| 中文摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 EGF研究进展 | 第10-18页 |
| 1.1.1 EGF概述 | 第10页 |
| 1.1.2 EGF的结构与功能关系 | 第10-12页 |
| 1.1.3 EGF与其受体作用机制 | 第12-14页 |
| 1.1.4 EGF的生物学效应及应用 | 第14-16页 |
| 1.1.5 重组表皮生长因子的分泌表达 | 第16-18页 |
| 1.2 CPPs | 第18-22页 |
| 1.2.1 CPPs的种类与结构特点 | 第19-20页 |
| 1.2.2 CPPs的机制 | 第20页 |
| 1.2.3 CPPs的应用 | 第20-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 仪器与设备 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 pPICZαA-TAT-hEGF真核表达载体的构建 | 第23-28页 |
| 2.2.2 pPICZαA-TAT-hEGF毕赤酵母X-33 表达工程菌的构建与筛选 | 第28-30页 |
| 2.2.3 融合蛋白 TAT-h EGF 在毕赤酵母 X-33 中的诱导表达及鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.4 融合蛋白TAT-hEGF的纯化 | 第32-34页 |
| 2.2.5 生物活性检测 | 第34-36页 |
| 第3章 实验结果 | 第36-47页 |
| 3.1 目的基因片段的获取 | 第36-37页 |
| 3.1.1 pUCK-TAT-hEGF的提取 | 第36页 |
| 3.1.2 TAT-hEGF基因片段的获取 | 第36-37页 |
| 3.1.3 TAT-hEGF基因片段的切胶回收 | 第37页 |
| 3.2 目的基因与载体的连接与鉴定 | 第37-40页 |
| 3.2.1 连接产物质粒的提取 | 第37-38页 |
| 3.2.2 连接产物质粒的酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.2.3 连接产物质粒的测序图谱 | 第38-40页 |
| 3.3 重组酵母转化子的PCR鉴定 | 第40页 |
| 3.4 融合蛋白TAT-hEGF的表达 | 第40-42页 |
| 3.4.1 高表达菌株筛选及诱导最佳时间的确定 | 第40-41页 |
| 3.4.2 毕赤酵母X-33 表达TAT-h EGF最佳pH的确定 | 第41-42页 |
| 3.5 融合蛋白TAT-hEGF的纯化 | 第42-46页 |
| 3.5.1 盐析 | 第42-43页 |
| 3.5.2 凝胶过滤层析结果 | 第43-44页 |
| 3.5.3 离子交换层析结果 | 第44-46页 |
| 3.6 融合蛋白TAT-hEGF的生物活性检测 | 第46-47页 |
| 第4章 讨论 | 第47-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
