| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-26页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第14-15页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的形态特征 | 第14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌毒素的产生 | 第14-15页 |
| ·代谢途径对苏云金芽胞杆菌芽胞与晶体蛋白形成的影响 | 第15-16页 |
| ·因子 | 第16-21页 |
| ·Bt 中的因子 | 第16-17页 |
| ·σ~(54)因子 | 第17-18页 |
| ·增强子结合蛋白（EBPs）的特点 | 第18-19页 |
| ·σ~(54)的功能及其调控的代谢途径 | 第19-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌中 σ~(54)调控的代谢途径 | 第20-21页 |
| ·参与赖氨酸代谢途径的赖氨酸变位酶的研究进展 | 第21-24页 |
| ·近端梭菌中的赖氨酸变位酶 | 第21-22页 |
| ·马氏甲烷八叠球菌中的赖氨酸变位酶 | 第22-23页 |
| ·枯草芽胞杆菌中的赖氨酸变位酶 | 第23-24页 |
| ·β-赖氨酸分解代谢 | 第24页 |
| ·立题依据、研究内容和目的意义 | 第24-26页 |
| ·立题依据 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25页 |
| ·目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-43页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·抗生素 | 第27-28页 |
| ·酶及生化试剂 | 第28页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-43页 |
| ·PCR 模板粗制备 | 第30页 |
| ·Bt 基因组粗提取 | 第30-31页 |
| ·目的基因的扩增 | 第31-34页 |
| ·酶切反应 | 第34页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第35页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第35页 |
| ·Bt 感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·Bt 的电击转化 | 第35-36页 |
| ·序列的测定和分析 | 第36页 |
| ·同源重组突变体的筛选 | 第36页 |
| ·突变体生长曲线的测定 | 第36页 |
| ·突变体芽胞形成率的测定 | 第36-37页 |
| ·不同 NaCl 浓度下突变体生长情况的测定 | 第37页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第37-38页 |
| ·SigK、GerE 蛋白与启动子的凝胶阻滞实验 | 第38页 |
| ·蛋白定量及 SDS-PAGE 分析 | 第38-39页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性测定 | 第39页 |
| ·Bt 总 RNA 的提取和纯化 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR | 第40-41页 |
| ·SMARTer~(TM)RACE | 第41-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-64页 |
| ·kam 基因簇的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| ·kam 基因簇转录单元分析 | 第44-45页 |
| ·kamA 转录起始位点（Transcriptional Start Sites，TSSs）分析 | 第45-47页 |
| ·kamR 基因插入失活突变株的构建 | 第47-55页 |
| ·kamR 基因插入突变盒的构建 | 第47-49页 |
| ·kamR 基因突变质粒的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| ·kamR 基因同源重组插入突变体的筛选与验证 | 第50-51页 |
| ·kamA/yokU/yozE 基因插入突变盒的构建与筛选 | 第51-53页 |
| ·kamA 基因突变质粒的构建与鉴定 | 第53-54页 |
| ·kamA 基因同源重组插入突变体的筛选与验证 | 第54-55页 |
| ·yodT 基因启动子受 H控制 | 第55-57页 |
| ·kamA 基因启动子受 σ~L、 σ~H和 σ~K的控制 | 第57-59页 |
| ·凝胶阻滞验证 SigK、GerE 对 kamA 的直接调控 | 第59-60页 |
| ·kamR、kamA 的功能分析 | 第60-64页 |
| ·HD( kamR)、HD(ΔkamA)生长曲线的测定 | 第60-61页 |
| ·HD( kamR)、HD(ΔkamA)在盐胁迫条件下生长曲线的测定 | 第61-62页 |
| ·HD(ΔkamR)、HD(ΔkamA)芽胞形成率的测定 | 第62页 |
| ·HD(ΔkamR)、HD(ΔkamA) Cry蛋白产量分析 | 第62-64页 |
| 第四章 讨论 | 第64-70页 |
| ·σ~(54)调控的赖氨酸代谢途径分布 | 第64-67页 |
| ·kam 基因簇的转录调控 | 第67页 |
| ·kam 基因簇的功能 | 第67-68页 |
| ·由 Bt 中赖氨酸代谢模型分析 Cry 蛋白产量不变的原因 | 第68-69页 |
| ·下一步展望 | 第69-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |
