| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 油菜菌核病研究进展 | 第10-13页 |
| ·核盘菌的分类地位及其危害 | 第10页 |
| ·核盘菌的生物学特性及病害循环 | 第10-11页 |
| ·核盘菌致病机理 | 第11-12页 |
| ·菌核病防治 | 第12-13页 |
| 2 大肠杆菌表达外源蛋白的研究进展 | 第13-15页 |
| ·pGEX原核表达系统 | 第13页 |
| ·pGEX载体的组成成分 | 第13页 |
| ·pGEX载体的表达条件及产物纯化条件 | 第13页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第13-15页 |
| ·关于包涵体的形成 | 第14页 |
| ·关于包涵体的处理 | 第14-15页 |
| 3 核盘菌菌核形成及机理 | 第15-16页 |
| ·菌核的结构 | 第15-16页 |
| ·菌核形成过程 | 第16页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 核盘菌纤维素水解酶基因的克隆与原核表达载体的构建 | 第17-35页 |
| 1 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·载体与质粒 | 第17页 |
| ·分子生物学试剂 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·培养基的配置 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-24页 |
| ·目的基因的克隆与测序 | 第18-22页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第22-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-34页 |
| ·目的基因的克隆与测序分析 | 第24-31页 |
| ·总RNA分析 | 第24页 |
| ·基因全长的克隆 | 第24-25页 |
| ·菌落PCR检测 | 第25-27页 |
| ·测序结果的同源性比对 | 第27-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·重组表达质粒菌落PCR的检测 | 第31-32页 |
| ·重组表达质粒双酶切的鉴定 | 第32-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第35-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·载体 | 第35页 |
| ·分子生物学试剂 | 第35页 |
| ·仪器设备 | 第35页 |
| ·溶液的配置 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的小量诱导表达 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳分析 | 第36-37页 |
| ·考马斯亮蓝G-250染色法 | 第37页 |
| ·重组蛋白的表达形式分析 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·重组蛋白的小量诱导表达 | 第37-40页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第40-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 菌核形成条件、菌核结构和储藏物的研究 | 第44-56页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·分子生物学试剂 | 第44页 |
| ·仪器设备 | 第44页 |
| ·培养基的配置 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·菌株材料与培养 | 第44-45页 |
| ·培养基中菌核形成的条件 | 第45页 |
| ·核盘菌菌核结构的观察 | 第45页 |
| ·核盘菌菌核储藏物质的组织化学染色 | 第45-46页 |
| ·菌核与液滴中蛋白检测 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-54页 |
| ·核盘菌菌核形成过程的观察 | 第46-48页 |
| ·不同生长条件下菌核的形成 | 第48-50页 |
| ·大小不同培养皿中菌核的形成 | 第48页 |
| ·菌丝生长相遇与菌核的形成 | 第48-49页 |
| ·木质牙签顶端菌核的形成 | 第49-50页 |
| ·不同营养条件与菌核的形成 | 第50页 |
| ·核盘菌菌核结构的观察 | 第50-52页 |
| ·菌核组织化学染色和可溶性蛋白类型 | 第52-54页 |
| ·菌核形成液滴中蛋白质 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 全文总结与创新点 | 第56-58页 |
| 1 总结 | 第56页 |
| 2 创新点 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 缩写表 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |