| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-27页 |
| ·结核分枝杆菌简介 | 第12-13页 |
| ·结核分枝杆菌病的诊断和疫苗研究 | 第13-14页 |
| ·结核分枝杆菌与免疫反应 | 第14-19页 |
| ·结核分枝杆菌蛋白的研究 | 第19-22页 |
| ·Gamma干扰素的研究进展 | 第22-27页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第3章 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28-33页 |
| ·细菌和细胞 | 第28页 |
| ·质粒构建所需材料及获赠质粒 | 第28-30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·缓冲液及相关试剂的配制 | 第30-33页 |
| ·实验方法 | 第33-38页 |
| ·细胞基因组的提取 | 第33页 |
| ·候选蛋白基因的引物设计 | 第33-34页 |
| ·候选蛋白基因的PCR扩增 | 第34页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第34页 |
| ·PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第34-35页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第36页 |
| ·实时定量RT-PCR检测基因mRNA水平 | 第36页 |
| ·Western Blot样品制备 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的原核表达和SDS-PAGE分析 | 第37页 |
| ·原核表达重组蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·统计学方法 | 第37-38页 |
| 第4章 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·候选研究蛋白的选取 | 第38页 |
| ·候选蛋白基因真核表达质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·人源IFN-γ启动子荧光素酶报告质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·结核分枝杆菌相关蛋白对IFN-γ调控的筛选 | 第41-42页 |
| ·结核分枝杆菌Rv0720,Rv3623和Rv3763蛋白原核表达质粒构建及蛋白纯化 | 第42-45页 |
| ·结核分枝杆菌蛋白对IFN-γ调控的检测 | 第45-46页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录一 PCR扩增引物及酶切位点 | 第54-63页 |
| 附录二 调控IFN-γ表达的结核分枝杆菌蛋白的初步筛选 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |