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对虾WSSV和IHHNV病毒重组酶聚合酶扩增(RPA)快速检测方法的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-30页
 1 对虾病毒性疾病研究进展第11-13页
   ·引言第11页
   ·对虾主要病毒性疾病病源特性第11-13页
 2 对虾白斑病毒(WSSV)的研究概况第13-18页
   ·引言第13页
   ·WSSV的命名及分类第13-14页
   ·WSSV的形态特征及理化特性第14-15页
   ·WSSV的蛋白研究第15-16页
   ·WSSV的传播途径第16页
   ·WSSV检测技术的研究进展第16-18页
     ·WSSV的免疫诊断方法第17页
     ·WSSV的分子诊断方法第17-18页
 3 传染性皮下及造血组织坏死性病毒(IHHNV)的研究概况第18-22页
   ·引言第18-19页
   ·IHHN V的形态特征及分类第19页
   ·IHHN V的基因组研究第19-20页
   ·IHHN V的传播途径及防护第20-21页
   ·IHHN V检测技术的研究进展第21-22页
 4 重组酶聚合酶等温扩增核酸法技术的研究进展第22-28页
   ·RPA技术的研究应用第25页
   ·RPA技术用于病毒的检测第25-26页
   ·RPA技术用于细菌的检测第26-28页
 5 研究内容及目的意义第28-30页
   ·研究内容概述第28页
   ·研究目的及意义第28-30页
第二章 对虾白班病毒的重组酶聚合酶等温扩增技术检测系统(WSSV-RPA)的建立以及验证第30-44页
   ·材料与方法第30-36页
     ·材料第30页
     ·仪器与设备第30页
     ·方法第30-36页
       ·样品处理及基因组DNA制备第30-31页
         ·提取肝胰腺DNA第30-31页
         ·提取虾肌肉组织DNA第31页
       ·荧光定量PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)第31-34页
         ·构建质粒标准品第31-33页
         ·荧光定量PCR检测WSSV,确立检测的灵敏性、特异性和可靠性第33-34页
       ·重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)检测对虾白斑病毒(WSSV)第34-35页
         ·构建质粒标准品第34页
         ·real-time RPA引物探针的设计第34页
         ·real-time RPA检测WSSV,确立检测的灵敏性、特异性和可靠性第34-35页
       ·WSSV-q PCR和WSSV-RPA检测系统的样品验证第35-36页
         ·WSSV-q PCR检测系统的样品验证第35-36页
         ·WSSV-RPA检测系统的样品验证第36页
   ·结果与分析第36-42页
     ·荧光定量PCR检测WSSV第36-38页
     ·real-time RPA检测WSSV第38-40页
       ·RPA-WSSV检测灵敏度的确定第38-40页
       ·RPA-WSSV检测特异性第40页
     ·q PCR-WSSV与RPA-WSSV检测体系对样品的检测结果与分析第40-42页
   ·讨论第42-43页
     ·VP28基因作为WSSV检测的靶标基因第42页
     ·比较q PCR与RPA技术的灵敏性、反应时间和反应温度第42-43页
   ·结论第43-44页
第三章 传染性皮下及造血组织坏死病毒的重组酶聚合酶等温扩增技术检测系统(IHHNV-RPA)的建立以及验证第44-55页
   ·材料与方法第44-47页
     ·材料第44页
     ·仪器与设备第44页
     ·方法第44-47页
       ·样品处理及基因组DNA制备第44页
         ·提取肝胰腺DNA第44页
         ·提取虾肌肉组织DNA第44页
       ·荧光定量PCR检测传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)第44-46页
         ·构建质粒标准品第44-45页
         ·荧光定量PCR检测IHHNV,确立检测的灵敏性、特异性和可靠性第45-46页
       ·重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)检测传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)第46-47页
         ·构建质粒标准品第46页
         ·real-time RPA引物探针的设计第46页
         ·real-time RPA检测IHHNV,确立检测的灵敏性、特异性和可靠性第46-47页
       ·IHHNV-q PCR和IHHNV-RPA检测系统的样品验证第47页
         ·IHHNV-q PCR检测系统的样品验证第47页
         ·IHHNV-RPA检测系统的样品验证第47页
   ·结果与分析第47-52页
     ·荧光定量PCR检测IHHNV第47-49页
     ·real-time RPA检测IHHNV第49-51页
       ·RPA-IHHN V检测灵敏度的确定第49-51页
     ·q PCR-IHHNV与RPA-IHHNV检测体系对样品的检测结果与分析第51-52页
   ·讨论第52-54页
     ·RPA引物探针的设计原理推断第52-53页
     ·IHHN V片段检测的假阳性第53页
     ·RPA技术的优越性第53-54页
   ·结论第54-55页
第四章 全文总结、论文的创新点与不足第55-57页
   ·全文总结第55-56页
   ·论文的创新点第56页
   ·论文的不足和展望第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63页

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