水稻条纹病毒(RSV)编码的SP蛋白的结构与功能初探
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一部分 引言 | 第11-25页 |
1 水稻条纹病毒简介 | 第11-16页 |
1.1 水稻条纹病毒的危害及分布 | 第11页 |
1.2 水稻条纹病毒的基本特征 | 第11-13页 |
1.3 水稻条纹病毒的传播途径 | 第13页 |
1.4 水稻条纹病毒编码蛋白简介 | 第13-16页 |
2 植物RNA病毒与植物互作的生物学意义 | 第16-18页 |
2.1 RNA病毒侵染植物的组装方式 | 第16-17页 |
2.2 病毒的致病反应及宿主的防护机制 | 第17-18页 |
3 水稻条纹病毒编码的SP蛋白的结构生物学研究 | 第18页 |
4 结构生物学研究方法 | 第18-19页 |
5 蛋白质表达纯化基本方法 | 第19-25页 |
5.1 亲和纯化 | 第20-21页 |
5.2 离子交换层析分离 | 第21-22页 |
5.3 凝胶过滤层析 | 第22-25页 |
第二部分 研究内容 | 第25-59页 |
1. 实验材料 | 第25-31页 |
1.1 载体和菌株 | 第25页 |
1.2 主要实验仪器 | 第25-26页 |
1.3 主要试剂 | 第26-28页 |
1.4 常用的缓冲溶液和培养基 | 第28-31页 |
2. 实验方法 | 第31-40页 |
2.1 全长基因的扩增 | 第31-33页 |
2.2 载体的提取 | 第33-34页 |
2.3 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第34页 |
2.4 重组质粒的构建 | 第34-35页 |
2.5 转化 | 第35页 |
2.6 小量诱导表达 | 第35页 |
2.7 大量表达目的蛋白 | 第35-36页 |
2.8 目的蛋白的纯化 | 第36-37页 |
2.9 分子排阻层析法蛋白纯化 | 第37-38页 |
2.10 植物全蛋白的提取 | 第38-39页 |
2.11 SP蛋白与互作因子的互作分析 | 第39页 |
2.12 SP蛋白的靶标蛋白筛选 | 第39页 |
2.13 SDS-PAGE银染 | 第39-40页 |
2.14 戊二醛交联实验 | 第40页 |
3. 实验结果 | 第40-59页 |
3.1 蛋白的表达与纯化 | 第40-48页 |
3.2 SP蛋白晶体生长条件的初步筛选 | 第48页 |
3.3 SP蛋白与水稻PsbP蛋白的相互作用 | 第48-53页 |
3.4 SP蛋白与某些短肽相互作用的检测 | 第53-54页 |
3.5 SP蛋白自身互作的检测 | 第54-57页 |
3.6 SP蛋白与水稻蛋白互作因子的筛选 | 第57-59页 |
第三部分 结论和讨论 | 第59-62页 |
1 SP蛋白与水稻PsbP相互作用 | 第59-60页 |
2 SP蛋白自身互作 | 第60页 |
3 SP蛋白与水稻蛋白作用因子的筛选 | 第60-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
第四部分 水稻条纹病毒CP蛋白的表达 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录 附录题名 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |