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转基因法夫酵母高产3S,3S虾青素的研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 文献综述第10-34页
   ·类胡萝卜素第10-14页
     ·类胡萝卜素的结构第10页
     ·类胡萝卜素的功能第10-14页
   ·虾青素第14-20页
     ·虾青素的性质、应用及经济价值第14-16页
     ·虾青素的生产第16-20页
     ·天然虾青素与人工合成虾青素的对比第20页
   ·法夫酵母第20-26页
     ·法夫酵母的生物学特征第20-22页
     ·红法夫酵母虾青素生物合成途径、相关酶及分子生物学研究第22-26页
   ·法夫酵母发酵生产虾青素研究现状第26-32页
     ·高产虾青素法夫酵母菌株的选育与菌种改良第26-29页
     ·红法夫酵母发酵条件研究第29-32页
   ·本研究的目的意义、研究内容与技术路线第32-34页
     ·研究的目的意义第32页
     ·研究内容第32-33页
     ·技术路线第33-34页
第二章 材料与方法第34-45页
   ·实验材料与设备第34-37页
     ·质粒和菌株第34页
     ·主要实验仪器第34-35页
     ·实验所用培养基第35-36页
     ·实验所用主要试剂第36-37页
   ·实验方法第37-45页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第37页
     ·质粒热击转化大肠杆菌第37页
     ·质粒电击转化大肠杆菌第37-38页
     ·质粒DNA 的小量提取第38页
     ·质粒DNA 的大量提取第38-39页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳第39页
     ·琼脂糖凝胶DNA 回收第39页
     ·PCR 扩增反应第39-40页
     ·PCR 产物纯化第40页
     ·DNA 的限制酶消化第40-41页
     ·DNA 的连接反应第41页
     ·法夫酵母基因组DNA 的快速分离第41-42页
     ·法夫酵母转化方法第42页
     ·酵母生长曲线的测定第42-43页
     ·酵母类胡萝卜素的提取第43页
     ·类胡萝卜素含量的测定方法第43页
     ·酵母类胡萝卜素的HPLC 检测第43-44页
     ·薄层层析法分离检测玉米黄素第44-45页
第三章 法夫酵母表达载体构建第45-59页
   ·构建法夫酵母(X. dendrorhous)表达载体的材料第45页
   ·法夫酵母(X. dendrorhous)表达载体的构建第45-58页
     ·法夫酵母表达载体 pPRcDNA1bkt 的构建第45-47页
     ·法夫酵母表达载体pPR2TNHbkt 的构建第47-49页
     ·法夫酵母表达载体pPRcDNA1crtZ 的构建第49-52页
     ·法夫酵母表达载体pPR2TNHasy 的构建第52-55页
     ·法夫酵母表达载体pPRcDNA1crtZ-bkt 的构建第55-58页
   ·小结第58-59页
第四章 法夫酵母电击转化方法的优化第59-65页
   ·法夫酵母电击转化方法所使用的材料第59页
   ·法夫酵母电击转化方法的优化第59-64页
     ·法夫酵母表达载体pPR2TNHasy 质粒DNA 的验证和准备第59-61页
     ·影响法夫酵母电击转化的几个重要参数优化第61-64页
   ·小结第64-65页
第五章 单基因转化法夫酵母产物分析及发酵条件优化第65-87页
   ·pPRcDNA1bkt,pPR2TNHbkt 和 pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母 pr-1-104 突变株及其产物分析第65-75页
     ·pPRcDNA1bkt 转化法夫酵母及其产物分析第65-69页
     ·pPR2TNHbkt 转化法夫酵母及其产物分析第69-72页
     ·pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母及其产物分析第72-75页
   ·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的产物优化第75-81页
     ·pPR2TNHbkt 转基因法夫酵母产物优化第75-79页
     ·pPRcDNA1crtZ 转基因法夫酵母产物优化第79-81页
   ·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的培养基优化第81-85页
     ·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的碳源优化第81-83页
     ·pPR2TNHbkt 和pPRcDNA1crtZ 转化法夫酵母pr-1-104 转化子的氮源优化第83-85页
   ·小结第85-87页
第六章 多基因转化法夫酵母产物分析及发酵条件优化第87-103页
   ·双基因共转化法夫酵母突变体 CBS6938 pr-1-104第87-98页
     ·crtz 转化高产角黄质法夫酵母菌株第87-90页
     ·bkt 转化高产玉米黄质的法夫酵母菌株第90-93页
       ·pPRcDNA1crtZ+bkt 转化法夫酵母β-胡萝卜素突变株第93-96页
       ·抗生素压力筛选提高转化虾青素含量第96-98页
   ·优化培养条件对于法夫酵母双基因转化子的影响第98-101页
     ·培养基优化对于法夫酵母双基因转化子的影响第98-100页
     ·培养条件优化第100-101页
   ·小结第101-103页
第七章 讨论与展望第103-108页
   ·全文结论与讨论第103-106页
   ·法夫酵母虾青素生产研究展望第106-108页
参考文献第108-118页
发表论文和科研情况说明第118-119页
致谢第119页

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