| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-37页 |
| 第一节 多不饱和脂肪酸的研究概况 | 第13-17页 |
| ·多不饱和脂肪酸的基本概念 | 第13-14页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生理功能 | 第14-15页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物来源 | 第15-17页 |
| 第二节 多不饱和脂肪酸合成途径的研究概况 | 第17-21页 |
| ·多不饱和脂肪酸合成需氧途径 | 第17-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸合成厌氧途径 | 第20-21页 |
| 第三节 脂肪酸脱氢酶的研究概况 | 第21-27页 |
| ·脂肪酸脱氢酶分类 | 第21-22页 |
| ·脂肪酸脱氢酶的基本结构和反应机理 | 第22-24页 |
| ·脂肪酸脱氢酶的进化关系 | 第24-27页 |
| 第四节 脂肪酸延长酶的研究概况 | 第27-32页 |
| ·脂肪酸延长酶分类 | 第27-29页 |
| ·脂肪酸碳链延长反应机理 | 第29页 |
| ·脂肪酸碳链延长酶的结构特点 | 第29页 |
| ·脂肪酸延长酶的进化关系 | 第29-30页 |
| ·脂肪酸链延长酶的分子生物学研究进展 | 第30-32页 |
| 第五节 微藻脂肪酸代谢研究概况 | 第32-34页 |
| 第六节 选题依据和工作路线 | 第34-37页 |
| ·选题依据 | 第35-36页 |
| ·技术路线 | 第36-37页 |
| 第二章 实验材料和实验方法 | 第37-68页 |
| 第一节 实验材料 | 第37-43页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·质粒 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·引物 | 第39-41页 |
| ·培养基的配制 | 第41-42页 |
| ·试剂的配制 | 第42-43页 |
| 第二节 实验方法 | 第43-68页 |
| ·微藻或酿酒酵母总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·微藻基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第45页 |
| ·大肠杆菌质粒的SDS碱裂解法提取 | 第45-46页 |
| ·酿酒酵母感受态细胞的制备及转化 | 第46-47页 |
| ·C20-△5脂肪酸延长酶基因PvElo5的克隆 | 第47-52页 |
| ·PvElo5基因的功能分析 | 第52-55页 |
| ·A4脂肪酸脱氢酶基因IgFAD4-2的克隆 | 第55-58页 |
| ·IgFAD4-2基因的功能分析 | 第58-60页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYAE5-E5-D4的构建 | 第60-63页 |
| ·酿酒酵母工程菌YAE5-E5-D4功能分析 | 第63-64页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYMM5-E5-D4的构建 | 第64-65页 |
| ·酿酒酵母工程菌YMM5-E5-D4的功能分析 | 第65-66页 |
| ·酿酒酵母工程菌产DHA培养条件的优化 | 第66-68页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第68-117页 |
| 第一节 △5延长酶和△4脱氢酶基因的克隆、序列分析及功能鉴定 | 第68-82页 |
| ·巴大藻PvElo5基因的克隆 | 第68-75页 |
| ·球等鞭金藻IgFAD4-2基因的克隆 | 第75-82页 |
| 第二节 在酿酒酵母中构建合成DHA的△8途径 | 第82-91页 |
| ·酿酒酵母共表达载体pYAE5-E5-D4的构建方案 | 第82-83页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYAE5-E5的构建 | 第83-85页 |
| ·酿酒酵母工程菌株YAE5-E5的诱导表达与PUFAs分析 | 第85-87页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYAE5-E5-D4的构建 | 第87-89页 |
| ·酿酒酵母工程菌株YAE5-E5-D4的诱导表达与PUFAs分析 | 第89-91页 |
| 第三节 在酿酒酵母中构建合成DHA的△6途径 | 第91-100页 |
| ·酿酒酵母共表达载体pYMM5-E5-D4的构建方案 | 第92-93页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYMM5-E5的构建 | 第93页 |
| ·酿酒酵母工程菌株YMM5-E5的诱导表达与PUFAs分析 | 第93-96页 |
| ·酿酒酵母表达载体pYMM5-E5-D4的构建 | 第96-97页 |
| ·酿酒酵母工程菌株YMM5-E5-D4的诱导表达与PUFAs分析 | 第97-100页 |
| 第四节 两种生物合成途径的比较和DHA生产条件优化 | 第100-111页 |
| ·两种生物合成途径的比较 | 第100-102页 |
| ·DHA生产条件优化 | 第102-107页 |
| ·DHA生产条件响应面分析 | 第107-111页 |
| 第五节 讨论 | 第111-117页 |
| ·PvElo5基因的克隆与序列分析 | 第111-112页 |
| ·IgFAD4-2基因的克隆与功能分析 | 第112-113页 |
| ·酿酒酵母表达系统的选择 | 第113-114页 |
| ·酿酒酵母共表达体系的确立与PUFAs分析 | 第114-115页 |
| ·两种多不饱和脂肪酸合成途径的比较 | 第115-117页 |
| 第四章 结论与展望 | 第117-119页 |
| 第一节 结论 | 第117页 |
| 第二节 主要创新点 | 第117-118页 |
| 第三节 相关工作的前景展望 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第126-127页 |
