| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第16-27页 |
| 1.1 前言 | 第16-17页 |
| 1.2 Wap65的简介 | 第17-20页 |
| 1.2.1 Wap65的结构和分类 | 第17-19页 |
| 1.2.2 Wap65的分布情况 | 第19-20页 |
| 1.3 Wap65在应激方面的研究进展 | 第20-25页 |
| 1.3.1 Wap65与温度 | 第20-21页 |
| 1.3.2 Wap65与细菌感染 | 第21-22页 |
| 1.3.3 Wap65与重金属胁迫 | 第22-23页 |
| 1.3.4 Wap65与寄生虫吸附 | 第23-24页 |
| 1.3.5 Wap65与海水盐度 | 第24-25页 |
| 1.4 本课题研究内容及意义 | 第25-26页 |
| 1.5 课题来源及论文的内容安排 | 第26-27页 |
| 2 蓝点马鲛头肾cDNA文库的构建 | 第27-37页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验材料的处理 | 第28页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第28页 |
| 2.2.3 cDNA双链的合成 | 第28-31页 |
| 2.2.4 cDNA与载体的连接及转化 | 第31-32页 |
| 2.2.5 菌落的筛选及测序 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-35页 |
| 2.3.1 总RNA提取结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 文库的质量鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.3 测序及EST分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 3 两种Wap65基因cDNA克隆及mRNA的表达特征分析 | 第37-56页 |
| 3.1 材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 3.1.4 引物 | 第38-39页 |
| 3.2 方法 | 第39-46页 |
| 3.2.1 两种Wap65 cDNA的克隆 | 第39-45页 |
| 3.2.2 两种Wap65序列的分析 | 第45页 |
| 3.2.3 两种不同Wap65的mRNA的表达特征分析 | 第45-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-54页 |
| 3.3.1 两种Wap65基因cDNA序列分析 | 第46-49页 |
| 3.3.2 两种Wap65基因多序列比对及系统进化树分析 | 第49-50页 |
| 3.3.3 Wap65-1 在不同温度处理下的表达差异 | 第50-52页 |
| 3.3.4 Wap65-2 在不同温度处理下的表达差异 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4 蓝点马鲛两种Wap65的原核表达及蛋白功能研究 | 第56-69页 |
| 4.1 材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第56页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.4 引物 | 第56-57页 |
| 4.2 方法 | 第57-64页 |
| 4.2.1 设计引物 | 第57页 |
| 4.2.2 外源基因原核表达载体的构建 | 第57-59页 |
| 4.2.3 外源基因的原核表达 | 第59-63页 |
| 4.2.4 耐热性实验 | 第63-64页 |
| 4.3 结论 | 第64-67页 |
| 4.3.1 两种Wap65基因的克隆 | 第64页 |
| 4.3.2 两种Wap65基因的菌落检测 | 第64-65页 |
| 4.3.3 蓝点马鲛两种Wap65基因的原核表达及Western blot检测 | 第65-66页 |
| 4.3.4 热耐受性实验分析 | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-69页 |
| 5 总结 | 第69-71页 |
| 5.1 研究总结 | 第69页 |
| 5.2 展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
