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氧化还原状态对HepG2细胞中脱碘酶功能的影响及其机制

摘要第3-4页
Abstract第4页
论文缩略语中英文对照表第7-8页
1 绪论第8-17页
    1.1 甲状腺激素的生物学作用研究进展第8-10页
        1.1.1 甲状腺激素调节代谢的基本途径第8-9页
        1.1.2 甲状腺激素对肝脏糖脂代谢的调节作用第9-10页
        1.1.3 甲状腺激素对肝脏氧化还原状态的调节作用第10页
    1.2 脱碘酶调节甲状腺激素转化的研究进展第10-14页
        1.2.1 脱碘酶的种类及作用第10-11页
        1.2.2 D1介导的甲状腺激素转化与代谢疾病的关联第11-12页
        1.2.3 D1的转录与活性调节机制第12-14页
    1.3 硫辛酸的生物功能研究进展第14-15页
        1.3.1 硫辛酸简介第14页
        1.3.2 硫辛酸的抗炎及抗氧化作用第14-15页
    1.4 待解决的问题及研究内容第15页
    1.5 立题意义和目的第15-17页
2 实验材料与方法第17-22页
    2.1 材料与仪器第17页
        2.1.1 细胞株和试剂第17页
        2.1.2 设备与耗材第17页
    2.2 实验分组与给药方案第17-18页
        2.2.1 HepG2细胞氧化损伤模型的建立第17页
        2.2.2 脱碘酶活性和T3/rT3测定第17-18页
        2.2.3 甲状腺激素转化与细胞糖代谢的关系第18页
    2.3 实验方法第18-22页
        2.3.1 细胞培养第18页
        2.3.2 噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率第18-19页
        2.3.3 DCFH-DA法测定细胞内ROS水平第19页
        2.3.4 细胞抗氧化物/酶及MDA含量测定第19页
        2.3.5 细胞总RNA的提取及反转录第19页
        2.3.6 实时荧光定量PCR第19-20页
        2.3.7 放射免疫法(RIA)测定细胞D1活性第20页
        2.3.8 酶联免疫吸附(ELISA)测定细胞T3含量第20-21页
        2.3.9 RIA测定细胞rT3含量第21页
        2.3.10 葡萄糖氧化酶法测定细胞葡萄糖吸收水平第21页
        2.3.11 数据统计与分析第21-22页
3 结果与讨论第22-50页
    3.1 T3和T4对氧化应激诱导HepG2细胞的恢复作用探究第22-33页
        3.1.1 HepG2细胞氧化损伤模型的建立第22页
        3.1.2 T3和T4对氧化应激细胞ROS水平的影响第22-24页
        3.1.3 T3和T4对氧化应激细胞存活率的影响第24-25页
        3.1.4 T3和T4对氧化应激细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响第25-28页
        3.1.5 T3和T4对氧化损伤细胞氧化还原状态的影响第28-30页
        3.1.6 T3和T4对氧化损伤细胞抗氧化相关基因mRNA表达的影响第30-32页
        3.1.7 小结第32-33页
    3.2 氧化应激对HepG2细胞D1功能和TH转化的影响第33-40页
        3.2.1 H_2O_2对细胞D1活性和mRNA表达的影响第33页
        3.2.2 H_2O_2对HepG2细胞中T3诱导D1作用的影响第33-35页
        3.2.3 H_2O_2对HepG2细胞中T4诱导D1作用的影响第35-36页
        3.2.4 H_2O_2对HepG2细胞T3和rT3生成的影响第36-38页
        3.2.5 H_2O_2对HepG2细胞TRβ1、TRα1、SRC-1 和炎症通路关键基因表达的影响第38-40页
        3.2.6 小结第40页
    3.3 LA对氧化应激HepG2细胞D1功能和TH转化的调节作用第40-44页
        3.3.1 LA对氧化应激HepG2细胞D1活性和mRNA表达的影响第40-41页
        3.3.2 LA对氧化应激HepG2细胞T3和rT3生成的影响第41-42页
        3.3.3 LA改善氧化应激HepG2细胞D1功能的机制探究第42-44页
        3.3.4 小结第44页
    3.4 LA提高TH转化对氧化应激HepG2细胞糖代谢的影响第44-50页
        3.4.1 TH转化对氧化应激HepG2细胞糖吸收的影响第44-45页
        3.4.2 TH转化对氧化应激HepG2细胞糖代谢相关基因表达的影响第45-46页
        3.4.3 TH转化对氧化应激HepG2细胞胰岛素敏感性的影响第46-47页
        3.4.4 TH转化对氧化应激HepG2细胞胰岛素信号通路表达的影响第47-49页
        3.4.5 小结第49-50页
主要结论与展望第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-59页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第59页

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