| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号及缩略语说明 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-20页 |
| 1 引言 | 第12页 |
| 2 西维因概述 | 第12-14页 |
| ·西维因的性质及来源 | 第12-13页 |
| ·西维因的毒性 | 第13-14页 |
| 3 环境内分泌污染物的干扰效应 | 第14-15页 |
| 4 西维因的环境内分泌干扰效应 | 第15页 |
| 5 西维因内分泌干扰效应的非受体介导作用机制 | 第15-18页 |
| ·环境内分泌干扰效应的两种作用机制 | 第15-16页 |
| ·类固醇激素的合成途径 | 第16-17页 |
| ·西维因对类固醇激素合成途径的影响 | 第17-18页 |
| 6 单细胞凝胶电泳(SCGE)概述 | 第18-19页 |
| 7 本课题的立题依据及研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 西维因暴露对罗非鱼内分泌相关酶活性的影响 | 第20-32页 |
| 1 前言 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-22页 |
| ·实验材料与试剂 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验设计 | 第21页 |
| ·ELISA法测定内分泌相关酶活性 | 第21页 |
| ·血清中黄体生成素(LH)水平和卵泡刺激素(FSH)水平的测定 | 第21页 |
| ·血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)水平和甲状腺激素(T4)水平的测定 | 第21页 |
| ·血清中雌二醇(E2)水平和睾酮(T)水平的测定 | 第21页 |
| ·血清中卵黄蛋白原(VTG)水平和皮质醇(COR)水平的测定 | 第21页 |
| ·统计分析 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-28页 |
| ·LH和FSH水平变化趋势 | 第22-24页 |
| ·T3和T4水平变化趋势 | 第24-25页 |
| ·E2和T水平变化趋势 | 第25-27页 |
| ·VTG和COR水平变化趋势 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-31页 |
| ·西维因暴露与下丘脑-垂体-性腺轴相关酶水平变化的相关性 | 第28-30页 |
| ·西维因暴露与下丘脑-垂体-甲状腺轴相关酶水平变化的相关性 | 第30-31页 |
| 5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 西维因对罗非鱼内分泌相关基因表达的影响 | 第32-50页 |
| 前言 | 第32页 |
| 第一节 西维因暴露对罗非鱼性腺组织中相关基因的表达影响 | 第32-44页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·实验材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验设计 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·样品采集 | 第33页 |
| ·总RNA提取 | 第33页 |
| ·RNA浓度与完整性的检测 | 第33-34页 |
| ·反转录 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
| ·RT-PCR的反应条件 | 第34页 |
| ·RT-PCR的计算法则 | 第34-35页 |
| ·统计分析 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中3β-HSD1的表达 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中11β-HSD2的表达 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中17β-HSD8的表达 | 第37页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中20β-HSD的表达 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中CYP19a的表达 | 第39页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼精巢组织中CYP19b的表达 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-44页 |
| 第二节 西维因暴露对罗非鱼肝脏组织中相关基因表达的影响 | 第44-50页 |
| 1 材料与方法 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼肝脏组织中3β-HSD1的表达 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼肝脏组织中11β-HSD2的表达 | 第45页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼肝脏组织中17β-HSD8的表达 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼肝脏组织中20β-HSD的表达 | 第46页 |
| ·RT-PCR检测罗非鱼肝脏组织中CYP19a的表达 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48页 |
| 4 小结 | 第48-50页 |
| 第四章 西维因对罗非鱼精巢细胞DNA损伤的影响 | 第50-60页 |
| 1 前言 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·实验设计 | 第51页 |
| ·彗星试验 | 第51-52页 |
| ·制备单细胞悬浮液 | 第51页 |
| ·制片 | 第51页 |
| ·细胞裂解 | 第51页 |
| ·DNA解旋 | 第51-52页 |
| ·电泳 | 第52页 |
| ·中和 | 第52页 |
| ·固定 | 第52页 |
| ·染色 | 第52页 |
| ·统计分析 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-58页 |
| ·精巢细胞DNA受损状况 | 第53-55页 |
| ·西维因对精巢细胞DNA的损伤作用 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| 全文结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 科研情况 | 第71页 |
