| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·群体感应概述 | 第10-13页 |
| ·G~-菌中AHL介导的信息系统 | 第11页 |
| ·G+菌中寡肽介导的信息系统 | 第11-12页 |
| ·其他信号系统 | 第12-13页 |
| ·群体感应猝灭 | 第13-16页 |
| ·AHLs内酯酶 | 第14页 |
| ·AHL酰基转移酶 | 第14-15页 |
| ·对氧磷酶 | 第15-16页 |
| ·群体猝灭的应用 | 第16-17页 |
| ·群体猝灭在医学上的应用 | 第16页 |
| ·群体猝灭在抗生物污染上的应用 | 第16-17页 |
| ·群体猝灭在农业上的应用 | 第17页 |
| ·碳纳米管 | 第17-18页 |
| ·碳纳米管的结构 | 第17页 |
| ·碳纳米管的改性 | 第17-18页 |
| ·碳纳米管作为固定载体的优势 | 第18页 |
| ·研究目的、研究内容及技术路线 | 第18-21页 |
| ·研究目的 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 苏云金芽孢杆菌aiiA基因的克隆表达 | 第21-51页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·菌株及质粒 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-35页 |
| ·苏云金芽孢杆菌的培养 | 第25页 |
| ·苏云金芽孢杆菌基因组DNA抽提 | 第25-26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR | 第26-27页 |
| ·PCR产物回收 | 第27-28页 |
| ·克隆载体的构建 | 第28页 |
| ·感受态细胞制备 | 第28-29页 |
| ·连接产物转化GST E. coli DH5 α | 第29页 |
| ·pMDl9-T-aiiA转化子的鉴定 | 第29-31页 |
| ·重组pMD19-T-aiiA E. coli DH5 α的保存 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pET28a-aiiA的构建 | 第32-34页 |
| ·连接产物转化GST E. coli DH5 α | 第34页 |
| ·pET28a-aiiA的鉴定 | 第34页 |
| ·pET28a-aiiA重组子转化GST E. coli BL21 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-49页 |
| ·苏云金芽孢杆菌基因组DNA抽提 | 第35页 |
| ·PCR进行aiiA基因克隆 | 第35-36页 |
| ·克隆载体pMD19-T-aiiA基因的构建 | 第36-37页 |
| ·菌落PCR鉴定pMD19-T-aiiA | 第37-38页 |
| ·酶切鉴定pMD19-T-aiiA | 第38-39页 |
| ·DNA序列分析 | 第39-41页 |
| ·重组质粒pET28a-aiiA的构建 | 第41-43页 |
| ·菌落PCR鉴定pET28a-aiiA | 第43-44页 |
| ·酶切鉴定pET28a-aiiA | 第44-45页 |
| ·测序结果分析 | 第45-49页 |
| ·重组工程菌E. coli BL21(DE3)-pET28a-aiiA的保存 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 AiiA蛋白的表达、变性-复性及生物活性检测 | 第51-65页 |
| ·实验材料 | 第51-56页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·主要培养基 | 第51-52页 |
| ·试剂 | 第52-55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·外源基因的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第57-58页 |
| ·包涵体的变性与复性 | 第58-59页 |
| ·包涵体的制备 | 第58页 |
| ·包涵体的变性与复性 | 第58-59页 |
| ·平板酶活性检测 | 第59页 |
| ·镍亲和层析验证His-Tag | 第59-60页 |
| ·实验结果 | 第60-64页 |
| ·外源基因的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·包涵体的变性、复性 | 第61-62页 |
| ·平板酶活性检测 | 第62-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 第四章 碳纳米管固定AiiA酶 | 第65-75页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·菌株 | 第65页 |
| ·材料与试剂 | 第65-66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·MWCNTs的修饰 | 第66-67页 |
| ·样品表征 | 第67页 |
| ·MWCNT-ANTA-Co~(2+)特异性固定与纯化AiiA-(His)_6 | 第67-68页 |
| ·MWCNT-ANTA-Co~(2+)-AiiA酶活性检测 | 第68页 |
| ·Agrobacterium tumefaciens NTL4(pCF218)(pCF372)应用 | 第68-69页 |
| ·实验结果 | 第69-74页 |
| ·样品表征 | 第69-71页 |
| ·MWCNT-ANTA-Co~(2+)特异性固定与纯化AiiA-(His)_6 | 第71-72页 |
| ·固定在载体MWCNT-ANTA-Co~(2+)上的AiiA的酶活性检测 | 第72-73页 |
| ·Agrobacterium tumefaciens NTL4(pCF218)(pCF372)应用 | 第73-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 结论与展望 | 第75-77页 |
| ·结论 | 第75-76页 |
| ·展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
