摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一部分 文献综述抗菌肽在抗肿瘤中的应用进展 | 第11-26页 |
摘要 | 第11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 传统抗肿瘤药物的缺陷 | 第12-13页 |
·毒副作用 | 第13页 |
·耐药性 | 第13页 |
2 抗菌肽特异性的选择肿瘤细胞和非肿瘤细胞 | 第13-14页 |
3 抗菌肽抗肿瘤机制 | 第14-18页 |
·膜相关的分子机制 | 第14-16页 |
·非膜相关的分子机制 | 第16-18页 |
4 结论和展望 | 第18页 |
参考文献 | 第18-26页 |
第二部分 新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)对人胃癌细胞的抑制作用研究 | 第26-87页 |
第一章 新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)体外抑制人胃癌BGC823细胞的增殖和诱导其凋亡 | 第26-49页 |
摘要 | 第26-27页 |
Abstract | 第27-29页 |
1 材料与方法 | 第29-34页 |
·抗菌肽CecropinXJ的制备 | 第29页 |
·细胞培养 | 第29页 |
·试剂与仪器 | 第29-30页 |
·细胞存活实验 | 第30页 |
·软琼脂集落形成实验 | 第30-31页 |
·LDH释放率检测Cecropin XJ细胞毒性 | 第31页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期 | 第31页 |
·Hochest 33258染色和透射电镜观察细胞形态变化 | 第31-32页 |
·测定细胞内活性氧的含量和线粒体膜电位的变化 | 第32页 |
·q RT-PCR检测Bax、Bcl-2、caspase-3/8/9、细胞色素c mRNA的表达 | 第32-33页 |
·蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达 | 第33页 |
·caspase-3、caspase-8 和caspase-9 活性的检测 | 第33-34页 |
·统计学处理 | 第34页 |
2 结果 | 第34-43页 |
·MTT法检测CecropinXJ对BGC823细胞和GES1细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
·Cecropin XJ对BGC823细胞集落形成的影响 | 第35-36页 |
·细胞乳酸脱氢酶(LDH)含量变化 | 第36页 |
·流式细胞仪检测BGC823细胞周期的分布 | 第36-37页 |
·Annexin-V FITC/PI双染检测BGC823细胞的凋亡 | 第37-38页 |
·透射电镜观察CecropinXJ对BGC823细胞超微结构的影响 | 第38-39页 |
·Cecropin XJ诱导BGC823细胞核的形态学变化 | 第39页 |
·BGC823细胞内活性氧含量的检测 | 第39-40页 |
·BGC823细胞线粒体膜电位(Δψm)的变化 | 第40-41页 |
·Cecropin XJ对BGC823细胞中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
·Cecropin XJ调节caspase酶的活性 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
第二章 新疆家蚕抗菌肽(Cecropin XJ)单独和与 LY294002 联合 | 第49-62页 |
摘要 | 第49页 |
Abstract | 第49-51页 |
1 材料与方法 | 第51-52页 |
·抗菌肽CecropinXJ和细胞系 | 第51页 |
·试剂 | 第51页 |
·细胞培养及分组 | 第51页 |
·MTT法检测细胞增殖 | 第51-52页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第52页 |
·Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达水平 | 第52页 |
·统计学处理 | 第52页 |
2 结果 | 第52-55页 |
·Cecropin XJ对BGC823细胞中Akt磷酸化水平的影响 | 第53页 |
·不同浓度CecropinXJ和LY294002单独及联合用药对细胞增殖的抑制活性 | 第53-54页 |
·LY294002增加CecropinXJ介导的细胞凋亡 | 第54-55页 |
·Western blot检测p-Bad和Bad表达水平 | 第55页 |
·Cecropin XJ对Bcl-2 家族、caspase-3 和细胞色素c表达的影响 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
第三章 新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)对人胃癌BGC823细胞裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤血管生成的影响 | 第62-75页 |
摘要 | 第62-63页 |
Abstract | 第63-64页 |
1 材料与方法 | 第64-67页 |
·细胞系与实验动物 | 第64页 |
·荷瘤小鼠模型的建立 | 第64-65页 |
·实验动物分组和给药方法 | 第65页 |
·荷瘤小鼠体重、瘤重和肿瘤体积的检测 | 第65页 |
·H&E stainning病理检测 | 第65-66页 |
·TUNEL实验 | 第66页 |
·q RT-PCR检测基因表达水平 | 第66-67页 |
·Western blot | 第67页 |
·免疫组织化学染色 | 第67页 |
·统计学处理 | 第67页 |
2 结果 | 第67-71页 |
·荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长 | 第67-68页 |
·Cecropin XJ诱导肿瘤细胞的凋亡 | 第68-69页 |
·肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达 | 第69页 |
·肿瘤组织中血管生成相关蛋白的表达 | 第69-70页 |
·BGC823细胞中血管生长因子的表达 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-75页 |
第四章 新疆家蚕抗菌肽(CecropinXJ)对人胃癌BGC823细胞恶性腹水瘤生长的影响 | 第75-87页 |
摘要 | 第75页 |
Abstract | 第75-77页 |
1 材料与方法 | 第77-79页 |
·细胞系 | 第77页 |
·试验动物及主要试剂 | 第77页 |
·小鼠腹腔水瘤模型的建立 | 第77页 |
·试验动物分组和给药方法 | 第77页 |
·观测指标和检测方法 | 第77-79页 |
·统计学处理 | 第79页 |
2 结果 | 第79-83页 |
·小鼠腹水肿瘤的生长 | 第79-80页 |
·各组荷瘤小鼠腹水的生成情况 | 第80页 |
·各组荷瘤小鼠腹水中肿瘤细胞的凋亡率 | 第80-81页 |
·各组小鼠的血常规 | 第81-82页 |
·各组小鼠的肝功能和肾功能 | 第82页 |
·各组小鼠腹腔脏器的病理检测 | 第82-83页 |
·各组小鼠的肝/体比、脾脏指数和胸腺指数 | 第83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-87页 |
第三部分 结论与展望 | 第87-89页 |
附录1 英文缩略语 | 第89-90页 |
附录2 主要实验仪器 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
个人简介 | 第92-93页 |