中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-34页 |
·类胡萝卜素 | 第10-14页 |
·类胡萝卜素的结构 | 第10页 |
·类胡萝卜素的功能 | 第10-14页 |
·虾青素 | 第14-20页 |
·虾青素的性质、应用及经济价值 | 第14-16页 |
·虾青素的生产 | 第16-20页 |
·天然虾青素与人工合成虾青素的对比 | 第20页 |
·法夫酵母 | 第20-26页 |
·法夫酵母的生物学特征 | 第20-22页 |
·红法夫酵母虾青素生物合成途径、相关酶及分子生物学研究 | 第22-26页 |
·法夫酵母发酵生产虾青素研究现状 | 第26-32页 |
·高产虾青素法夫酵母菌株的选育与菌种改良 | 第26-29页 |
·红法夫酵母发酵条件研究 | 第29-32页 |
·本研究的目的意义、研究内容与技术路线 | 第32-34页 |
·研究的目的意义 | 第32页 |
·研究内容 | 第32-33页 |
·技术路线 | 第33-34页 |
第二章 材料与方法 | 第34-45页 |
·实验材料与设备 | 第34-37页 |
·质粒和菌株 | 第34页 |
·主要实验仪器 | 第34-35页 |
·实验所用培养基 | 第35-36页 |
·实验所用主要试剂 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-45页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第37页 |
·质粒热击转化大肠杆菌 | 第37页 |
·质粒电击转化大肠杆菌 | 第37-38页 |
·质粒DNA 的小量提取 | 第38页 |
·质粒DNA 的大量提取 | 第38-39页 |
·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
·琼脂糖凝胶DNA 回收 | 第39页 |
·PCR 扩增反应 | 第39-40页 |
·PCR 产物纯化 | 第40页 |
·DNA 的限制酶消化 | 第40-41页 |
·DNA 的连接反应 | 第41页 |
·法夫酵母基因组DNA 的快速分离 | 第41-42页 |
·法夫酵母转化方法 | 第42页 |
·酵母生长曲线的测定 | 第42-43页 |
·酵母类胡萝卜素的提取 | 第43页 |
·类胡萝卜素含量的测定方法 | 第43页 |
·酵母类胡萝卜素的HPLC 检测 | 第43-44页 |
·薄层层析法分离检测玉米黄素 | 第44-45页 |
第三章 法夫酵母表达载体构建 | 第45-59页 |
·构建法夫酵母(X. dendrorhous)表达载体的材料 | 第45页 |
·法夫酵母(X. dendrorhous)表达载体的构建 | 第45-58页 |
·法夫酵母表达载体 pPRcDNA1bkt 的构建 | 第45-47页 |
·法夫酵母表达载体pPR2TNHbkt 的构建 | 第47-49页 |
·法夫酵母表达载体pPRcDNA1crtZ 的构建 | 第49-52页 |
·法夫酵母表达载体pPR2TNHasy 的构建 | 第52-55页 |
·法夫酵母表达载体pPRcDNA1crtZ-bkt 的构建 | 第55-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第四章 法夫酵母电击转化方法的优化 | 第59-65页 |
·法夫酵母电击转化方法所使用的材料 | 第59页 |
·法夫酵母电击转化方法的优化 | 第59-64页 |
·法夫酵母表达载体pPR2TNHasy 质粒DNA 的验证和准备 | 第59-61页 |
·影响法夫酵母电击转化的几个重要参数优化 | 第61-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第五章 单基因转化法夫酵母产物分析及发酵条件优化 | 第65-87页 |
·pPRcDNA1bkt,pPR2TNHbkt 和 pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母 pr-1-104 突变株及其产物分析 | 第65-75页 |
·pPRcDNA1bkt 转化法夫酵母及其产物分析 | 第65-69页 |
·pPR2TNHbkt 转化法夫酵母及其产物分析 | 第69-72页 |
·pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母及其产物分析 | 第72-75页 |
·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的产物优化 | 第75-81页 |
·pPR2TNHbkt 转基因法夫酵母产物优化 | 第75-79页 |
·pPRcDNA1crtZ 转基因法夫酵母产物优化 | 第79-81页 |
·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的培养基优化 | 第81-85页 |
·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的碳源优化 | 第81-83页 |
·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的氮源优化 | 第83-85页 |
·小结 | 第85-87页 |
第六章 多基因转化法夫酵母产物分析及发酵条件优化 | 第87-103页 |
·双基因共转化法夫酵母突变体 CBS6938 pr-1-104 | 第87-98页 |
·crtz 转化高产角黄质法夫酵母菌株 | 第87-90页 |
·bkt 转化高产玉米黄质的法夫酵母菌株 | 第90-93页 |
·pPRcDNA1crtZ+bkt 转化法夫酵母β-胡萝卜素突变株 | 第93-96页 |
·抗生素压力筛选提高转化虾青素含量 | 第96-98页 |
·优化培养条件对于法夫酵母双基因转化子的影响 | 第98-101页 |
·培养基优化对于法夫酵母双基因转化子的影响 | 第98-100页 |
·培养条件优化 | 第100-101页 |
·小结 | 第101-103页 |
第七章 讨论与展望 | 第103-108页 |
·全文结论与讨论 | 第103-106页 |
·法夫酵母虾青素生产研究展望 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-118页 |
发表论文和科研情况说明 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |