| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表（Abbreviations） | 第13-19页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 第一篇 文献综述 | 第20-34页 |
| 1.1 鸡卵泡的生长发育 | 第20-23页 |
| 1.1.1 鸡卵巢、卵泡的发育特点 | 第20-21页 |
| 1.1.2 鸡卵泡的结构 | 第21-22页 |
| 1.1.3 卵泡内细胞的作用 | 第22-23页 |
| 1.2 鸡等级前卵泡生长发育过程中相关生物标记候选基因 | 第23-24页 |
| 1.3 Hippo/MST信号通路 | 第24-29页 |
| 1.3.1 Hippo信号通路的发现 | 第24-25页 |
| 1.3.2 Hippo/MST信号通路的主要成员 | 第25-29页 |
| 1.3.3 Hippo/MST信号通路的作用 | 第29页 |
| 1.4 LATS2基因 | 第29-31页 |
| 1.4.1 LATS2基因的结构 | 第29-30页 |
| 1.4.2 LATS2基因的生物功能 | 第30-31页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| 1.6 研究方案及方法 | 第32-34页 |
| 第二篇 研究内容 | 第34-115页 |
| 第一章 LATS2及Hippo/MST信号通路上下游基因mRNA在卵泡中的表达特性 | 第34-49页 |
| 引言 | 第34页 |
| 1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 实验对象 | 第34页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 1.2.1 动物模型的建立 | 第35页 |
| 1.2.2 组织取样与保存 | 第35页 |
| 1.2.3 组织样品总RNA的提取 | 第35-37页 |
| 1.2.4 组织样品RNA的检测 | 第37页 |
| 1.2.5 cDNA第一条链的合成 | 第37-38页 |
| 1.2.6 设计引物 | 第38页 |
| 1.2.7 目的基因PCR扩增 | 第38-39页 |
| 1.2.8 琼脂糖凝胶电泳检测与成像分析 | 第39页 |
| 1.2.9 数据分析 | 第39页 |
| 1.3 结果 | 第39-47页 |
| 1.3.1 总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 1.3.2 鸡MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因在卵巢间质和不同直径卵泡组织中的mRNA相对表达量 | 第40-47页 |
| 1.4 讨论 | 第47-48页 |
| 1.5 小结 | 第48-49页 |
| 第二章 过表达LATS2基因抑制鸡等级前卵泡的生长发育 | 第49-85页 |
| 引言 | 第49页 |
| 2.1 实验材料 | 第49-52页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第49页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第49-50页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第50-52页 |
| 2.1.4 抗体 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-70页 |
| 2.2.1 引物的设计与合成 | 第52-53页 |
| 2.2.2 鸡等级前卵泡原代颗粒细胞的分离和培养 | 第53-54页 |
| 2.2.3 目的DNA片段的制备 | 第54-57页 |
| 2.2.4 载体的制备 | 第57-58页 |
| 2.2.5 构建连接载体 | 第58-59页 |
| 2.2.6 连接产物的转化 | 第59-61页 |
| 2.2.7 重组子筛选 | 第61-63页 |
| 2.2.8 过表达转染 | 第63-64页 |
| 2.2.9 LATS2基因过表达验证 | 第64-69页 |
| 2.2.10 MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因mRNA表达量的测定 | 第69页 |
| 2.2.11 FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因mRNA表达量的测定 | 第69页 |
| 2.2.12 检测颗粒细胞的增殖 | 第69-70页 |
| 2.2.13 数据处理 | 第70页 |
| 2.3 结果 | 第70-82页 |
| 2.3.1 鸡等级前卵泡原代颗粒细胞的分离和培养 | 第70-71页 |
| 2.3.2 目的DNA片段的制备 | 第71-72页 |
| 2.3.3 载体的制备 | 第72-73页 |
| 2.3.4 连接载体的构建与筛选 | 第73页 |
| 2.3.5 过表达转染 | 第73-74页 |
| 2.3.6 LATS2基因过表达验证 | 第74-78页 |
| 2.3.7 MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因的溶解曲线和扩增曲线 | 第78页 |
| 2.3.8 LATS2过表达对MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因mRNA表达量的影响 | 第78-79页 |
| 2.3.9 FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因的溶解曲线和扩增曲线 | 第79页 |
| 2.3.10 LATS2过表达对FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因mRNA表达量的影响 | 第79-81页 |
| 2.3.11 LATS2过表达对鸡等级前卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第81-82页 |
| 2.4 讨论 | 第82-84页 |
| 2.5 小结 | 第84-85页 |
| 第三章 siRNA干扰LATS2基因促进鸡等级前卵泡的生长发育 | 第85-100页 |
| 引言 | 第85页 |
| 3.1 实验材料 | 第85页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第85页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第85页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第85页 |
| 3.1.4 抗体 | 第85页 |
| 3.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第85页 |
| 3.2.2 鸡等级前卵泡原代颗粒细胞的分离和培养 | 第85-86页 |
| 3.2.3 制备Lats2 siRNA干扰片段 | 第86页 |
| 3.2.4 Lats2 siRNA干扰片段的转染 | 第86页 |
| 3.2.5 Lats2 siRNA干扰片段的筛选与验证 | 第86-87页 |
| 3.2.6 MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因mRNA表达量的测定 | 第87页 |
| 3.2.7 FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因mRNA表达量的测定 | 第87页 |
| 3.2.8 检测颗粒细胞的增殖 | 第87页 |
| 3.2.9 数据处理 | 第87页 |
| 3.3 结果 | 第87-97页 |
| 3.3.1 鸡等级前卵泡原代颗粒细胞的分离和培养 | 第87页 |
| 3.3.2 Lats2 siRNA干扰片段的转染 | 第87-88页 |
| 3.3.3 Lats2 siRNA干扰片段的筛选与验证 | 第88-92页 |
| 3.3.4 MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因的溶解曲线和扩增曲线 | 第92页 |
| 3.3.5 siRNA干扰LATS2基因对MST1、MST2、LATS2、YAP1、TEAD1和TEAD3基因mRNA表达量的影响 | 第92-94页 |
| 3.3.6 FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因的溶解曲线和扩增曲线 | 第94页 |
| 3.3.7 siRNA干扰LATS2基因对FSHR、STAR、CYP11A1、ESR1和ESR2基因mRNA表达量的影响 | 第94-96页 |
| 3.3.8 siRNA干扰LATS2基因对鸡等级前卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第96-97页 |
| 3.4 讨论 | 第97-99页 |
| 3.5 小结 | 第99-100页 |
| 第四章 鸡ESR1和ESR2基因遗传多态性及其与产蛋性状关联分析 | 第100-115页 |
| 前言 | 第100页 |
| 4.1 实验材料 | 第100-103页 |
| 4.1.1 实验对象 | 第100-101页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第101页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第101-103页 |
| 4.2 实验方法 | 第103-106页 |
| 4.2.1 血液采集与保存 | 第103页 |
| 4.2.2 全血基因组DNA的提取与检测 | 第103页 |
| 4.2.3 设计引物 | 第103-104页 |
| 4.2.4 PCR产物扩增与纯化 | 第104-105页 |
| 4.2.5 PCR-SSCP基因分型与单倍型重组 | 第105页 |
| 4.2.6 克隆测序 | 第105页 |
| 4.2.7 多态性评估 | 第105页 |
| 4.2.8 标记性状关联分析 | 第105-106页 |
| 4.2.9 预测SNP位点基因型效应 | 第106页 |
| 4.3 结果与分析 | 第106-112页 |
| 4.3.1 ESR1和ESR2基因目的片段扩增结果 | 第106-107页 |
| 4.3.2 候选基因PCR-SSCP结果 | 第107-108页 |
| 4.3.3 目的序列的多态性 | 第108-109页 |
| 4.3.4 等位基因频率和基因型频率 | 第109-110页 |
| 4.3.5 SNP多态性与产蛋性状的关联分析 | 第110-112页 |
| 4.4 讨论 | 第112-114页 |
| 4.5 小结 | 第114-115页 |
| 结论 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-130页 |
| 附录 | 第130-144页 |
| 作者简介 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
