摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-27页 |
1.1 植物类病斑突变体的研究进展 | 第13-22页 |
1.1.1 类病斑突变体概述 | 第13页 |
1.1.2 类病斑突变体的来源 | 第13-14页 |
1.1.3 类病斑的发生机制 | 第14-16页 |
1.1.4 类病斑突变体的抗病性 | 第16-17页 |
1.1.5 水稻类病斑基因的克隆 | 第17-22页 |
1.2 eEF1A蛋白的研究进展 | 第22-25页 |
1.2.1 eEF1A参与细胞凋亡过程 | 第23-24页 |
1.2.2 eEF1A参与蛋白降解过程 | 第24页 |
1.2.3 eEF1A参与调控细胞骨架系统 | 第24-25页 |
1.2.4 eEF1A参与细胞核物质输出 | 第25页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-36页 |
2.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 水稻材料 | 第27页 |
2.1.2 病原菌株 | 第27页 |
2.1.3 载体质粒、大肠杆菌、农杆菌和酵母菌株 | 第27页 |
2.1.4 实验试剂 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 田间种植 | 第28页 |
2.2.2 表型及农艺性状考察 | 第28页 |
2.2.3 光照和温度处理 | 第28页 |
2.2.4 花器官形态及花粉活力观察 | 第28页 |
2.2.5 基因定位群体构建 | 第28-29页 |
2.2.6 水稻基因组DNA提取 | 第29页 |
2.2.7 分子标记的开发及检测 | 第29页 |
2.2.8 基因的定位 | 第29页 |
2.2.9 候选基因的序列分析 | 第29-30页 |
2.2.10 互补载体构建 | 第30页 |
2.2.11 过表达载体构建 | 第30-31页 |
2.2.12 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第31页 |
2.2.13 序列比对分析 | 第31页 |
2.2.14 RNA提取和qRT-PCR分析 | 第31页 |
2.2.15 GUS活性的组织化学染色分析 | 第31-32页 |
2.2.16 亚细胞定位 | 第32-33页 |
2.2.17 光合色素含量的测定 | 第33页 |
2.2.18 叶绿体透射电镜观察 | 第33页 |
2.2.19 组织化学分析 | 第33-34页 |
2.2.20 抗病性鉴定 | 第34页 |
2.2.21 基因表达谱分析 | 第34-35页 |
2.2.22 酵母双杂交实验 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-66页 |
3.1 类病斑突变体spl33表型鉴定 | 第36-39页 |
3.1.1 突变体spl33形态观察 | 第36-37页 |
3.1.2 农艺性状调查 | 第37-38页 |
3.1.3 突变体spl33表型受温度和光照影响 | 第38页 |
3.1.4 突变体spl33花器官和花粉育性的观察 | 第38-39页 |
3.2 类病斑突变体SPL33基因定位 | 第39-41页 |
3.2.1 突变体spl33的遗传分析 | 第39-40页 |
3.2.2 突变体SPL33基因的初定位 | 第40页 |
3.2.3 突变体SPL33基因的精细定位 | 第40-41页 |
3.3 SPL33基因的克隆 | 第41-43页 |
3.3.1 SPL33基因的互补验证 | 第41-43页 |
3.3.2 SPL33基因的过表达分析 | 第43页 |
3.4 SPL33基因编码eEF1A-like蛋白 | 第43-45页 |
3.5 SPL33与同源基因LOC_Os04g50870的关系分析 | 第45-48页 |
3.6 SPL33基因表达分析 | 第48-49页 |
3.7 SPL33蛋白的亚细胞定位 | 第49页 |
3.8 SPL33调控活性氧积累和细胞死亡 | 第49-52页 |
3.9 SPL33基因调控叶片早衰 | 第52-54页 |
3.10 SPL33基因调控水稻的防御反应 | 第54-56页 |
3.11 转录组分析 | 第56-62页 |
3.11.1 差异表达基因筛选和分析 | 第56-57页 |
3.11.2 转录组数据验证 | 第57-58页 |
3.11.3 GO富集分析 | 第58-60页 |
3.11.4 KEGG富集分析 | 第60-62页 |
3.12 酵母双杂交实验 | 第62-66页 |
3.12.1 SPL33与 26S蛋白酶复合体亚基在酵母中互作 | 第62-63页 |
3.12.2 SPL33与水稻类病斑RLS1和OsLMS在酵母中互作 | 第63-64页 |
3.12.3 SPL33与其他蛋白在酵母中的互作 | 第64-66页 |
第四章 讨论 | 第66-69页 |
4.1 SPL33编码一个eEF1A-like蛋白 | 第66页 |
4.2 SPL33功能缺失导致细胞死亡和叶片早衰 | 第66-67页 |
4.3 SPL33功能缺失诱导水稻的防御反应 | 第67-69页 |
第五章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
附录 | 第81-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
作者简历 | 第92页 |