| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-32页 |
| ·髓鞘与腓骨肌萎缩症 | 第14-15页 |
| ·施万细胞 | 第15-16页 |
| ·Periaxin蛋白 | 第16-19页 |
| ·Ezrin蛋白(埃兹蛋白) | 第19-24页 |
| ·Ezrin蛋白的结构 | 第19-21页 |
| ·Ezrin蛋白的表达与分布 | 第21页 |
| ·Ezrin蛋白的活化 | 第21-22页 |
| ·Ezrin蛋白的功能 | 第22-24页 |
| ·研究目的及意义 | 第24页 |
| 参考文献 | 第24-32页 |
| 第二章 L-periaxin蛋白与Ezrin蛋白相互作用区域分析 | 第32-54页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·质粒及细胞系 | 第32-33页 |
| ·药物及试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·载体构建 | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第34页 |
| ·细胞爬片 | 第34页 |
| ·转染 | 第34页 |
| ·免疫荧光染色 | 第34-35页 |
| ·双分子荧光互补 | 第35-37页 |
| ·荧光标签蛋白共定位 | 第37页 |
| ·免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| ·GST-Pull down | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-51页 |
| ·L-periaxin与Ezrin在RSC96细胞内荧光共定位 | 第38-39页 |
| ·L-periaxin和不同的截短型Ezrin蛋白之间的互作分析 | 第39-41页 |
| ·Ezrin和不同的截短型L-periaxin蛋白之间的互作分析 | 第41-43页 |
| ·分子荧光互补分析L-periaxin与Ezrin的头尾间相互作用 | 第43-48页 |
| ·L-periaxin NLS结构域与Ezrin FERM结构域间的相互作用分析 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第三章 Ezrin T567磷酸化对其与L-periaxin相互作用的影响 | 第54-62页 |
| ·前言 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·质粒及细胞系 | 第54页 |
| ·药物及试剂 | 第54页 |
| ·实验仪器 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·细胞培养 | 第55页 |
| ·细胞爬片 | 第55页 |
| ·免疫荧光检测RSC96细胞内内源Periaxin与Flag-Ezrin定位 | 第55-56页 |
| ·荧光标签蛋白观察Ezrin细胞定位 | 第56页 |
| ·免疫共沉淀 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-59页 |
| ·外源Ezrin(1-585)(WT,T567/E,T567/A)在RSC96细胞中的定位 | 第56-57页 |
| ·免疫荧光检测Ezrin(1-585)(WT,T567/E,T567/A)及内源L-periaxin在RSC96细胞中的定位 | 第57-58页 |
| ·免疫共沉淀实验检测Ezrin(1-585)(T567/E,T567/A)与L-periaxin(1368-1461)之间的相互作用 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 第四章 利用TALEN技术建立敲除L-periaxin基因的RSC96细胞系 | 第62-71页 |
| ·前言 | 第62页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·质粒及细胞系 | 第62-63页 |
| ·药物及试剂 | 第63页 |
| ·实验仪器 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·TALEN质粒的构建与鉴定 | 第63-64页 |
| ·细胞培养 | 第64页 |
| ·转染 | 第64页 |
| ·药物筛选 | 第64页 |
| ·细胞基因组的提取 | 第64页 |
| ·单克隆筛选 | 第64页 |
| ·实验结果 | 第64-69页 |
| ·TALEN质粒左右臂识别序列设计 | 第64-65页 |
| ·TALEN质粒鉴定 | 第65页 |
| ·TALEN质粒活性检测 | 第65-68页 |
| ·TALEN法敲除RSC96细胞内L-periaxin | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简况及联系方式 | 第73-74页 |
| 承诺书 | 第74-75页 |
