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二穗短柄草APETALA1/FRUITFULL亚家族及INDETERMINATE1基因功能分析

符号说明第1-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-17页
1 前言第17-31页
   ·植物开花时间调控第17-26页
     ·拟南芥开花时间调控机制第17-23页
       ·光周期途径第17-19页
       ·春化途径第19-20页
       ·自主途径第20-21页
       ·环境温度途径第21-22页
       ·年龄途径第22-23页
     ·温带禾本科作物的开花时间调控第23-26页
       ·春化需求抑制温带禾本科作物在秋季开花第23页
       ·短日照促进花序起始发育的机制第23-24页
       ·冬季的春化作用促进开花第24页
       ·长日照促进花序发育第24-25页
       ·长日照条件下高环境温度促进花序发育第25-26页
   ·APETALA1/FRUITFULL亚家族的基因加倍和功能分化第26-28页
     ·双子叶植物AP1/FUL亚家族的基因加倍和功能分化第26-27页
     ·禾本科植物AP1/FUL亚家族的基因加倍和功能分化第27-28页
   ·禾本科INDETERMINATE1基因的克隆和功能研究第28-29页
   ·温带禾本科模式植物-二穗短柄草第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-31页
2 材料与方法第31-48页
   ·材料第31-32页
     ·植物材料和生长条件第31页
     ·菌株和质粒第31页
     ·酶及生化试剂第31-32页
   ·方法第32-48页
     ·构建转基因植物表达载体第32-36页
       ·植物总RNA的提取第32页
       ·反转录第32-33页
       ·Pfu高保真酶PCR扩增第33页
       ·PCR产物胶回收第33-34页
       ·TA克隆第34页
       ·大肠杆菌感受态的制备第34-35页
       ·大肠杆菌的转化第35页
       ·质粒提取(试剂盒法)第35-36页
       ·DNA序列测定第36页
       ·酶切连接到植物表达载体第36页
     ·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备和转化第36-37页
       ·根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备第36-37页
       ·根癌农杆菌EHA105的转化第37页
     ·二穗短柄草遗传转化第37-42页
       ·诱导愈伤第37-39页
       ·二穗短柄草的侵染第39页
       ·二穗短柄草的共培养第39-40页
       ·二穗短柄草的筛选第40页
       ·二穗短柄草分化第40-41页
       ·二穗短柄草生根第41页
       ·二穗短柄草移栽第41-42页
     ·PCR鉴定转基因苗第42-43页
       ·CTAB法提取基因组第42-43页
       ·PCR检测第43页
     ·荧光定量PCR第43-44页
     ·原位杂交分析第44-48页
       ·材料的固定第44页
       ·材料的包埋第44页
       ·切片第44页
       ·探针标记第44-45页
       ·材料预处理第45-46页
       ·杂交第46页
       ·洗片第46-47页
       ·显色第47-48页
3 结果与分析第48-71页
   ·二穗短柄草AP1/FUL亚家族的功能分析第48-58页
     ·二穗短柄草AP1/FUL亚家族基因进化树分析和氨基酸多序列比对第48-49页
     ·成花转变和花序发育过程中二穗短柄草AP1/FUL基因的表达模式第49页
     ·春化对二穗短柄草AP1/FUL基因表达模式的影响第49-51页
     ·幼穗中二穗短柄草AP1/FUL基因表达的分布第51-53页
     ·二穗短柄草AP1/FUL基因在花器官中的表达模式第53-54页
     ·短柄草AP1/FUL基因的过表达引起早花第54-55页
     ·过表达BdVRN1和BdFUL2引起严重的花器官发育异常第55页
     ·酵母双杂交分析二穗短柄草AP1/FUL蛋白和SEP-like蛋白的互作第55-58页
   ·二穗短柄草BdID1基因的功能分析第58-71页
     ·二穗短柄草中的IDD转录因子家族和ID1同源蛋白第58-59页
     ·BdID1定位于细胞核中第59-61页
     ·35S::BdID1能使水稻rid1突变体恢复抽穗第61页
     ·BdID1在分裂和生长旺盛的部位表达较高第61-62页
     ·光周期和春化作用对BdID1表达的影响第62-63页
     ·短柄草中过表达BdID1和小麦ID1导致早花和矮小表型第63-64页
     ·用 35S启动子过表达BdID1的表型分析第64-65页
     ·35S::BdID1植株对日照长度敏感第65-66页
     ·用CRISPR/Cas9敲除BdID1基因第66-68页
     ·Bdid1-2 突变体中开花调控相关基因的表达量变化第68-69页
     ·Bdid1-2 突变体对春化敏感第69-71页
4 讨论第71-74页
5 结论第74-75页
参考文献第75-94页
致谢第94-95页
攻读学位期间发表论文情况第95页

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