| 摘要 | 第1-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-39页 |
| 第一章 哺乳动物毛色形成机制 | 第10-20页 |
| 1. 色素形成的化学和生物化学机制 | 第10-12页 |
| ·真黑素和褐黑素的生物化学机制 | 第10-11页 |
| ·混合型黑素原的形成机制 | 第11-12页 |
| 2. 色素形成的调节 | 第12-14页 |
| ·信号分子及传导通路 | 第12页 |
| ·酶与底物 | 第12-13页 |
| ·激素与神经肽 | 第13页 |
| ·黑色素细胞与邻近细胞的相互作用 | 第13-14页 |
| ·其它因素 | 第14页 |
| 3. 影响色素形成的主效候选基因 | 第14-20页 |
| ·TYR/TYR基因座 | 第15-16页 |
| ·Dct/DCT和TYRP1/TYRP1基因座 | 第16页 |
| ·Oca2(p)/OCA2(P),Slc45a2/SLC45A2(MATP),Si/SILV(PMEL17)基因座 | 第16-18页 |
| ·A/ASIP,Mc1r/MC1R,Pomc/POMC和Slc7a11/SLC7A11基因座 | 第18-20页 |
| 第二章 MIRNAS的研究现状及其在毛色中的应用 | 第20-25页 |
| 1. RNA干扰作用和MIRNA的发现 | 第20-21页 |
| 2. MIRNA生物发生机制 | 第21-22页 |
| 3. MIRNA的功能 | 第22-25页 |
| ·miRNA和皮肤形态发生 | 第23页 |
| ·miRNA和皮肤癌 | 第23页 |
| ·miRNA和伤口愈合 | 第23-24页 |
| ·miRNA和色素形成 | 第24-25页 |
| 第三章 深度测序的研究现状及其在MIRNA上的应用 | 第25-30页 |
| 1. DNA测序技术的发展 | 第25-27页 |
| ·Sanger测序法 | 第25-26页 |
| ·454/Roche FLX测序技术 | 第26页 |
| ·Illumina HiSeq2000测序技术 | 第26-27页 |
| ·SOLiD测序技术 | 第27页 |
| ·测序技术发展前景 | 第27-28页 |
| 2. 下一代测序技术在MIRNAs上的应用 | 第28-30页 |
| 第四章 研究目的、意义与内容 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第二部分 实验 | 第39-109页 |
| 第一章 不同被毛颜色羊驼皮肤的MIRNAS表达谱测序 | 第39-63页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·实验样本 | 第39-40页 |
| ·实验试剂,耗材及仪器 | 第40页 |
| ·溶液配制 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·生物信息学分析 | 第43-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-57页 |
| ·白色和棕色羊驼皮肤总RNA提取结果 | 第45-47页 |
| ·白色和棕色羊驼皮肤小RNA测序结果 | 第47-49页 |
| ·白色和棕色羊驼皮肤已知miRNA的鉴定和分析 | 第49-51页 |
| ·不同被毛颜色羊驼皮肤已知miRNAs的表达差异 | 第51-53页 |
| ·已知miRNAs的碱基编辑分析 | 第53-55页 |
| ·羊驼皮肤中已知miRNAs靶基因的预测 | 第55-56页 |
| ·羊驼皮肤中新miRNAs的识别鉴定 | 第56-57页 |
| 3 分析与讨论 | 第57-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 第二章 荧光定量检测MIRNAS在不同被毛颜色羊驼皮肤中的表达量 | 第63-74页 |
| 1 材料与方法 | 第63-68页 |
| ·实验样本 | 第63页 |
| ·实验试剂,耗材及仪器 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-68页 |
| ·数据分析 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-71页 |
| ·miRNAs普通PCR扩增产物和序列分析 | 第68-69页 |
| ·miRNAs和U6扩增动力学曲线 | 第69-70页 |
| ·miRNAs和U6溶解曲线 | 第70页 |
| ·miRNAs在不同毛色羊驼中的表达差异分析 | 第70-71页 |
| 3. 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第三章 生物信息学预测和筛选MIR-211靶基因及其真核表达载体的构建 | 第74-90页 |
| 1 材料与方法 | 第75-81页 |
| ·实验样本 | 第75页 |
| ·实验试剂,耗材及仪器 | 第75-76页 |
| ·实验方法 | 第76-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-87页 |
| ·生物信息学预测和筛选miR-211靶基因 | 第81-82页 |
| ·候选靶基因KIT扩增、克隆和双酶切 | 第82-83页 |
| ·RNAhybrid验证KIT 3’-UTR和miR-211的结合位点 | 第83页 |
| ·靶基因KIT双荧光报告载体和miR-211过表达载体的构建 | 第83-85页 |
| ·双荧光表达载体转染293T细胞验证候选靶基因 | 第85-86页 |
| ·羊驼皮肤KIT,MITF,TYR,TYRP-1和TYRP-2基因的内源性检测 | 第86-87页 |
| 3. 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-90页 |
| 第四章 MIR-211转染黑色素细胞对色素形成的影响 | 第90-109页 |
| 1 材料与方法 | 第91-99页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·实验试剂、耗材和仪器 | 第91-94页 |
| ·实验方法 | 第94-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-106页 |
| ·miR-211转染羊驼黑色素细胞结果 | 第99-101页 |
| ·miR-211转染羊驼黑色素细胞的表达量变化 | 第101-102页 |
| ·miR-211转染羊驼黑色素细胞后色素含量的检测 | 第102页 |
| ·miR-211转染羊驼黑色素细胞后KIT,MITF,TYR,TYRP-1和TYRP-2基因的荧光定量结果 | 第102-104页 |
| ·miR-211转染羊驼黑色素细胞后KIT,MITF,TYR,TYRP-1和TYRP-2蛋白免疫印迹分析 | 第104-106页 |
| 3 分析与讨论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-109页 |
| 全文总结 | 第109-110页 |
| 研究创新与展望 | 第110-112页 |
| ABSTRACT | 第112-114页 |
| 中英文对照及缩写表 | 第114-115页 |
| 附录 在读期间发表的实验性论文的情况 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
