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谷子穗部突变体sidts1的鉴定及候选基因功能分析

中文摘要第12-13页
Abstract第13-14页
第一章 引言第15-25页
    1.1 拟南芥花发育研究现状第15-16页
    1.2 禾本科作物花发育研究现状第16-18页
    1.3 植物中锌铁微量金属元素研究进展第18-20页
        1.3.1 植物体内锌元素的研究第18-19页
        1.3.2 植物体内铁元素的研究第19-20页
    1.4 植物锌铁转运蛋白ZIP家族的研究进展第20-23页
        1.4.1 谷子(Setaria italica)中ZIP家族研究现状第20-21页
        1.4.2 拟南芥(Arabidopsis)中的ZIP家族研究现状第21页
        1.4.3 水稻(Oryza sativa)中的ZIP家族研究现状第21-22页
        1.4.4 玉米(Zea mays)中的ZIP家族研究现状第22-23页
    1.5 DNA分子标记与图位克隆第23-24页
    1.6 本研究的目的及意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-39页
    2.1 实验材料与试剂、药品第25-28页
        2.1.1 试验材料的获得第25页
        2.1.2 叶片样本的选取及保存第25页
        2.1.3 实验所需试剂药品第25-28页
            2.1.3.1 DNA提取所需试剂的配制第25页
            2.1.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)试剂配制第25-26页
            2.1.3.3 琼脂糖凝胶配制第26页
            2.1.3.4 培养基LB的配制第26页
            2.1.3.5 抗生素工作液配制第26页
            2.1.3.6 亚细胞定位所需试剂配制第26页
            2.1.3.7 各工具酶PCR反应体系第26-28页
    2.2 实验方法第28-39页
        2.2.1 农艺学性状调查第28-29页
        2.2.2 穗部扫描电镜观察第29页
        2.2.3 种子观察及数据统计第29页
        2.2.4 穗部锌、铁金属含量的测定第29页
        2.2.5 CTAB法提取DNA第29-30页
        2.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及检测技术第30-31页
            2.2.6.1 制胶(通风橱中操作)第30-31页
            2.2.6.2 银染显色第31页
        2.2.7 琼脂糖凝胶电泳第31-32页
        2.2.8 利用SSR标记以及定位群体进行基因初步定位第32页
        2.2.9 基因精细定位及候选基因的选择第32-33页
        2.2.10 RNA提取及反转第33-35页
            2.2.10.1 RNA提取第33-34页
            2.2.10.2 RNA反转录成cDNA第34-35页
        2.2.11 实时荧光定量qRT-PCR第35页
        2.2.12 RT-PCR第35页
        2.2.13 亚细胞定位第35-38页
            2.2.13.1 聚类分析第36页
            2.2.13.2 软件预测定位位置第36页
            2.2.13.3 亚细胞表达载体的构建及质粒提取第36-37页
            2.2.13.4 原生质体的制备与转化第37-38页
        2.2.14 谷子ZIP(Zinc/iron permease)家族成员挖掘第38-39页
第三章 结果与分析第39-57页
    3.1 突变体sidts1表型特征第39-41页
    3.2 突变体sidts1的主要农艺性状差异分析第41-44页
    3.3 幼穗扫描电镜差异分析第44-45页
    3.4 穗部锌、铁金属含量测定结果分析第45页
    3.5 遗传分析第45-46页
    3.6 sidts1突变基因定位第46-49页
        3.6.1 作图群体父母本间多态性标记的筛选第46页
        3.6.2 sidts1基因的初步定位第46-48页
        3.6.3 sidts1突变体基因精细定位第48-49页
        3.6.4 候选突变基因鉴定第49页
    3.7 目的基因生物信息学分析第49-51页
    3.8 目的基因RT-PCR、qRT-PCR分析第51页
    3.9 亚细胞定位第51-54页
        3.9.1 同源基因分析第51-53页
        3.9.2 信号肽预测第53页
        3.9.3 跨膜结构预测第53-54页
        3.9.4 蛋白预测位置第54页
        3.9.5 亚细胞定位结果第54页
    3.10 谷子ZIP家族成员及qRT-PCR分析第54-57页
第四章 讨论第57-61页
    4.1 突变体sidts1表型的特殊性第57-58页
    4.2 突变体sidts1穗部锌、铁含量升高第58页
    4.3 突变体sidts1穗部红色的形成第58页
    4.4 突变体等 6550515B的佐证第58-59页
    4.5 SiDTS1基因功能分析第59页
    4.6 酵母异源功能互补研究第59-60页
    4.7 今后深入开展工作的设想与建议第60-61页
第五章 结论第61-63页
参考文献第63-71页
附录第71-74页
攻读学位期间取得的研究成果第74-75页
致谢第75-76页
个人简况及联系方式第76-77页

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