转感受态细胞的制备以及质粒转化第87-88页
            6.2.6.2 瞬时表达的转染及检测第88页
    6.3 结果与分析第88-93页
        6.3.1 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白在酵母中的功能分析第88-90页
        6.3.2 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白的亚细胞定位分析第90-93页
    6.4 讨论第93-96页
        6.4.1 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白的功能第93-94页
        6.4.2 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白的亚细胞定位与功能的关系第94-96页
第七章 水分胁迫下丛枝菌根真菌对宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因表达的影响第96-111页
    7.1 引言第96页
    7.2 材料与方法第96-99页
        7.2.1 试验材料第96页
        7.2.2 试验设计第96-97页
        7.2.3 AM真菌定殖率测定第97页
        7.2.4 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因菌根化特性和组织特异性转录检测第97页
        7.2.5 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因在磷处理和水分胁迫下的转录检测第97-98页
        7.2.6 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因在不同叶龄叶片的转录检测第98页
        7.2.7 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因在乙烯处理下的转录反应第98-99页
    7.3 数据处理第99页
    7.4 结果与分析第99-105页
        7.4.1 AM真菌在磷处理下的定殖率第99-100页
        7.4.2 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因的菌根诱导性及组织特异性表达第100页
        7.4.3 AM真菌和磷处理对宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因转录水平的影响第100-102页
        7.4.4 AM真菌和水分胁迫对宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因转录水平的影响第102-103页
        7.4.5 乙烯处理对AM真菌定殖与磷酸盐转运蛋白基因转录水平的影响第103-105页
    7.5 讨论第105-111页
        7.5.1 宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因功能的分化与保守第105-107页
        7.5.2 AM真菌与磷和乙烯的关系第107-109页
        7.5.3 AM真菌对水分胁迫下宁夏枸杞磷酸盐转运蛋白基因表达的影响第109-111页
第八章 结论与展望第111-115页
    8.1 研究特色与创新之处第111-112页
    8.2 研究结论第112-114页
    8.3 研究展望第114-115页
参考文献第115-134页
附录第134-155页
缩略词第155-156页
致谢第156-157页
作者简介第157页

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