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用发根农杆菌介导转化的方法探究木豆耐铝基因的特性

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-8页
1. 前言第11-24页
    1.1 我国南方酸性土壤的分布和特点第11-12页
    1.2 植物在受到铝胁迫时的表现与植物耐铝机制的研究进展第12-16页
        1.2.1 植物受到铝胁迫时的表现第12-13页
        1.2.2 植物的耐铝机制第13-16页
    1.3 通过研究耐铝基因改良植物耐铝性状的研究进展第16-19页
        1.3.1 MATE基因的耐铝机制及其研究进展第16-17页
        1.3.2 STOP1基因耐铝的机制及其研究进展第17-19页
    1.4 木豆的耐铝基因研究的意义第19-20页
    1.5 土壤农杆菌菌介导烟草形成根毛系统的机制与应用第20-23页
    1.6 研究的目的与意义及研究内容第23-24页
2. 材料与方法第24-35页
    2.1 试验材料与主要仪器第24-25页
        2.1.1 材料第24页
        2.1.2 试验仪器第24页
        2.1.3 主要溶液和培养基的配制第24-25页
    2.2 试验方法第25-35页
        2.2.1 烟草的无菌培养第25-26页
        2.2.2 重组质粒电穿孔法转入土壤农杆菌第26页
        2.2.3 重土壤农杆菌菌液PCR验证第26-27页
        2.2.4 土壤农杆菌的细胞培养第27页
        2.2.5 土壤农杆菌侵染烟草叶片第27页
        2.2.6 CcMATE1基因的生物信息学分析第27-28页
        2.2.7 目的基因的亚细胞定位第28页
        2.2.8 GUS染色第28页
        2.2.9 DNA的提取第28-29页
        2.2.10 gDNA的提取第29-30页
        2.2.11 RNA的提取第30-32页
        2.2.12 柠檬酸的定量测定(酶循环法)第32-35页
3. 结果与分析第35-52页
    3.1 土壤农杆菌侵染烟草叶片形成根毛系统第35-38页
    3.2 计算T-DNA与土壤农杆菌中的TI质粒的整和率第38-41页
    3.3 分析铝胁迫下的野生型烟草根状毛和NTSTOP1突变体烟草根状毛的有机酸分泌情况和相关联基因的表达情况第41-44页
    3.4 CcMATE1::sGFP的生物学信息分析第44-47页
    3.5 CcMATE1::SGFP的亚细胞定位第47-48页
    3.6 铝胁迫条件下携带CcMATE1的根状毛的根的生长状况第48-50页
    3.7 NTSTOP1突变体烟草根毛携带CcMATE1后的有机酸分泌第50-52页
4. 结论与讨论第52-57页
    4.1 结论第52-54页
        4.1.1 利用NtSTOP1突变体烟草建立高效的根状毛系统第52页
        4.1.2 T-DNA与土壤农杆菌中的Ti质粒的高整合率第52-53页
        4.1.3 利用NtSTOP1突变体烟草建立高效的根状毛系统第53-54页
        4.1.4 CcMATE1在NtSTOP1突变体烟草根状毛系统中基因功能的探究第54页
    4.2 讨论第54-57页
        4.2.1 本研究创新点第54-55页
        4.2.2 土壤农杆菌介导烟草根状毛的技术优点第55页
        4.2.3 有待进一步研究的问题第55-57页
参考文献第57-64页
致谢第64-65页
攻读学位期间发表论文情况第65页

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