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DERA酶原原核表达及阿托伐他汀钙手性中间体的生物合成

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 前言第11-19页
   ·生物催化第11页
   ·生物催化合成的新手性药物第11-13页
     ·6-羟基丁螺环酮(6-hydroxybuspirone)第11-12页
     ·阿巴卡韦(abacavir)第12页
     ·阿托伐他汀钙第12-13页
   ·生物催化手性药物的方式和方法第13-16页
     ·生物催化的方式第13-15页
     ·生物催化的方法第15-16页
   ·生物催化为实现工业化应用待解决的问题第16-17页
     ·高产酶菌株的筛选第16-17页
     ·改进生物催化工艺第17页
   ·他汀类药物研究进展第17-18页
     ·辛伐他汀第17页
     ·氟伐他汀第17页
     ·阿托伐他汀第17-18页
   ·本课题的研究目的和意义第18-19页
第二章 DERA 酶基因的克隆、表达及结构生物学分析第19-35页
   ·材料与方法第19-27页
     ·材料第19-20页
     ·Bacillus subtilis.UD-20 的液体培养及总 DNA 的提取第20页
     ·DERA 酶基因片段的克隆第20-22页
     ·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 蛋白分子高级结构的预测第22-23页
     ·DERA 酶基因与表达载体 pET-32a 连接及基因工程菌的构建第23-25页
     ·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因在 E.coli Rosetta 中的诱导表达第25-26页
     ·重组 DERA 酶的 SDS-PAGE 电泳分析第26-27页
   ·结果与分析第27-33页
     ·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因片段的克隆第27页
     ·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 基因的序列分析第27-31页
     ·Bacillus subtilis. UD-20 DERA 蛋白三维结构分析第31页
     ·原核表达载体的构建第31-33页
     ·重组蛋白的诱导表达第33页
   ·讨论第33-35页
第三章 重组 DERA 酶发酵条件的优化及酶学性质研究第35-47页
   ·材料和方法第35-39页
     ·试验材料第35页
     ·试剂配制第35-36页
     ·重组 DERA 酶发酵条件的单因素优化试验第36-37页
     ·响应面优化基因工程菌的发酵条件第37-38页
     ·重组 DERA 酶学性质研究第38-39页
   ·结果与分析第39-44页
     ·基因工程菌产酶培养条件的单因素优化实验第39-40页
     ·响应面优化基因工程菌产酶的条件第40-42页
     ·重组 DERA 酶的酶学特性第42-44页
   ·讨论第44-47页
第四章 阿托伐他汀钙手性中间体的全细胞催化及检测第47-53页
   ·材料和方法第47-48页
     ·试验材料第47页
     ·试剂配制第47-48页
     ·基因工程菌的获得与全细胞催化第48页
     ·气相色谱和气相色谱-质谱联用仪分析[85]第48页
   ·结果与分析第48-51页
   ·讨论第51-53页
第五章 结论第53-55页
 结论第53-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-65页
攻读学位期间发表的学术论文目录第65-66页

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