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小麦TaNCED3基因克隆及功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-14页
   ·脱落酸的发现、生理功能及合成第8-10页
     ·ABA的发现第8页
     ·脱落酸的生理作用第8-9页
     ·ABA的生物合成第9-10页
   ·高等植物NCED基因的研究第10-12页
     ·NCED基因研究进展第10-11页
     ·模式植物拟南芥的NCED基因第11页
     ·NCED基因功能的研究第11-12页
   ·本研究的目的及意义第12-13页
   ·本研究的技术路线第13-14页
2 TaNCED3基因的克隆及序列分析第14-27页
   ·实验材料第14-15页
     ·植物材料第14页
     ·菌株和载体第14页
     ·实验试剂第14页
     ·仪器设备第14-15页
   ·实验方法第15-20页
     ·小麦Total RNA提取第15页
     ·小麦Total RNA的纯化第15-16页
     ·反转录反应第16-17页
     ·小麦TaNCED3基因的PCR扩增第17页
     ·PCR扩增产物的纯化和回收第17-18页
     ·TaNCED3基因的克隆第18-20页
     ·小麦TaNCED3基因的序列分析第20页
   ·结果与分析第20-25页
     ·小麦Total RNA提取第20-21页
     ·TaNCED3基因的克隆第21-22页
     ·TaNCED3基因序列特征第22-24页
     ·小麦TaNCED3蛋白与其他植物NCED蛋白的氨基酸序列比对第24-25页
   ·讨论第25-27页
3 TaNCED3基因表达特性分析第27-33页
   ·实验材料第27页
     ·植物材料第27页
     ·实验试剂第27页
     ·仪器设备第27页
   ·方法第27-30页
     ·材料处理第27-28页
     ·Total RNA提取及检测第28页
     ·反转录反应第28-29页
     ·荧光实时定量PCR反应第29-30页
   ·结果与分析第30-32页
     ·小麦胁迫处理样品Total RNA提取第30-31页
     ·胁迫条件下TaNCED3基因在小麦叶片中的表达第31-32页
   ·讨论第32-33页
4 TaNCED3基因转化拟南芥及阳性植株的筛选第33-43页
   ·实验材料第33-34页
     ·植物材料第33页
     ·菌株与载体第33页
     ·实验试剂第33页
     ·设备仪器第33-34页
   ·实验方法第34-39页
     ·植物表达载体构建第34-36页
     ·重组质粒转化农杆菌第36-37页
     ·拟南芥转化第37-38页
     ·阳性植株筛选及PCR鉴定第38-39页
   ·结果与分析第39-42页
     ·植物表达载体构建第39-40页
     ·转基因拟南芥的筛选第40-41页
     ·转基因拟南芥的鉴定第41-42页
   ·讨论第42-43页
5 转基因拟南芥生理指标测定第43-49页
   ·实验材料第43-44页
     ·植物材料第43页
     ·实验试剂第43页
     ·设备仪器第43-44页
   ·方法第44-45页
     ·ABA含量测定第44页
     ·气孔导度和失水率测定第44-45页
     ·脯氨酸含量测定第45页
   ·结果与分析第45-48页
     ·ABA含量测定第45-46页
     ·气孔导度和失水率的测定第46-47页
     ·脯氨酸含量测定第47-48页
   ·讨论第48-49页
6 转基因拟南芥抗旱鉴定及种子萌发率测定第49-54页
   ·实验材料第49页
     ·植物材料第49页
     ·实验试剂第49页
     ·设备仪器第49页
   ·方法第49-50页
     ·转基因拟南芥耐旱性分析第49-50页
     ·种子萌发率分析第50页
   ·结果与分析第50-52页
     ·转基因拟南芥的耐旱性分析第50-51页
     ·种子萌发分析第51-52页
   ·讨论第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-59页
附录A :培养基配方第59-61页
附录B :DNA Makers第61-62页
附录C :载体图谱第62-63页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第63-64页
致谢第64页

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