中文摘要 | 第12-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第15-25页 |
1.1 拟南芥花发育研究现状 | 第15-16页 |
1.2 禾本科作物花发育研究现状 | 第16-18页 |
1.3 植物中锌铁微量金属元素研究进展 | 第18-20页 |
1.3.1 植物体内锌元素的研究 | 第18-19页 |
1.3.2 植物体内铁元素的研究 | 第19-20页 |
1.4 植物锌铁转运蛋白ZIP家族的研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 谷子(Setaria italica)中ZIP家族研究现状 | 第20-21页 |
1.4.2 拟南芥(Arabidopsis)中的ZIP家族研究现状 | 第21页 |
1.4.3 水稻(Oryza sativa)中的ZIP家族研究现状 | 第21-22页 |
1.4.4 玉米(Zea mays)中的ZIP家族研究现状 | 第22-23页 |
1.5 DNA分子标记与图位克隆 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 实验材料与试剂、药品 | 第25-28页 |
2.1.1 试验材料的获得 | 第25页 |
2.1.2 叶片样本的选取及保存 | 第25页 |
2.1.3 实验所需试剂药品 | 第25-28页 |
2.1.3.1 DNA提取所需试剂的配制 | 第25页 |
2.1.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)试剂配制 | 第25-26页 |
2.1.3.3 琼脂糖凝胶配制 | 第26页 |
2.1.3.4 培养基LB的配制 | 第26页 |
2.1.3.5 抗生素工作液配制 | 第26页 |
2.1.3.6 亚细胞定位所需试剂配制 | 第26页 |
2.1.3.7 各工具酶PCR反应体系 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-39页 |
2.2.1 农艺学性状调查 | 第28-29页 |
2.2.2 穗部扫描电镜观察 | 第29页 |
2.2.3 种子观察及数据统计 | 第29页 |
2.2.4 穗部锌、铁金属含量的测定 | 第29页 |
2.2.5 CTAB法提取DNA | 第29-30页 |
2.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及检测技术 | 第30-31页 |
2.2.6.1 制胶(通风橱中操作) | 第30-31页 |
2.2.6.2 银染显色 | 第31页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
2.2.8 利用SSR标记以及定位群体进行基因初步定位 | 第32页 |
2.2.9 基因精细定位及候选基因的选择 | 第32-33页 |
2.2.10 RNA提取及反转 | 第33-35页 |
2.2.10.1 RNA提取 | 第33-34页 |
2.2.10.2 RNA反转录成cDNA | 第34-35页 |
2.2.11 实时荧光定量qRT-PCR | 第35页 |
2.2.12 RT-PCR | 第35页 |
2.2.13 亚细胞定位 | 第35-38页 |
2.2.13.1 聚类分析 | 第36页 |
2.2.13.2 软件预测定位位置 | 第36页 |
2.2.13.3 亚细胞表达载体的构建及质粒提取 | 第36-37页 |
2.2.13.4 原生质体的制备与转化 | 第37-38页 |
2.2.14 谷子ZIP(Zinc/iron permease)家族成员挖掘 | 第38-39页 |
第三章 结果与分析 | 第39-57页 |
3.1 突变体sidts1表型特征 | 第39-41页 |
3.2 突变体sidts1的主要农艺性状差异分析 | 第41-44页 |
3.3 幼穗扫描电镜差异分析 | 第44-45页 |
3.4 穗部锌、铁金属含量测定结果分析 | 第45页 |
3.5 遗传分析 | 第45-46页 |
3.6 sidts1突变基因定位 | 第46-49页 |
3.6.1 作图群体父母本间多态性标记的筛选 | 第46页 |
3.6.2 sidts1基因的初步定位 | 第46-48页 |
3.6.3 sidts1突变体基因精细定位 | 第48-49页 |
3.6.4 候选突变基因鉴定 | 第49页 |
3.7 目的基因生物信息学分析 | 第49-51页 |
3.8 目的基因RT-PCR、qRT-PCR分析 | 第51页 |
3.9 亚细胞定位 | 第51-54页 |
3.9.1 同源基因分析 | 第51-53页 |
3.9.2 信号肽预测 | 第53页 |
3.9.3 跨膜结构预测 | 第53-54页 |
3.9.4 蛋白预测位置 | 第54页 |
3.9.5 亚细胞定位结果 | 第54页 |
3.10 谷子ZIP家族成员及qRT-PCR分析 | 第54-57页 |
第四章 讨论 | 第57-61页 |
4.1 突变体sidts1表型的特殊性 | 第57-58页 |
4.2 突变体sidts1穗部锌、铁含量升高 | 第58页 |
4.3 突变体sidts1穗部红色的形成 | 第58页 |
4.4 突变体等 6550515B的佐证 | 第58-59页 |
4.5 SiDTS1基因功能分析 | 第59页 |
4.6 酵母异源功能互补研究 | 第59-60页 |
4.7 今后深入开展工作的设想与建议 | 第60-61页 |
第五章 结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录 | 第71-74页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简况及联系方式 | 第76-77页 |