| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-33页 |
| ·燃料乙醇生产概况 | 第11-17页 |
| ·国内外燃料乙醇生产现状 | 第11-13页 |
| ·燃料乙醇生产的原料来源 | 第13-15页 |
| ·燃料乙醇生产用微生物 | 第15-17页 |
| ·Z.mobilis 发酵产醇研究进展 | 第17-26页 |
| ·运动发酵单胞菌概述 | 第17-20页 |
| ·Z. mobilis 天然菌株产醇研究进展 | 第20-23页 |
| ·Z. mobilis 工程菌株产醇研究进展 | 第23-26页 |
| ·Z. mobilis 分子生物学和遗传操作技术研究进展 | 第26-27页 |
| ·Z. mobilis 分子生物学研究进展 | 第26页 |
| ·Z. mobilis 遗传操作技术研究进展 | 第26-27页 |
| ·Z.mobilis 副产物产生相关代谢和基因介绍 | 第27-31页 |
| ·Z.mobilis 副产物产生相关概述 | 第27-28页 |
| ·乳酸产生相关代谢和基因 | 第28-30页 |
| ·山梨醇产生相关代谢和基因 | 第30-31页 |
| ·本课题的研究目的、内容和技术路线 | 第31-33页 |
| ·研究目的 | 第31页 |
| ·研究内容 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第33-54页 |
| ·实验材料 | 第33-41页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第33-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·溶液的配制 | 第36-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·培养基的配制 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-54页 |
| ·菌株的培养 | 第41页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第41-42页 |
| ·Z.mobilis 染色体 DNA 的快速提取 | 第42页 |
| ·PCR 反应 | 第42-44页 |
| ·DNA 酶切反应 | 第44页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第44页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第44-45页 |
| ·DNA 脱磷反应 | 第45页 |
| ·DNA 连接反应 | 第45-46页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第46-48页 |
| ·Z.mobilis 转化子的鉴定 | 第48页 |
| ·质粒 pBPF 的去除和缺陷型菌株的稳定性测定 | 第48-49页 |
| ·Southern blot | 第49-51页 |
| ·LDH 酶活测定 | 第51-52页 |
| ·重组菌株生长曲线的测定 | 第52-53页 |
| ·重组菌株生长发酵分析 | 第53-54页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第54-90页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)、ZM4(D-ldh::FRT)和 ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)菌株的构建及摇瓶中初步评价 | 第55-65页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)菌株的构建 | 第55-58页 |
| ·ZM4(D-ldh::FRT)菌株的构建 | 第58-61页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)菌株的构建 | 第61页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)、ZM4(D-ldh::FRT)和 ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)三个菌株的评价 | 第61-65页 |
| ·ZM4(gfo::FRT)菌株的构建及摇瓶中初步评价 | 第65-79页 |
| ·ZM4(gfo::FRT)菌株的构建 | 第65-68页 |
| ·ZM4(gfo::FRT)菌株的评价 | 第68-79页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)(gfo::FRT)和 ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)(gfo::FRT)菌株的构建及摇瓶中初步分析评价 | 第79-87页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)(gfo::FRT)菌株的构建 | 第79-80页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)(gfo::FRT) 菌株的构建 | 第80-81页 |
| ·ZM4(ldhA::FRT)(gfo::FRT)和 ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)(gfo::FRT)的评价 | 第81-87页 |
| ·ZM4(gfo::FRT)、ZM4(ldhA::FRT)(gfo::FRT)和 ZM4(ldhA::FRT)(D-ldh::FRT)(gfo::FRT)的发酵罐对比分析评价 | 第87-89页 |
| ·分析和讨论 | 第89-90页 |
| 第四章 结论和展望 | 第90-92页 |
| ·结论 | 第90-91页 |
| ·展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 附录 | 第100-101页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
