摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
·生物催化 | 第11页 |
·生物催化合成的新手性药物 | 第11-13页 |
·6-羟基丁螺环酮(6-hydroxybuspirone) | 第11-12页 |
·阿巴卡韦(abacavir) | 第12页 |
·阿托伐他汀钙 | 第12-13页 |
·生物催化手性药物的方式和方法 | 第13-16页 |
·生物催化的方式 | 第13-15页 |
·生物催化的方法 | 第15-16页 |
·生物催化为实现工业化应用待解决的问题 | 第16-17页 |
·高产酶菌株的筛选 | 第16-17页 |
·改进生物催化工艺 | 第17页 |
·他汀类药物研究进展 | 第17-18页 |
·辛伐他汀 | 第17页 |
·氟伐他汀 | 第17页 |
·阿托伐他汀 | 第17-18页 |
·本课题的研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 DERA 酶基因的克隆、表达及结构生物学分析 | 第19-35页 |
·材料与方法 | 第19-27页 |
·材料 | 第19-20页 |
·Bacillus subtilis.UD-20 的液体培养及总 DNA 的提取 | 第20页 |
·DERA 酶基因片段的克隆 | 第20-22页 |
·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 蛋白分子高级结构的预测 | 第22-23页 |
·DERA 酶基因与表达载体 pET-32a 连接及基因工程菌的构建 | 第23-25页 |
·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因在 E.coli Rosetta 中的诱导表达 | 第25-26页 |
·重组 DERA 酶的 SDS-PAGE 电泳分析 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-33页 |
·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因片段的克隆 | 第27页 |
·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因的序列分析 | 第27-31页 |
·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 蛋白三维结构分析 | 第31页 |
·原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第三章 重组 DERA 酶发酵条件的优化及酶学性质研究 | 第35-47页 |
·材料和方法 | 第35-39页 |
·试验材料 | 第35页 |
·试剂配制 | 第35-36页 |
·重组 DERA 酶发酵条件的单因素优化试验 | 第36-37页 |
·响应面优化基因工程菌的发酵条件 | 第37-38页 |
·重组 DERA 酶学性质研究 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-44页 |
·基因工程菌产酶培养条件的单因素优化实验 | 第39-40页 |
·响应面优化基因工程菌产酶的条件 | 第40-42页 |
·重组 DERA 酶的酶学特性 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
第四章 阿托伐他汀钙手性中间体的全细胞催化及检测 | 第47-53页 |
·材料和方法 | 第47-48页 |
·试验材料 | 第47页 |
·试剂配制 | 第47-48页 |
·基因工程菌的获得与全细胞催化 | 第48页 |
·气相色谱和气相色谱-质谱联用仪分析[85] | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第五章 结论 | 第53-55页 |
结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |