| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1. 前言 | 第10-19页 |
| ·木薯简介 | 第10-11页 |
| ·木薯高效淀粉累积过程 | 第11页 |
| ·蔗糖合酶简介 | 第11-13页 |
| ·蔗糖合酶的基本性质 | 第11-12页 |
| ·蔗糖合酶的主要功能 | 第12-13页 |
| ·植物启动子简介 | 第13-15页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第13-15页 |
| ·启动子的分析研究方法 | 第15页 |
| ·报告基因 | 第15-17页 |
| ·植物转基因方法 | 第17-18页 |
| ·研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·材料和试剂 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·菌种和试剂 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族的表达分析 | 第20-23页 |
| ·蔗糖合酶基因家族成员的确定 | 第20页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族的进化树分析 | 第20-21页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族成员的表达分析 | 第21-23页 |
| ·薯蔗糖合酶关键基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第23页 |
| ·目的片段回收 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·PCR产物的TA克隆及鉴定 | 第24-25页 |
| ·pZero-SuSy质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·木薯蔗糖合酶关键基因启动子的克隆 | 第26-27页 |
| ·CTAB法提取木薯叶片DNA | 第26页 |
| ·PCR扩增获得启动子片段 | 第26-27页 |
| ·目的片段回收 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·PCR产物的TA克隆及鉴定 | 第27页 |
| ·pZero-pSuSy质粒的提取 | 第27页 |
| ·pCAMBIA 1300和pCAMBIA 1301的载体改造 | 第27-29页 |
| ·过表达载体的构建 | 第29页 |
| ·启动子5’端梯度缺失及研究内含子相关载体的构建 | 第29-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31页 |
| ·原核表达 | 第31-32页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第32-34页 |
| ·电转农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第32页 |
| ·农杆菌叶盘法转化本氏烟草 | 第32-33页 |
| ·转基因烟草的验证 | 第33-34页 |
| 3、结果与分析 | 第34-55页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族的表达分析 | 第34-38页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族成员的确定 | 第34-35页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族外显子-内含子结构分析 | 第35页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族的进化树分析 | 第35-36页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族成员的表达分析 | 第36-38页 |
| ·木薯蔗糖合酶关键基因的克隆 | 第38-40页 |
| ·SuSy1和SuSy4基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| ·SuSy1和SuSy4基因的原核表达 | 第41-42页 |
| ·SuSy1和SuSy4原核表达载体的构建 | 第41页 |
| ·原核表达载体诱导表达 | 第41-42页 |
| ·SuSy1和SuSy4基因的功能验证 | 第42-45页 |
| ·SuSy1和SuSy4过表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·过表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·过表达载体的遗传转化 | 第44-45页 |
| ·SuSy1启动子的5’端缺失研究 | 第45-55页 |
| ·SuSy1启动子的克隆 | 第45-46页 |
| ·SuSy1启动子的元件分析与缺失片段的获得 | 第46-48页 |
| ·5’端缺失载体的构建及内含子缺失载体的构建 | 第48-50页 |
| ·5’端缺失载体及内含子缺失载的烟草遗传转化 | 第50-51页 |
| ·5’端缺失载体的GUS染色 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| ·木薯蔗糖合酶基因家族结构和功能的差异分析 | 第55-56页 |
| ·野生种和栽培种基因结构的差异分析 | 第56页 |
| ·蔗糖合酶上游存在特异的顺式作用元件通过与转录因子结合调控基因的表达 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 6 下阶段研究工作 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
| 附录1：相关培养基和试剂的配制 | 第67-69页 |
| 附录2：载体图 | 第69-71页 |
| 附录3：缩略词表 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |